دليل ضبط النفس وطرق الإدارة المشتركة في مجمع الفئران والجرذان

Biology
 

Summary

العمل بأمان وإنسانية مع القوارض البحث يتطلب الكفاءات الأساسية في أساليب المناولة وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع بأمان وفعالية إدارة المركبات على الفئران والجرذان.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771 (2012).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

أن تكون قادرة على كبح جماح بأمان وفعالية الفئران والجرذان هو جزء مهم من إجراء البحوث. العمل بثقة وإنسانية مع الفئران والجرذان يتطلب الكفاءة في أساليب التعامل مع الأساسية وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع الحيوانات بأمان. وسيتم توضيح بيد واحدة، باليدين، وضبط النفس مع الكائنات ضبط النفس المصممة خصيصا. في كثير من الأحيان، وآخر جزء من البحث أو استخدام اختبار الحيوانات هي الإدارة الفعالة للمركبات على الفئران والجرذان. بالرغم من وجود عدد كبير من الطرق الممكنة الإدارة (محدود فقط من حجم وأجهزة الحيوانية)، لا يتم استخدام معظم بانتظام في مجال البحوث. وهذا الفيديو يوضح العديد من الطرق الأكثر شيوعا، بما في ذلك عن طريق الوريد، العضل، تحت الجلد، وبالتزقيم عن طريق الفم. الهدف من هذه المقالة هو لفضح المشاهد غير مألوف مع هذه التقنيات لضبط النفس الأساسية وطرق إدارة المواد المخدرة. هذا الفيديولا يحل محل التدريب العملي على التدريب المطلوب في مرفق الخاص بك، ولكن المقصود لزيادة واستكمال هذا التدريب.

Protocol

1. ضبط النفس والتعامل مع آمنة من الحيوانات لطيف هو جزء رئيسي من الإجراءات التجريبية

  1. تم تصميم هذا الفيديو ليكون مكملا للالتدريب العملي على التدريب الذي تقدمه المؤسسة.
  2. تكون دائما على يقين أن IACUC أو لجنة الأخلاقيات في مكان الموافقة قبل البدء في أي إجراء التجارب.
  3. يجب على كل شخص يعمل على بروتوكول معرفة تفاصيل الإجراءات المعتمدة لذلك البروتوكول، وأية الآخرين الذي يعملون فيه.
  4. الاقتراب من القوارض بثقة والتعامل مع الحيوانات بلطف ولكن بحزم. قد حد سواء جدا، ونهج التعامل مع الخام مؤقت يؤدي إلى العض أو الخدش إلى معالج أو إصابات للحيوان.
  5. عند التعامل مع الحيوانات، وهناك دائما إمكانية إطلاق عرضي أو الحيوان يتم إسقاط. يتم تنفيذ معظم هذه أفضل التلاعب على سطح العمل بحيث إذا تم إسقاط الحيوان أو الهروب، لا جرح، ويمكن أن تكون استعادت بسهولة. اتبع الجهاز جرت مقاضاتها الخاصtutional السياسات المتعلقة الحيوانات التي الاتصال الكلمة.
  6. أبدا التعامل مع الحيوانات من قبل طرف الذيل، لأن هذا قد يؤدي إلى الإصابة لحب الذيل. كن حذرا خاصة مع الفئران الكبيرة أو الفئران الحوامل. دائما استخدام اليد الأخرى لدعم الجسم أثناء رفع من ذيله.
  7. الإبر الحادة تعمل بشكل أفضل عندما يعطي عن طريق الحقن. على الرغم من أن تستخدم أحيانا للقوارض مختبر الإبر لحقن متعددة، لا ينصح بذلك لعدد من الأسباب، أقلها هو أن مقياس صغيرة تستخدم في كثير من الأحيان يعني أن الإبر مملة بسرعة.
  8. يجري لعض أو الخدش احتمال وارد دائما عند العمل مع الحيوانات. إذا كان يعمل مع مادة أو وكيلا المعدية التي قد تسبب إصابة البشر، واتخاذ احتياطات اضافية، مثل الحيوانات التلاعب أو وكلاء في اغطية الدخان أو خزانات السلامة البيولوجية.
  9. ويمكن للنهج لطيف والتأقلم على التعامل مع قبل محاولة إجراء سداد في الحيوانات التي شددت عليها أقل المناولة.
  10. ممارسة ضبط النفس قبل محاولة إدارة المجمع، وممارسة إدارة المواد للسيطرة على الحيوانات قبل حيوانات التجارب.
  11. ممارسة هذه التقنيات يغرس الثقة بانتظام والنتائج الثقة في التعامل مع أفضل والحيوانات أقل شدد، ونتائج علمي أفضل.
  12. مع أي تقنية معالجة، إذا كان الحيوان هو المعاند، حاول أسلوب مختلف. قد الحيوانية (ومعالج) تستفيد أيضا من وضع الحيوان مرة أخرى في قفص ويحاول مرة أخرى في وقت لاحق.

