Medicine
This content is Open Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Ортопедическая трансплантация почек в свиной модели с использованием 24 часов сохранения органов и непрерывной телеметрии
Chapters
Summary August 21st, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Крупные модели животных играют важную роль в доклинкологических исследованиях трансплантации. Благодаря своему сходств с клинической установкой, свиная модель ортопедической трансплантации почек, описанная в этой статье, обеспечивает отличную установку in vivo для тестирования методов сохранения органов и терапевтических вмешательств.
Transcript
Этот протокол описывает все ключевые шаги для успешного создания свиной ортопедической модели автоматической трансплантации почек с использованием времени сохранения органов в течение 24 часов и пери-оперативного телеметрического мониторинга. Основным преимуществом этой крупной модели автоматической трансплантации животных по сравнению с исследованиями ex-vivo на моделях мелких животных являются хирургические анатомические и патофизиологические сходства с клиническими установками. Наша команда в университетской больнице RWTH Aachen будет демонстрировать процедуры.
После подтверждения соответствующего уровня седии в ночь постилась взрослая самка свиньи, сделать три-пять сантиметров разрез в паху и вскрыть бедренную артерию в 360 градусов моды. Используйте скальпель номер 11, чтобы сделать артериотомию и вставить артериальный датчик телеметрии устройства. Сделав подкожный мешок на левом фланге, туннель телеметрии транспондера на фланг и исправить транспондер к мышечной фасции с 3-O полипропилена одного узла шва.
Затем сделайте два небольших разреза на левой и правой стороне грудной клетки и туннель красных и белых электродов ЭКГ в назначенное место. Когда электроды будут защищены, начать регистрацию телеметрии данных. После стабильного приобретения сигнала, закрыть разрез паха с швами и спрей пленка соусом и место подходящего размера свиной куртке на животное.
Через 14 дней после первой операции сделайте разрез на четыре-пять сантиметров в яремной канавке на правой стороне обезболивающего животного и рассекните подкожно-мышечную ткань, чтобы разоблачить жонглерную вену. Используйте пилинг от листа введения или метод Seldinger вставить яремного катетера. Закрепить катетер полипропиленовым швом 5-0 и закрыть разрез на два слоя.
После хирургической дезинфекции и стерильной драпировки, выполнить средний лапаротомии, чтобы открыть живот и использовать стандартный брюшной втягивающий разоблачить хирургическое поле. Откройте брюшной слой и используйте монополярную прижигать, биполярные миппы и тонкие ножницы, чтобы вскрыть левую почку и мочеточник из любой ткани адепта. Затем используйте 3-0 Polyglactin шов для ligate и разделить левый мочеточник по крайней мере 10 сантиметров дистальной почки.
Для извлечения трансплантата почки, использовать сосудистые зажимы, чтобы закрыть почечную артерию и вену близко к аорты и вены кавы. И вырезать сосуды над моллюсками. Затем дайте почку на задний стол команды для дополнительной подготовки и использовать 5-0 полипропиленовый шов, чтобы закрыть пень почечной артерии и почечной вены.
Сразу же после извлечения, используйте стандартный 14 калибровочный периферический катетер, чтобы cannulate почечной артерии и промыть почку, по крайней мере 500 миллилитров ледяного раствора сохранения органов. После промывки, оберните трансплантат в стерильные мешки органов для хранения в растворе сохранения органов с целевой холодной ишемической времени 24 часов при четырех градусах по Цельсию с помощью компьютера контролируемой цепи охлаждения. За две-пять минут до зажима сосудов внутривенно вводят 100 международных единиц на килограмм натриума гепарина, а затем удаляют контралатерацию правой почки, как это было продемонстрировано, и вновь открывают медианную лапаротомию.
За две-пять минут до зажима сосудов внутривенно вводят 100 международных единиц на килограмм натриума гепарина и впоследствии удаляют контралатерацию правой почки, как это было продемонстрировано. Поместите сохраненную трансплантатную почку в хирургическое поле и инициируете администрирование от 0,1 до 1 микрограмма на килограмм в минуту норадреналина в качестве непрерывного вливания с использованием среднего артериального кровяного давления и сердечного ритма для контроля эффективности. Для эндо-энд-анатомоза почечной вены, используйте 5-0 полипропилена, чтобы поместить два угловых стежка и швы задней стенки в непрерывной моды.
После завершения задней стенки, используйте один конец черепного углового стежка, чтобы швы передней стены в craniocaudal направлении и промыть вену с 100 международных единиц на миллилитр гепаринизированного солевого раствора. Для конца-к-конца анатомоза почечной артерии, используйте 6-0 полипропилен черепный угол стежок перед использованием парашютной техники, чтобы шв задней стенки в непрерывной моды, как попродемонстрировано. Шов передней стенки с другим концом двойного вооруженного 6-0 полипропиленового шва и промыть артерию с 100 международных единиц на миллилитр гепаринизированного солевого раствора.
После завершения анатомоза свяжите две нити в хвостовом углу и последовательно откройте венозные сосудистые и артериальные зажимы, чтобы дать возможность реперфузии почек. После реперфузии, местно ввисят пять миллилитров папаверина к внешней стенке почечной артерии и внутривенно вводят 250 миллилитров 20%-глюкозного раствора в одной 80-миллиграммовой дозе фуросемида. Далее, пройти 12 французский детский катетер мочи через брюшную стенку и кожу и использовать лигатуры для обеспечения катетер мочеточника.
Закройте брюшной слой над почкой, чтобы предотвратить вывих трансплантата и излом сосудистого анатомоза. И закройте живот в четыре слоя, как попродемонстрировано. Наконец, используйте цвет Доплер ультразвук для обеспечения адекватной артериальной и венозной перфузии трансплантата почки, прежде чем вернуть полностью лежачих животных в жилой комплекс.
В этом репрезентативном наборе из пяти экспериментов по аутоплантологии свиной ортопедической почки, транспондерная имплантация и процедуры автоматической трансплантации были успешными в каждом животном с достаточными телеметрическими сигналами, зарегистрированными в течение периода наблюдения. После закрытия брюшной полости, цвет Доплер УЗИ выявил удовлетворительные артериальные и венозные перфузии почек во всех случаях. Значения калия и креатина в сыворотке крови достигли своего пика в послеоперационные дни в три-четыре и показали постепенное восстановление после этого.
РН крови оставался в пределах нормы, а выход мочи восстанавливался до нормальных значений в течение первых четырех послеоперационных дней. Этот протокол может быть использован для ответа на различные вопросы о влиянии методов сохранения органов или ex-vivo или in-vivo терапии в клинически значимой модели крупных животных.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
