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इस प्रोटोकॉल में, एपिमेडी फोलियम (ईएफ) की मटन-तेल प्रसंस्करण तकनीक को बॉक्स-बेनकेन प्रयोगात्मक डिजाइन-प्रतिक्रिया सतह पद्धति को लागू करके अनुकूलित किया गया था, और जेब्राफिश भ्रूण के विकास पर कच्चे और अनुकूलित पानी-निकाले गए ईएफ के प्रभाव की प्रारंभिक जांच की गई थी।