2. دليل ضبط النفس

  1. بيد واحدة الماوس ضبط النفس
    1. رفع ماوس من قاعدة الذيل ووضعه على غطاء القفص، قفص السلك الأعلى بار، أو سطح مماثلة الخام.
      1. عادة ما يتم إجراء واحد ضبط النفس الماوس اليد مع اليد غير المسيطرة، وترك اليد المهيمنة مجاني للاستخدام.
      2. طريقة بديلة يسمح للفني لاستخدام معطف المختبر أو الأكمام التي تغطي الساعد موحدة لوضعقبل ضبط النفس الحيوانية.
    2. دس على قاعدة الذيل بين 3 و 4 ش الاصبع عشر، في حين سحب بلطف مرة أخرى على الذيل. سيؤدي ذلك إلى فهم الماوس السطح مع جميع الكفوف الأربعة وسحب إلى الأمام.
      1. فهم لا الفئران من قبل طرف الذيل، وخاصة إذا تعلق الجسم كله من الذيل. هذا يمكن أن يسبب إصابة لحب الذي جلد الذيل ينزلق باتجاه آخر.
    3. المقبل، نتشبث الماوس من القفا مع نفس اليد التي تحتجز الذيل. فهم مع السبابة والإبهام بالقرب من قاعدة الرأس وتمديد قبضة التراجع الماوس، عن طريق إدماج الأوسط واصبع البنصر.
      1. تأكد من الضغط ما يكفي، أو الحزم، على الجلد حول العنق لمنع تحول الفار من التواء أو من ضبط النفس، ولكن لا شد الجلد بإحكام بحيث لا يمكن للحيوان التنفس.
      2. السيطرة على الرأس أمر بالغ الأهمية. إذا كانالماوس يمكن ان تتحرك الرأس، ويمكن أن تصل إلى أصابع معالج ودغة قد. قد يحدث هذا عندما معالجات المبتدئ فهم الماوس بعيدا جدا أسفل الظهر، بدلا من حق وراء الجمجمة.
  2. ضبط النفس الماوس بكلتا اليدين
    1. رفع ماوس من قاعدة الذيل ووضعت على الغطاء قفص، والأسلاك غطاء شريط، أو سطح خشن.
      1. طريقة بديلة يسمح للفني لاستخدام معطف المختبر أو الأكمام التي تغطي الساعد موحدة لوضع الحيوان قبل ضبط النفس.
    2. سحب بلطف إلى الوراء على الذيل والماوس وفهم السطح مع أربعة الكفوف وسحب إلى الأمام.
    3. المقبل، ومن جهة أخرى مع بسرعة وبحزم فهم الماوس من القفا من الرقبة (رؤية واحدة ضبط النفس الوفاض أعلاه).
    4. مع الذيل في يد واحدة والقفا في الآخر، رفع الماوس والثنية قاعدة الذيل بين النخيل والاصبع ال 3 ش أو 4 من يد تمسك القفا.
      1. كما هو الحال مع الأسلوب بيد واحدة، نتشبث القفا لمنع التواء أو الفار من تحول في حين لا يمسك بحزم حتى أن الحيوان لا أستطيع التنفس.
      2. إذا كان الماوس هو مقاومة للscruffing، يمكن ضغط لطيف على ظهر الماوس، تسمح من جهة لنقل ما يصل لفهم أفضل.
  3. ضبط النفس الفئران؛ scruffing
    1. عموما يتم تنفيذ scruffing الفئران باليدين وفقط في أصغر الفئران. أنها ليست تقنية يشيع استخدامها لأن الفئران هي أقل قبولا للscruffing من الفئران، ولكن من المفيد في بعض الحالات جمع الدم.
    2. فهم الفئران من ذيله مع اليد غير المسيطرة وسحب إلى الوراء بلطف على سطح خشن (كما هو موضح أعلاه بالنسبة للفئران).
      1. أن تحرص على فهم بالقرب من قاعدة الذيل، والجلد في الجرذ الذيل يمكن أن تؤتي ثمارها إذا أدرك قرب الطرف.
    3. عقد الذيل بقوة في يده والاقتراب من القفا من الفئران من الخلف.
      1. لأمثلجنيه، إذا ذيل الفأر هو في يد معالجات 'اليسار، لا نقترب من الفئران من الأنف إلى القفا مع اليد اليمنى. بدلا من ذلك، تصل إلى أكثر من اليد اليسرى، والاقتراب من القفا من الخلف.
    4. تطبيق ضغط لطيف على الجزء الخلفي من الفئران، على لوحي الكتف، فهم القفا ثم بالقرب من قاعدة الجمجمة بين الأصابع وراحة اليد.
    5. السيطرة على الرأس من المهم لمنع لدغات. يمكن لدغات الفئران تسبب إصابات خطيرة.
    6. قد نطق الفئران عندما ضبط النفس في هذه الموضة.
  4. ضبط النفس الفئران، وما يزيد على قبضة الكتف
    1. فهم الفئران من ذيله مع اليد المهيمنة وسحب إلى الوراء بلطف على سطح خشن (كما هو موضح أعلاه بالنسبة للفئران).
      1. طريقة بديلة يسمح للفني لاستخدام معطف المختبر أو الأكمام التي تغطي الساعد موحدة لوضع الحيوان قبل ضبط النفس.
      2. أن تحرص على فهم بالقرب من قاعدة الذيل، حيث أن الفئران ذيل CA الجلدن تؤتي ثمارها إذا أدرك قرب الطرف.
    2. وضع اليد غير المسيطرة على ظهر الفئران، وتقترب من الخلف.
    3. فهم الفئران حول الصدر مع البنصر، الخنصر، والإبهام. يجب رأس فأر يكون بين المؤشر وأصابع الأوسط.
      1. لا ضغط القفص الصدري.
    4. ويمكن عقد الفئران بهذه الطريقة بيد واحدة، إذا استقر الجسم ضد معالج.
  5. ضبط النفس الفئران؛ تحت قبضة الكتفين
    1. فهم الفئران من ذيله مع اليد المهيمنة وسحب إلى الوراء بلطف على سطح خشن (كما هو موضح أعلاه بالنسبة للفئران).
      1. طريقة بديلة يسمح للفني لاستخدام معطف المختبر أو الأكمام التي تغطي الساعد موحدة لوضع الحيوان قبل ضبط النفس.
      2. أن تحرص على فهم بالقرب من قاعدة الذيل، والجلد في الجرذ الذيل يمكن أن تؤتي ثمارها إذا أدرك قرب الطرف.
    2. وضع اليد غير المسيطرة على صفي ظهره، وتقترب من الخلف.
    3. فهم الفئران حول الصدر، والحق تحت لوحي الكتف. وينبغي الساعدين في الجرذ دفع بلطف مع الإبهام والسبابة.
      1. ينبغي أن الساعدين عبور تحت الذقن في الجرذ، ومنعه من العض.
      2. لا ضغط القفص الصدري.
    4. ويمكن عقد الفئران بهذه الطريقة بيد واحدة، إذا استقر الجسم ضد معالج.
  6. Decapicone
    1. A Decapicone هو مرن، مخروطية الشكل قطعة من البلاستيك رقيقة مع وجود ثقب في نهاية واحدة. ثقب صغير بما فيه الكفاية بحيث الماوس أو الفئران يمكن الحصول على الأنف للخروج من الحفرة، ولكن ليس بقية الجسم.
    2. لكبح جماح الحيوان، ضع الماوس أو الفئران في Decapicone من الحجم المناسب.
    3. دفع الحيوان إلى الأمام حتى أنفها يبرز من فتحة في Decapicone.
    4. الاستمرار على أي حقيبة مغلقة حول الذيل، أو استخدام التعادل تويست لاغلاق الحيوان في المخروط.
    5. وفيلادلفيا للجنرال الكتريك لDecapicone هو أن يسمح بلاستيكية رقيقة لحقن من خلال المواد.
    6. العيب هو أن المواد لا تتنفس والحيوانات يمكن أن تصبح محموما. تبقي فقط حيوان في Decapicone لطالما ما يلزم لتنفيذ الإجراء.
  7. الاكريليك / البلاستيك جامدة restrainer
    1. أجهزة ضبط النفس البلاستيك مفيدة بشكل خاص عندما يجب الوصول إلى ذيل الحيوان.
    2. ويمكن شراء هذه أو تجاريا المحرز في المختبر.
    3. يجب أن يكون حجم مناسب للحيوان الى ضبط النفس - الحيوان لا ينبغي أن تكون قادرة على تغيير مسار في ضبط النفس.
    4. وضع الحيوانات في الجهاز ضبط النفس من جانب أول تقييد الحيوان برفق، ثم الإفراج عن رئيس والعشرين، في افتتاح الجهاز.
      1. فإنه قد يساعد على الجهاز تهدف إلى أعلى أكثر من القفص، وسوف يتبارى القوارض غالبا ما إلى بنية آمنة، مثل أنبوب.
    5. وضع الإغلاق على نهايةجهاز، والحرص على عدم الاضرار ذيل الحيوان والقدمين، أو الخصيتين.
    6. تقليل الوقت الذي يقضيه في restrainers منذ الحيوانات قد ارتفاع درجة الحرارة.
  8. ويمكن تقييد الحيوانات بطرق أخرى أيضا، مثل التفاف منشفة صغيرة في، أو عن طريق الحجامة مجرد تسليم الحيوان. ويمكن تعديل التقنيات لتلبية احتياجات الحيوان والعمال. دائما تأخذ الرعاية لتجنب لدغات والخدوش وتأمين الحيوان من إطلاق عرضي أو السقوط من أماكن مرتفعة.

