Neuroscience
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ラット内側胃腸筋単一運動ユニットの機能的分離
Summary December 26th, 2020
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この方法は、ラット内側胃腸筋の3種類の運動単位におけるけいれんおよびテタニック収縮および作用電位の力の記録を可能にする。単一のモーターユニットの機能的な分離は、軸索の電気刺激によって誘導される。
Transcript
この方法は実験動物の塊を扱う単一のモーター単位の機能分離を可能にする。この技術の主な利点は、特定された生理学的タイプの個々の運動単位の力および作用電位の記録である。この手順のデモンストレーションを支援するのは、神経生物学部門の責任者であるヤン・チェリホフスキ教授です。
まず、脊柱に沿って、仙骨から胸椎まで、鋭い鈍いはさみで皮膚を切断することから始めます。S1椎骨を最も低いセグメントとして識別します。その後、長軸筋を切断し、L6からL2椎骨に棘のプロセスを除去します。
L6からL2までの横断プロセスを除去し、硬膜で覆われた脊髄の腰部セグメントを露出させるためにL6からL2セグメントの上にラミネクトミーを行うためにファイン・ロンガを使用してください。鋭利なはさみを使用して、L2椎骨セグメントで脊髄と背骨と腹側の根を切断し、ラミネクトミーの上部境界のレベルを示します。乾燥ゲルフォームの小片を置いて出血を止めます。
次に、鋭い鈍いはさみを使用して、アキレス腱から股関節まで、左後肢の後部側に縦方向の抱擁を行います。上腕二頭筋で覆われた膝関節の後ろのポピタル窩を見つけ、この筋肉の前部と後部の間にカップを作ります。上に移動し、上腕二頭筋の2つの頭を股関節まで切り、坐骨神経を露出させる。
鈍い鉗子とはさみを使用して、胃頭の内側頭から側面を分離し、内側胃頭筋の遠位挿入を切断する。内側胃腸またはMG神経を特定し、後二頭筋および半腱症への副次的な副次的な関与を含む坐骨神経の残りのすべての副次的な関与を切るために鉗子およびはさみを使用する。アキレス腱を通して非弾性合字を飼育し、3つの結び目を作る。
その後、中央一族との動員のために左後肢の前部側に沿って皮膚と根底にある結合組織に2センチメートルの切開を行います。脛骨にスチールクランプを置いて、左後肢を固定します。カスタムで作成された調整可能なフレームにラットを配置します。
4つの合字でラミニング術の周りの皮膚フラップを引っ張ります。そして、露出した脊髄の上にパラフィン油のためのプールを形成するためにフレームにそれらを縫合する。デュモン55鉗子を使用して、脊髄の交点でデュラマーターを持ち上げます。
その後、仙骨までそれを切り取り、それを引き込む。鈍いガラス棒と連続したレベルで左右の側側および腹側の根を分離します。露出した腹側と側側根を覆う温かいパラフィン油で脊髄の上のプールを満たします。
後肢用のプール付きのカスタムメイドのアルミニウム板にラットを置き、閉じたループ加熱システムに接続します。左後肢のクランプを金属製の棒で固定して固定します。脊椎骨とL1椎骨にスチールクランプを置いて椎柱を固定します。
次に、左内側の胃腸筋と非弾性合字をアキレス腱を介して力変換器に接続します。双極性銀線または電極を筋肉の中央部に挿入し、長い軸に垂直に、後肢のチャンバーに温かいパラフィン油を充填して、心内耳腫筋を覆う。力トランスデューサによって制御される100ミリニュートンの受動的な緊張に操作された筋肉を伸ばす。
次に、シャープな鈍いはさみを使用して右後肢の皮膚に2センチメートルの切開を行い、参照電極として使用する銀線電極を挿入します。露出した脊柱根の上にカスタムメイドの絶縁金属板を置いて固定します。プレートに腹側と裏根の左のペアを置きます。
そして、ラミネクトミーの周りの皮膚によって形成されたプールに生理学を追加します。露出した脊柱の根の上に銀線刺激電極を置き、油でプレートの上に3ミリメートルの正極を置き、生理食突に負極を置きます。電気矩形パルスで腹側根を刺激し、筋肉の収縮を呼び起こす。
Dumont 55鉗子と拡大鏡を使用して、L5またはL4腹側根を非常に細かい軸索の束に分割します。銀線電極にこれらのバンドルの1つを置き、それを刺激して単一のモーターユニットの活性を観察します。刺激の強度を徐々に増加させることにより、ツイッチ収縮および作用電位刺激の呼び起こされる全くまたはなしの文字に基づいて単一のモータユニットを同定する。
モータユニットの収縮と作用電位のパラメータは、安定した記録条件が保証されている場合に記録を使用して計算することができます。高速モーターユニットの単一のツイッチの代表的な記録をここに示します。上のトレイは、モータユニットの動作ポテンシャルを示します。
刺激送達と運動ユニットの発症の起こり得る間の遅延は、腹側根から筋肉への伝導時間によるものである。高速モーターユニットの未注入破傷風力と運動ユニットの作用電位の列車の代表的な記録は、適用された刺激の時間位置と共にここに示されている。この手順を試みる前に、腹側根を薄いフィラメントに分割するには、トレーニングと経験が必要であることを覚えておいてください。
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