Preparo e Coloração por Imunofluorescência de Feixes e Células Monofibrais do Córtex e Núcleo do Cristalino Ocular

O cristalino é um órgão elipsoide transparente na câmara anterior do olho, e é responsável pelo foco fino da luz na retina para criar uma imagem clara. A função da lente depende de suas propriedades biomecânicas, interdigitações complexas entre as células de fibra da lente têm se mostrado recentemente importantes para a rigidez da lente. Embora a morfologia especializada das células de fibras do cristalino tenha sido previamente descrita por microscopia eletrônica, pouco se sabe sobre as proteínas necessárias para essas membranas interligadas.

Estudos prévios basearam-se em cortes de tecido do cristalino, que não permitem a visualização clara da arquitetura celular complexa. Criamos e aperfeiçoamos uma nova técnica para preservar fielmente as complexas interdigitações de membrana entre as células de fibras do cristalino para coloração e imagens de microscopia confocal de proteínas específicas. Nesse protocolo, há também um novo método para colorir as células de fibra do centro da lente, que também é conhecido como núcleo do cristalino.

Este método abre as portas para a compreensão da diferenciação e maturação das células fibrosas, estudando os mecanismos de formação e mudanças nas interdigitações de membrana.