3. طرق إدارة المجمع

  1. هذه ليست بأي حال قائمة شاملة وطرق أخرى ممكنة. هذا البروتوكول يسعى لتوضيح الطرق الأكثر شيوعا. قد تتطلب التخدير طرق أخرى للحيوان وبعد الإدارة لتخفيف الآلام.
  2. بغض النظر عن الطريقة المستخدمة الإدارة، تأكد من إعداد جميع المواد قبل تقييد الحيوانات.
  3. المواد المائية هي أسهل لحقن المواد سمكا من مثل قاعدة للنفطمركبات د. حقن دائما سمكا المركبات ببطء شديد لتجنب طرد الإبرة من الحقنة.
  4. اعتبارات عامة استخدام الإبر والمحاقن.
    1. تخزين دائما والتخلص من المحاقن والإبر بشكل صحيح.
    2. إذا كنت جديدا على استخدام المحاقن والإبر، وممارسة التعامل مع حقن الحقنة وقبل محاولة حقن حيوان. من الناحية المثالية، سوف تكون قادرة على التلاعب بثقة المحقنة والإبرة بيد واحدة، وترك الأخرى لضبط النفس من الحيوان. مطرد من ناحية يقلل حركة الإبرة الذي يقلل تلف الأنسجة.
    3. الإبر لها نقطة، وشطبة، ورمح، ومركزا. المحاقن لها تلميح، برميل، والمكبس (الشكل 1 أ و ب).
    4. الإبر هي من الحجم وطول قياس. أكبر عدد قياس، أصغر إبرة. الإبر الصغيرة جدا عرضة لتبلد (من لدغ تتشكل على الحافة)، وينبغي ألا تستخدم لقوارير متعددة الجرعات بيرس (الشكل 1 ج). دائما اختيارأقصر الإبرة التي ستعمل على إدارة المجمع.
    5. يتم إرفاق الإبرة إلى غيض من حقنة من لوحة الوصل. بعض الحقن وتأمين نصائح. وتكون دائما على يقين بإحكام المحقنة إلى الإبرة.
    6. يتم إدراج أفضل الإبر في الحيوانات مع شطبة الأعلى، وخاصة بالنسبة للحقن في الوريد.
    7. خلاصة أبدا الإبر باليد. هذا هو سبب شائع للإصابة وخز الإبر. التخلص من الإبر والمحاقن في حاويات الأدوات الحادة بشكل صحيح المسمى. إذا كان يجب recapped الإبر والأجهزة المتاحة (الشكل 1 د).
  5. الأنف (IN)
    1. تقييد الحيوان كما هو موضح أعلاه.
    2. باستخدام حقنة أو pipettor، ضع كمية صغيرة من المواد التي سيتم استنشاقه في فتحتي الأنف من الحيوان.
    3. مشاهدة لمواد لتختفي في فتحتي الأنف.
    4. كرر حسب الضرورة حتى يتم إدارة حجم المطلوب.
  6. العضلي (IM)
    1. كبح جماح الالحيوان ه كما هو موضح أعلاه. تأكد من احدى ساقيه الخلفيتين الحيوان مجاني واستقرت لحقن. قد يستغرق ضبط النفس شخصين. إذا كان الحيوان يمكن ركلة خلال الحقن، وسوف الضرر العضلات من الإبرة نتيجة.
    2. وينبغي إدراج إبرة عمودي على الجلد من الحيوان. باستخدام حقنة مناسب الحجم والإبرة، أدخل الإبرة تقريبا شطبة العميقة وحقن المواد إلى عضلات الفخذ الحيوان (الجزء الأمامي من الفخذ) أو الجانبي كتلة العضلات في الفخذ.
    3. لا حقن في كتلة العضلات الخلفية كما أنه من الممكن أن يضر العصب الوركي.
    4. إذا الحيوانات لتلقي حقن IM متعددة والساقين بديلة.
  7. داخل الصفاق (IP)
    1. تقييد الحيوان كما هو موضح أعلاه.
    2. تلميح الأنف الحيوان تجاه الكلمة، ويعرض للحقن البطن.
    3. تحديد موقع خط الوسط الحيوان وتقسيم عقليا في البطن الأرباع (الشكل 2). الدنياالأرباع، وخاصة الحيوان رباعي الحق أقل، هي المواقع المناسبة لحقن داخل الصفاق.
      1. يتم اختيار أقل رباعي الحق نظرا لعدم وجود هياكل هامة تشريحيا.
    4. باستخدام حقنة مناسب الحجم والإبرة، وضخ المواد إلى الحيوان.
    5. إذا الحيوانات لتلقي الحقن المتكررة IP، تناوب على موقع الحقن.
  8. تحت الجلد (SC، SQ)
    1. تقييد الحيوان كما هو موضح أعلاه. هنا يجب كبح جماح الحيوان بما فيه الكفاية فضفاضة بحيث يمكن تعبئة الجلد.
    2. إذا الحيوانات ليتم التعامل معها بشكل روتيني بعد الحقن SC، لا تستخدم القفا (مؤخر العنق). بدلا من ذلك، استخدم الجلد على ظهري الردف أو في الجناح. إذا الحيوانات لتلقي الحقن متعددة SC، مواقع بديلة لحقن.
    3. فهم الجلد واسحبه برفق صعودا، مما يجعل من "خيمة".
      1. إذا أداء منفردا الحقن، وإدراج الإبرة بلطف ورالجلد والأنف والحنجرة صعودا مع الإبرة للتأكد من أن الإبرة في الفضاء تحت الجلد.
    4. باستخدام حقنة مناسب الحجم والإبرة، أدخل الإبرة بزاوية ° 30-45 في الجلد الخيام، وحقن المواد. بالتوازي مع ضخ وبعيدا عن الأصابع عقد صعودا الجلد.
    5. إذا كان حقن ناجحا، سوف ينظر تورم صغير تحت الجلد.
