Préparation et coloration par immunofluorescence de faisceaux et de cellules à fibres uniques du cortex et du noyau du cristallin

Le cristallin est un organe ellipsoïde transparent situé dans la chambre antérieure de l’œil et est responsable de la focalisation fine de la lumière sur la rétine pour créer une image claire. La fonction de la lentille repose sur ses propriétés biomécaniques, les interdigitations complexes entre les cellules de la fibre de lentille se sont récemment avérées importantes pour la rigidité de la lentille. Bien que la morphologie spécialisée des cellules à fibres de cristallin ait déjà été décrite par microscopie électronique, on sait peu de choses sur les protéines nécessaires à ces membranes imbriquées.

Des études antérieures se sont appuyées sur des coupes de tissu de cristallin, qui ne permettent pas une visualisation claire de l’architecture cellulaire complexe. Nous avons créé et perfectionné une nouvelle technique pour préserver fidèlement les interdigitations membranaires complexes entre les cellules de fibres du cristallin pour la coloration et l’imagerie par microscopie confocale de protéines spécifiques. Dans ce protocole, il existe également une nouvelle méthode pour colorer les cellules fibreuses du centre de la lentille, également connue sous le nom de noyau de la lentille.

Cette méthode ouvre la porte à la compréhension de la différenciation et de la maturation des cellules fibreuses en étudiant les mécanismes de formation et de changement dans les interdigitations membranaires.