    6. بعد الحقن، وتطبيق ضغط لطيف لمنع ارتجاع للمادة.
  9. الأدمة (ID)
    1. لحقن داخل الأدمة، وحلق في كثير من الأحيان حتى الحيوانات التي يمكن أن ينظر إليها على الجلد.
    2. قد ضبط النفس من الحيوان للحقن داخل الأدمة متعددة يكون صعبا. في هذه الحالة، قد يكون من الضروري تخدير الكيميائية. مواقع لحقن ID هي نفس تلك لSC.
    3. إدراج إبرة الحجم بشكل مناسب داخل الجلد بزاوية ° 15-30. لن يتم إدراج الإبرة بعيدا جدا وحقن يجب أن يجتمع مع إعادةاملساعدات.
      1. ثمة نهج بديل هو لقرصة بلطف الجلد المجاور لموضع الحقن وإدخال الإبرة بزاوية ضحلة جدا. هذا مفيد في الفئران لأنه يمنعهم من التحرك أثناء عملية الحقن.
    4. إذا كان حقن ناجحا، سيتم شهدت فقاعة صغيرة. سيكون لونه مختلف عن الجلد المحيط بها.
    5. بعد الحقن، وتطبيق ضغط لطيف لمنع ارتجاع للمادة.
  10. داخل الأوعية (IV)
    1. اليسار واليمين الأوردة الذيل الأفقي هي الأكثر شيوعا طريق الوصول الى الاوعية الدموية المستخدمة في الفئران والجرذان.
    2. طرق الوصول الأوعية الدموية الأخرى ممكنة في الفئران والجرذان، ولكن عموما تتطلب تخدير وبعد حقن لتخفيف الآلام.
    3. لذيل حقن الوريد، كبح جماح الحيوانات في Decapicone أو البلاستيك restrainer القوارض.
    4. وضع ذيل الحيوان تحت مصباح، أو على جهاز الاحترار المحمية. وهذا تعزيز توسع الأوعية، مما يسمح لتسهيل الحقن.
      1. لا ارتفاع درجة حرارة الحيوان.
      2. لذكور الفئران كبيرة، قد تنظيف قشور الجلد قبالة الذيل تسمح لتحسين التصور من الوريد. وينبغي أن يكون لطيف التنظيف حتى لا تسبب تآكل الجلد.
    5. عقد ذيل الحيوان من قبل الطرف مع اليد غير المسيطرة. وهذا تصويب الذيل.
    6. تدوير الذيل ¼ أنتقل إلى وضع عروق الذيل ظهريا لتسهيل الحقن. الحيوان اثنين من الأوردة الذيل الأفقي والشريان البطني الذيل (الشكل 3).
    7. الاقتراب من الذيل مع الإبرة بزاوية ° 15-20. تبدأ في الجزء الأعلى من الذيل.
      1. الأوردة ضحلة، وينبغي ألا تدرج الإبرة كثيرا ما وراء شطبة.
      2. إذا بدأت الحقن وبشكل أقصى قدر ممكن، وهناك أكثر الوريد غير التالفة لمحاولة الحقن، ويجب أن تفشل المحاولة الأولى.
    8. حقن المواد. وهناك حقن ناجحة تؤدي إلى دخول المواد مع عدم وجود الوريدالمقاومة وابيضاض الوريد الذيل لمدة الحقن.
      1. لا نضح قبل عن طريق الحقن، حيث سيؤدي ذلك إلى انهيار الوريد.
      2. وضغط لطيف على موقع بزل الوريد بعد حقن منع النزيف.
    9. في حقن فاشلة، فإن المواد لا يتدفق بسهولة. بدلا من ذلك، فإن الجلد تبييض الذيل أو لا يمكن أن يتم حقن المواد على الإطلاق.
  11. المعدة الإدارة (لبلوح عن طريق الفم)
    1. فقط تنفيذ بالتزقيم على الحيوانات، ضبط النفس مستيقظا. التخدير أو التخدير يزيد من خطر الطموح (المواد التي تدخل الرئتين عن غير قصد).
    2. تحديد الحجم المناسب إبرة التغذية عن طريق الفم للاستخدام. هذه الإبر لها نصائح الكرة في نهاية لمنع مرورهم إلى داخل القصبة الهوائية.
    3. يمكن تحديد طول اللازمة من خلال عقد الحيوانية ضبط النفس وقياس ما يصل من ركن من أركان الفم. يجب غيض من الإبرة الكرة التغذية تصل إلى الضلع الأخير للحيوان (<STRONG> الشكل 4). يتم تحديد مقياس الإبرة من وزن الحيوان.
    4. تقييد الحيوان بحيث رأسه وجسمه في خط، مستقيم عمودي. هذا يعدل المريء، مما يسمح لتسهيل مرور الإبرة التغذية.
    5. إدراج غيض من الإبرة الكرة في فم الحيوان، وأكثر من اللسان. وبمجرد أن الإبرة في المكان، ليصبح الإبر والمحاقن يصل، والضغط برفق على الحنك، لذلك الأنف الحيوان هو نحو السقف.
      1. في الفئران قد الإبرة تحتاج إلى إعادة توجيه بعض الشيء لأنه يمر الجزء الخلفي من الحلق. أي توتر على الإبرة يشير إلى الحاجة لضبط الموقف
    6. مواصلة لتمرير الإبرة حتى يتم الوصول إلى مسافة محددة سلفا. ينبغي أن إبرة تمر بسهولة، والحيوانات لا ينبغي اللحظات أو الاختناق.
    7. إدارة المخدرات. ينبغي أن تتدفق إلى المعدة. إذا كان هناك مقاومة أو صيحات الحيوان، ويخنق، أو يتحول الأزرق، ووقف على الفور وإزالة الحاجةجنيه. الحيوانات التي قد تتطلب يستنشق القتل الرحيم، اعتمادا على مجمع تدار.

4. ممثل النتائج

عندما يتم التعامل مع الحيوانات بشكل صحيح، هناك حد أدنى من الإجهاد لكل من الحيوانات والمعالج. لا معالجات الحصول على لعض أو الخدش، ويتم التعامل مع الحيوانات بطريقة إنسانية وبكفاءة. تدار المركبات عبر الطريق الصحيح بأقل ضرر للأنسجة والانزعاج قليلا كما للحيوان ممكن.

قد إذا المحققين جديدا على التعامل مع الحيوانات، والعمل مع الحيوانات المحنطة والصغيرة تكون مفيدة. هناك أيضا أجهزة محاكاة الحيوان المتاحة لبعض التقنيات، مثل الفئران أيضا حقيقي Koken. للمحققين كثيرة، هناك فرصة ضئيلة لكسب الألفة مع الإبر والمحاقن قبل العمل مع الحيوانات. ويوضح أجزاء ممثل الإبر والمحاقن في الشكل 1A و 1B. قبل حقن الحيوانات للمرة الأولى،يمكن أن تكون مفيدة لممارسة حقن قبل العمل مع الحيوانات. إبر دقيقة جدا، مثل 28 و 30 غرام، هي سهلة للضرر. إذا سحب المواد من قوارير متعددة الاستخدامات، استخدم إبرة أكبر لهذا الغرض ومن ثم استبداله مع إبرة أصغر قياس للحقن. وينظر الى إبرة burred في الشكل 1C. وينبغي اتخاذ احتياطات السلامة الأساسية عند العمل مع الإبر، مثل عدم إعادة السد الإبر المستخدمة باليد. 1D الشكل يظهر recapper إبرة في الاستخدام. وهذا يمكن أن تكون ذات قيمة للمحققين الذين يحتاجون إلى إزالة الإبر، على سبيل المثال، صريحة الدم من دون حقنة انحلال الدم ينظر عندما يتم الضغط الدم من خلال إبرة.

أرقام 2 و 3 توضيح معالم للحقن داخل البطن وهيكل نموذجي من الذيل، مما يدل على أهداف للحقن. الشكل 4 يقدم أمثلة من التحجيم الصحيح للإبر تسمين. يجب أن تصل الإبر بالتزقيم من فم أحدنيمال إلى اليمين تحت الضلع الأخير.

الشكل 1
الشكل 1. إبرة) وقطع حقنة B)، وصفت. C) الأزيز على إبرة التنسيب الناجمة عن تكرار الإبرة في قارورة متعدد الاستخدام. D) recapper إبرة في الاستخدام.

الشكل 2
الشكل 2. أرباع الدائرة من البطن البطني. حقن فقط في الربعين أقل، تفضيلي الربع السفلي الأيمن.

الشكل 3
الشكل 3. تخطيطي من الذيل في المقطع العرضي، مما يدل على العلاقة بين الشرايين والأوردة إلى الهياكل العظمية وtendenous.

الشكل 4
الشكل 4. إبرة تسمين التحجيم في الفئران. A) إبرة تسمين خط الطول جداز. B) إبرة بالتزقيم بحجم مناسب. C) تسمين قياس إبرة قصيرة جدا، D) التلمس للضلع الماضي لتحديد حجم الإبرة المناسب تسمين.

فأر فأر
طريق أوصى حجم أوصت قياس وطول الإبرة أوصى حجم أوصت قياس وطول الإبرة
الأنف 1 5-25 ميكرولتر N / A 5-25 ميكرولتر N / A
1،2 العضلي 0،00005 مل / ز <23 غ، 0.5 إلى 0.75 في 0.1 مل / كغ <21 غ، 0.5 إلى 0.75 في
داخل الصفاق 1،2 0.02 مل / ز <21 غ، 0.75 إلى 1 في 10 مل / كغ <21 غ، 0.75 إلى 1 في
تحت الجلد 1،2 0،01 مل / ز <22 غ، 0.5 إلى 1 في 5 مل / كجم <22 غ، 0.5 إلى 1 في
داخل الأدمة 1 0،05-0،1 مل <26 غ، 0.5 في 0،05-0،1 مل <26 غ، 0.5 في
1،2 في الوريد 0،005 مل / ز -0،025 مل / ز * <25 غ، 0.75 إلى 1 في 5 ml/kg-20 مل / كجم * <23 غ، 0.75 إلى 1 في
بالتزقيم عن طريق الفم 1،2 0،01 مل / ز ز 20-22 إبرة التغذية 5-10 مل / كغ ز 16-20 إبرة التغذية

* الرقم الأول هو حجم معين باعتباره البلعة في الوريد على مدى ما يقرب من 1 دقيقة. المجلد الثاني هو وحدة التخزين التي يمكن أن تعطى بمثابة التسريب البطيء خلال 5-10 دقائق.

Discussion

وينبغي النظر إلى هذا البروتوكول كمقدمة لإدارة والتعامل مع الحيوانات مادة تهدف إلى استكمال التدريب العملي على التدريب المقدم في منشأة الباحث. وسائل ضبط النفس التي سيتم استخدامها وينبغي النظر في طرق إدارة المواد في التصميم التجريبي وعندما يتم كتابة بروتوكول البحث أو الأخلاق بروتوكول اللجنة.

التدريب في الإجراءات المتعلقة بالحيوان هو أمر حيوي لنجاح البحث. لتنفيذ معظم التجارب، لا بد من التعامل معها من قبل موظفي البحوث الحيوانات، وكلما كان ذلك أفضل التعامل مع الحيوانات، وأقل شدد على الحيوان 3. يمكن تعويد الحيوانات على الاتصال البشري لطيف خفض التوتر وتجعل الحيوانات أكثر الموضوعات البحثية لين العريكة 4،5. وقد تبين لمعالجة الإجهاد يؤثر على بعض أنواع البحوث 6 و أنه من الممكن أنها يمكن أن تؤثر الآخرين أيضا. ينبغي أن يتم ضبط النفس من القوارض مع الحذر، ولكن التعامل مع شركة (أ مؤقتقبضة من المرجح أن يؤدي إلى إصابة القوارض ومعالج) وينبغي أن يكون لأقصر مدة العملية. عادة ما يتم اختيار أساليب ضبط النفس استنادا إلى حجم الحيوان أو سعى الوصول. على سبيل المثال، التعامل مع الفئران الكبار من القفا، على الرغم من ذلك ممكنا، وكثيرا ما التقى مع مقاومة قوية من قبل الجرذان، وخاصة إذا كان المعالج هو عديم الخبرة. يمكن عقد الماوس أو الفئران باليد جعل الوصول إلى عروق الذيل صعبة وغالبا ما يتم اختيار جهاز ضبط النفس للحفاظ على الحيوانات بأسرع ما زالت.

عندما تعامل مع الحيوانات الباحثين، انهم يسعون في كثير من الأحيان لإدارة مركب بيولوجي أو لمزيد من الدراسة. يمكن للمسار إدارة المواد تؤثر على الاستيعاب، التوافر البيولوجي، ومدى صلاحيتها للتجربة معينة. يجب الإلمام طرق مختلفة توفر للباحثين لديهم القدرة على إدارة مضمونها في أفضل طريقة ممكنة لأبحاثهم. على سبيل المثال، الطريق الذي يعزز امتصاص السريع للمادةمثل الوريد أو داخل الصفاق، لا ينبغي ان تستخدم اذا كان الباحث يريد أن يقر استخدام هذه المادة بطريقة أبطأ المفعول. ويمكن الاطلاع على المشاركات من بعض هذه التقنيات والاعتبارات لحجم والمعدات والمذاب في ورقتين من تيرنر وآخرون 1،7

كلما المواد هي لأن تدار على القوارض المختبر، ينبغي إيلاء الاعتبار لحجم مناسب من المعدات وحجم مادة (المبينة في الجدول رقم 1). بشكل غير صحيح قد المعدات أو كميات كبيرة الحجم يؤدي إلى عدم الراحة، والإصابة، أو وفاة الحيوان. عموما، تدار المواد المعقمة هي حقنا، إلا إذا كانت أهداف البحث من شأنه أن يجعل هذا الأمر مستحيلا (أي دراسات البكتيرية). يجب أن تكون المركبات والمستحضرات البيولوجية في المذاب أو مركبة التي سيكون لها تأثير أقل على الحيوان. A الرقم الهيدروجيني الفسيولوجية (7.3 -7.4) هو عادة مقبولة تماما، وخاصة بالنسبة تحت الجلد، العضلي، وintraperitoneal الطرق. قد مستويات الحموضة الفسيولوجية في غير المواد التي تديرها هذه الطرق يؤدي إلى الألم أو نخر وتلف الأنسجة. والتسامح أوسع نطاقات درجة الحموضة مع الطرق المعدة والوريد 7. في القوارض الصغيرة، وهناك اعتبار آخر مهم هو إمكانية تقشعر لها الأبدان إذا أعطيت كميات كبيرة من السوائل درجة حرارة الغرفة. إذا سوائل عن طريق الوريد تدار أو الغشاء البريتونى، وخاصة في دعم حيوان سوء، ينبغي أن تكون درجة حرارة درجة حرارة الجسم لأنها (37 ° C).

طرق الإدارة التي تمت مناقشتها في هذا البروتوكول هي تلك التي يشيع استخدامها في العديد من البرامج البحثية، بسيطة لدرجة الماجستير، وعموما لا تتطلب التخدير. طائفة لا حصر لها تقريبا من طرق إدارة ممكنة، ومع ذلك، بما في ذلك، داخل القراب داخل الجمجمة، فوق الجافية، داخل العظم، داخل القصبة الهوائية، وداخل المفصل على سبيل المثال لا الحصر. وينبغي السعي التدريب في هذه الطرق متخصصة في إدارة الناس من ذوي الخوذات البيضاءس ديهم خبرة واسعة مع الطريق ونتائج جيدة.

في القوارض، وعادة ما تستخدم الطريق داخل الأنف لدراسة المواد التي أدخلت على الرئتين عن طريق أكثر "طبيعية"؛ طريقة التقطير داخل القصبة الهوائية من. الفئران والجرذان هي تلزم الأنف الاستراحات، الأمر الذي أدى إلى ذلك يستنشق منها كميات صغيرة جدا من السوائل وليس من الصعب، حتى في الحيوانات واعية. يمكن لأن الغشاء المخاطي للأنف وفرة في المعروض مع الأوعية الدموية، والإدارة داخل الأنف من بعض المواد تكون مشابهة لإدارة الوريد. لا ينصح هذا الطريق في الحيوانات مع التهاب الأنف، لكن، وكما يمكن أن تكون ضارة الاستيعاب. قد محاولات لإدارة كميات كبيرة من الطريق داخل الأنف ضيق التنفس يؤدي إلى الغرق أو الحيوان.

الحقن العضلي توفير المواد سريعة الامتصاص. يمكن أن يكون تحديا الحقن العضلي في الفئران والجرذان بسبب صغر حجمها والعضلات الصغيرة تبعا لذلك. وأدوا في الساق الخلفيةق. نظرا لاحتمال حدوث ضرر من العصب الوركي، والفخذية الرباعية الرؤوس هو العضلات في الاختيار.

على الرغم من أن كلا من تحت الجلد والأدمة الطرق تنطوي على الجلد، وهناك اختلافات بين التوافر البيولوجي للمواد وضعت في الجلد في مقابل تحت الجلد. وغالبا ما يعتبر تحت الجلد الادارة "ترسب" الطريق، مع تباطؤ امتصاص من طرق أخرى، مثل الوريد أو داخل الصفاق. يتم استخدام وحدات التخزين داخل الأدمة إدارة صغيرة جدا من المواد، وعادة المواد مناعة مثل المواد المساعدة مستضد المخاليط. في كلتا الحالتين، يجب أن تكون المواد تدار من درجة الحموضة الفسيولوجية وغير مزعجة. لا ينبغي أن الأدمة تحت الجلد أو الحقن أن يؤديها في القفا، لأن هذا هو موقع يستخدم عادة لتقييد القوارض.

غالبا ما تعتبر الوريد والغشاء البريتوني ما يعادلها في القوارض. طرق الوريد من توفير المزيد من الجرعات صAPID امتصاص مركبات، ومع ذلك، في حين ينبغي النظر تعاطيه في التجويف الجنبي يعادل تقريبا تناوله عن طريق الفم 8. ينبغي الحرص مع الغشاء البريتونى مركبات تدار كما أنها قد تسبب الألم إذا مخزنة بطريقة غير سليمة. الطريق الموحد لإدارة شؤون البلعة في الوريد في القوارض هو عن طريق الأوردة الذيل. إذا هو المطلوب الوريد المزمن لمادة، ينبغي النظر في غرس الوريدي أو الشرياني القنيات. وينبغي تسليم المواد تدار عن طريق الوريد جو معقم و مطهر وينبغي أن تظهر لتكون آمنة لإدارة عن طريق الوريد. على سبيل المثال، والمواد التي ربما تتسبب في انحلال الدم، تخثر الدم، التهاب الأوعية الدموية أو ليست مناسبة للإعطاء في الوريد.

وغالبا ما تستخدم الطريق بالتزقيم المعدة عن طريق الفم أو لتقليد شائع في الطريق الجرعات البشر. كما يسمح لجرعات دقيقة من المواد بالمقارنة مع تناوله عن طريق الفم من خلال الغذاء أو الماء. التوافر البيولوجي للمركباتوسوف تدار من خلال أنبوب تغذية تختلف عن حالة فدان / صام من الحيوان، وكذلك المذاب أو مركبة من المجمع أو البيولوجية. يجب بالتزقيم أو تغذية الإبر يكون من الحجم المناسب للحيوان المستخدمة، ويجب تنظيف بين الحيوانات، إذا الإبر المتاح بالتزقيم ليست عملية. الإصابات الناجمة عن بالتزقيم ليست غير شائعة، وتشمل ترسب هذه المادة في الرئة أو تمزق المعدة أو المريء. وحاول التدريب وأن تكون تحت إشراف من قبل الطرف من ذوي الخبرة والاضطلاع على الحيوانات الموت الرحيم أولا، ثم تخدير الحيوانات (التي سوف يتم التخلص) قبل بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا. يجب أن المحاولات الأولى بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا إشراك متوسط ​​الحجم الحيوانات وكميات صغيرة من مادة، مثل المالحة، التي من شأنها أن تسبب إصابات لا إذا كان الإجراء يذهب منحرف. وينبغي تقييم الحيوانات عن كثب بحثا عن علامات على الضيق، مثل يلهث، ثم الازرق، والنزيف، أو اللعاب الزائد، والموت الرحيم بعد بالتزقيم إذا لزم الأمر. إذا euthمطلوب انسيا، ينبغي necropsied الحيوان لتحديد سبب فشل الإجراء بالتزقيم.

Disclosures

الكتاب هم موظفون من نهر تشارلز.

Acknowledgments

وأيد هذا البحث المقدمة هنا من نهر تشارلز.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Needles Various Various Needles are sold by both gauge and length. Check both before ordering.
Syringes Various Various Always choose an appropriate size for the volume to be administered.
DecapiCones Braintree Scientific DC-200, DCL-120, MDC-200 Available in mouse and rat sizes.
Rodent restrainer Harvard Apparatus, Braintree Scientific, Plas-Labs, others Available in clear Plexiglas, adjustable plastic, and sized for mice and rats.
50 ml conical tube Various
Feeding needles VWR, Popper and Sons Various Fit the needle gauge and length to the animals as described above. Both disposable and reusable feeding needles are available.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613 (2011).
  2. Diehl, K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J. Appl. Toxicol. 21, 15-23 (2001).
  3. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat. Methods. 7, 825-826 (2010).
  4. Maurer, B. M., Döring, D., Scheipl, F., Küchenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Appl. Anim. Behav. Sci. 111, 329-341 (2008).
  5. Cloutier, S., Newberry, R. C. Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats. Appl. Anim. Behav. Sci. 112, 158-173 (2008).
  6. Romanovsky, A. A., Kulchitsky, V. A., Simons, C. T., Sugimoto, N. Methodology of fever research: why are polyphasic fevers often thought to be biphasic. Am. J. Physiol. 275, 332-338 (1998).
  7. Turner, P. V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., Brabb, T. Administration of substances to laboratory animals: equipment considerations, vehicle selection, and solute preparation. JAALAS. 50, 614-627 (2011).
  8. Lukas, G., Brindle, S. D., Greengard, P. The route of absorption of intraperitoneally administered compounds. J. Pharmacol. Exp. Ther. 178, 562-564 (1971).
  9. AALAS. Laboratory Mouse Handbook. AALAS. (2009).
  10. AALAS. LAT Training Manual. AALAS. (2009).
  11. AALAS. LATg Training Manual. AALAS. (2009).
  12. Barnett, S. W. Manual of Animal Technology. Wiley-Blackwell. 440 (2007).
  13. Baumans, V., Pekow, C. A. Handbook of Laboratory Animal Science. Hau, J., Schapiro, S. J. 1, CRC Press. 401-446 (2010).
  14. Bogdanske, J. J., Hubbard-Van Stelle, S., Riley, M. R., Schiffman, B. M. Laboratory Mouse Procedural Techniques. CRC Press. (2011).
  15. Danneman, P., Suckow, M. A., Brayton, C. The Laboratory Mouse. CRC Press. (2000).
  16. Sharp, P. E., La Regina, M. C. The Laboratory Rat. CRC Press. (1998).

Comments

7 Comments

  1. Hi,
    What is the possibility that I could request a DVD of the mouse handling training video. I will use it for training purposes at uconn.
    Thank you
    Janet

    Reply
    Posted by: Janet T.
    October 25, 2012 - 8:17 AM
  2. Hello Janet,

    Thank for viewing the video article and we're delighted to hear you found it to be helpful.

    Our goal is to provide the video via joVE so it can be accessed from any site as needed. You can certainly link directly to the article for your internal trianing needs, but at this time we are not offering the video in other formats including DVD/CD. If that changes, I have your contact inforamation and will follow up with you.

    Regards

    Elton

    Reply
    Posted by: Elton M.
    October 26, 2012 - 12:35 PM
  3. This video is a great tool for the training of technicians and graduate students. It is accessible and easy to follow for people that are more comfortable with visual training.

    Reply
    Posted by: Rana S.
    January 30, 2014 - 1:25 PM
  4. I can not download this video what is the problem ?

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:28 AM
  5. please send me this video to my email .i can not download it

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:29 AM
  6. How do i download the video?It is great for teaching purposes.

    Reply
    Posted by: Dotte Chegu A.
    September 12, 2014 - 3:39 AM
  7. Hi,
    I have seen your video administration in rodents by different routes and handling. Really, I found it very useful in my work and thanks a lot. In the video you have shown administration for all the routes except Intra-articular route. Intra-articular drug injection is very important for my studies could you please update that video also. It would be very helpful for me.

    Thanks and regards
    Mukesh Dhanka

    Reply
    Posted by: Mukesh D.
    September 9, 2016 - 10:21 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics