Культивирование Микроглии от новорожденных и взрослых центральной нервной системы

1Program in Neuroscience, Stony Brook University, 2Department of Pharmacological Sciences, Stony Brook University, 3Program in Molecular and Cellular Pharmacology, Stony Brook University
* These authors contributed equally
Immunology and Infection

Your institution must subscribe to JoVE's Immunology and Infection section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Приведем схему методов для эффективного и быстрого выделения / культуре жизнеспособных микроглии из головного мозга новорожденных и взрослых спинного мозга. Вскрытие и покрытие корковых микроглии может быть достигнуто в течение 90 минут, с последующим микроглии урожая происходят ~ 10 дней после первого вскрытия.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Bronstein, R., Torres, L., Nissen, J. C., Tsirka, S. E. Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System. J. Vis. Exp. (78), e50647, doi:10.3791/50647 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Микроглии являются резидентами макрофаг-подобные клетки центральной нервной системы (ЦНС) и, таким образом, имеют критически важную роль в физиологических и патологических процессах, таких как ЦНС созревания в развитии, рассеянный склероз и травмы спинного мозга. Микроглии может быть активирована и работу к действию повреждение нейронов или стимуляции, такие как повреждением аксонов увидеть в MS или ишемический мозговой травмы в результате инсульта. Эти иммунокомпетентных членов ЦНС также думают, играют роль в синаптической пластичности, не связанных с патологическими состояниями. Мы используем протоколы для культивирования микроглии от новорожденных и взрослых тканей, которые направлены максимального количества жизнеспособных клеток при минимальных искажающих факторов, таких, как наличие других типов клетки ЦНС и мусора клеточной культуры. Мы используем большой и легко заметных ЦНС компонентов (например, мозга, сегментов спинного мозга), что делает весь процесс возможно и воспроизводимым. Использование взрослой клеткис является подходящей альтернативой использованию новорожденных микроглии мозга, так как многие патологии изучали главным образом влияют на постнатальный спинного мозга. Эти культуры системы также могут быть использованы для непосредственного тестирования эффекта соединений, которые могут быть либо ингибировать или стимулировать активацию микроглии. После активации микроглии может формировать результаты заболевание у взрослого ЦНС, существует необходимость в пробирке систем, в которых новорожденных и взрослых микроглии можно культивировать и изучены.

Introduction

Микроглии резидентом иммунных клетках ЦНС, наиболее близкие по периферийным макрофагов в структуре и функции 1. Недавно было показано, что клетки микроглии послеродовой вытекают из примитивных предшественников миелоидного и генерируется до восьмой день эмбриогенеза, переворачивая предыдущие понятия, что послеродовая кроветворные предшественники являются источником микроглии в мозге взрослого 2. Они играют ключевую роль в нескольких неврологических заболеваний и может быстро реагировать на инфекцию или травму, выпустив провоспалительных или противовоспалительных цитокинов 3. Таким образом микроглии охватывают автономное устройство в ЦНС, что можно манипулировать, чтобы влиять на прогрессирование заболевания. Разработка надежных и воспроизводимых методов, чтобы изолировать и культуре неонатальных или взрослого клетки микроглии важно будущих исследований.

Микроглии, как известно, критический игроков в ряде патологий мозга. Совсем недавно ролы появляются на клетки в нормальное развитие и функционирование мозга как микроглии фагоцитируют избыток предшественников нервных клеток с зубчатой ​​извилине гиппокампа 1, 4. Микроглии может также модулировать несколько неврологических заболеваний, которые влияют на спинного мозга, таких как MS, невропатическая боль и травмы спинного мозга 5-7. Спинной микроглии шнур реагируют по-разному по сравнению с мозгом микроглии в ответ на активацию сигналов 8, 9, вероятно, связано с различиями в местной окружающей среде. Таким образом, важно создать соответствующий в системе пробирке культуру и изучать спинной микроглии мозга. Новорожденных микроглии производства значительно большего из провоспалительных цитокинов оксида азота по сравнению с клетками взрослого после экстракорпорального стимуляции IFN-γ и TNF-10,11 дальнейшее выделение необходимости использовать взрослые клетки микроглии изучать в контексте тех или иных заболеваний.

Протокол мы используем в лаборатории для Culture новорожденных микроглии является разновидностью современных методов, которые используют встряхивания смешанного глиальных культур, с тем, чтобы удалить микроглии с поверхности колбы культуры клеток 12. Мы также описывают способ для культуры микроглии от взрослой мыши спинного мозга на основе протокола впервые описан Yip и др. 13. Этот метод обеспечивает более быстрый способ, чтобы культура клеток взрослого по сравнению с другими доступными протоколы 14. Полученный препарат на 70% микроглии, а оставшуюся часть состоит из астроцитов. Хотя чистота нашей культуры ниже по сравнению с другими опубликованными методами 13, эта культура система полезна для изучения микроглии в культуре ответ на различные стимулы активирующий а также для изучения заболеваний, которые поражают главным образом в спинном мозге и в котором сильное воспалительная реакция является основной функцией.

Все протоколы, описанные были одобрены Stony Brook UniversiTY IACUC.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Вскрытие (День 0)

  1. Анестезии в P0-2 мыши щенков с гипотермией. Протрите главы щенков Kimwipe пропитанной 70% этанолом для дезинфекции тканей.
  2. Удалите головы с ножницами, используя 4 щенков на 10 см пластины культуры. Поместите голову в чашку Петри, содержащую буфер ледяной Хэнка.
  3. Якорь глав использованием изогнутых щипцов через глазницы и осторожно удалите кожа, покрывающая череп с прямыми microforceps.
  4. Удалить кости черепа с прямыми microforceps, используя осторожностью Не прокола или повреждения коры. Наиболее эффективный способ, чтобы начать удаление начиная возле мозжечке, который расположен у основания головы, так как эта область будет отброшен.
  5. Снимите мозга с небольшим шпателем, и поместить (4) мозги в свежем чашку Петри, содержащую буфер ледяной Хэнка.
  6. Все шаги, с этого момента использовать microforceps и выполняются под Disseие микроскопом. Начиная с брюшной стороны головного мозга, закрепить ткань, удерживая мозжечка и сделать две небольшие разрезы по обе стороны от среднего мозга. Будьте осторожны, чтобы не порезать на всем пути через ткань, так как кора мозга покрытия в этом регионе.
  7. Аккуратно дразнить среднего мозга и мозжечка в одной части из двух коры. Два коре должны формировать вогнутую форму.
  8. Отделите одну кору и ориентировать одну кору с медиальной стороны на дальнейшее рассечение. Гиппокамп может быть трудно наблюдать, но она расположена противоположно обонятельную луковицу, которая появляется как небольшой узелок на заостренный конец коры.
  9. Удалить гиппокампа, который имеет серповидную форму. Переверните коры более, чтобы посмотреть в спинной стороне.
  10. Использование обонятельной луковицы в качестве отправной точки, удалить все мозговые оболочки и обонятельной луковицы себя от коры.
  11. Расчлененный коры должны быть помещены в 15 мл конические пробирки с 14 мл Colбуфером D Хэнка солевой на льду.

2. Культура клеток (День 0)

  1. Предварительное покрытие 10 см культуре ткани блюда с 5 мкг / мл поли-D-лизин (PDL), разбавленный водой в автоклаве в течение 3 часов при 37 ° С.
  2. Аспирируйте PDL, и мыть пластины один раз автоклавного воды. Сухие пластины под воздействием УФ в капот культуры ткани в течение 20 мин. Этот шаг должен быть выполнен только до вскрытия процесса.
  3. Буфер Аспирируйте Хэнка из пробирки, содержащие от 4 коре мозга каждый, применяют 4 мл 1x трипсин / ЭДТА, растирают ткани с p1000 наконечник, и место труб в 37 ° С в инкубаторе в течение 15 мин.
  4. Добавить 4 мл полной микроглии СМИ на пробирку, чтобы остановить ферментативного расщепления, перемешать, и спином вниз содержимого при 1.5K мин в течение 5 мин.
  5. Супернатант и повторить мытье с 4 мл полной среды. Ресуспендируют клеток в 10 мл полной среды микроглии (DMEM с 10% FBS, 1% пирувата натрия, 0,08% гентамицина) и фильтруют через 40 микроN ячейки сетки фильтра.
  6. Пластина при плотности 8 коре на 10 мл в 10 см ткани планшет для культивирования и место в культуре ткани инкубаторе при температуре 37 ° С и 5% CO 2 (см. взрослых микроглии протокол).

(День 3)

  1. Изменить СМИ во всех клеточных культур блюда с полным микроглии СМИ.

(10 день)

  1. Добавить 400 мкл 60 мМ лидокаина в HBSS (для отсоединения микроглии) в среде 10 см пластины тканевой культуры и инкубируют при комнатной температуре (RT) в течение 10-15 мин.
  2. Сбор средств массовой информации / суспензии клеток с пластинки, и промыть пластины один раз буфером Хэнка. Соберите промывочного буфера для восстановления оставшихся микроглии.
  3. Добавляют 5 мМ ЭДТА (рН 8,0) к клеточной суспензии до конечной концентрации 50 мкМ или в разведение 1/100.
  4. Спин вниз клеточной суспензии на 1000 мкг (1500 оборотов в минуту) в течение 5 мин и повторно суспендировать в 1 мл DMEM с 1% FBS.
  5. Граф число жизнеспособных клеток (как за взрослого Миcroglia 3.1/3.2) и разбить ячейку на тканевую культуру, в нужной экспериментальной плотности. Приблизительно 1.10 6 микроглии собирают из 10 см пластины, содержащей мозга из 4 мозгов. Для иммунофлюоресценции, плотность 2.5x10 4 клеток на 18 мм покровным рекомендуется.
  6. Позвольте по крайней мере 24 часов для клетки микроглии, чтобы полностью вернуться в свои разветвленные, состояние покоя перед использованием.

Протокол Текст: (Взрослый микроглии)

1. Коллекция тканей

  1. Coat планшетах для культуры тканей с поли-D-лизин (PDL) в течение 3 ч при 37 ° С или в течение ночи при 4 ° С. Промыть пластины один раз автоклавного воду непосредственно перед использованием.
  2. Усыпить мыши, CO 2 удушья и выяснить, что эвтаназия является полным. Очистите спинной области шнур с 70% этанола.
  3. С помощью ножниц порезать кожу в верхней части спинного мозга, после чего перейдите сократить спинного мозга из области T1 до T12. ВырезатьОстальные мышцы от боковых сторон спинного мозга.
  4. Медленно сократить позвонков использованием microscissors, как вы аккуратно провести спинного мозга кончиками пальцев. Будьте осторожны, чтобы не проколоть спинного мозга, ткань очень мягкая. Медленно извлечь спинного мозга использованием microforceps.
  5. Погрузите спинного мозга в чашке Петри содержащие ледяной HBSS. С помощью светового микроскопа удаление всех видимых мозговых оболочек использованием microforceps
  6. Разрежьте спинного мозга в поперечном сегментах достаточно малы, чтобы создать несколько фрагментов. Толщина фрагменты не должно быть более чем на 2 мм, чтобы способствовать эффективному пищеварению. Передача части спинного шнур в 15 мл коническую трубку с 1 мл ледяного HBSS. Держите трубку на льду до пищеварения шаг.

2. Переваривание тканей

  1. Аспирируйте ССРХ от 15 мл коническую трубку с ткани спинного мозга. Будьте осторожны, чтобы не аспирации любой кусок ткани.
  2. Добавить 1 мл трипсина (2.5 г / л облученных свиной трипсин и 0,2 г / л EDTA в HBSS), и инкубировали при 37 ° С в течение 30 мин.
  3. Чтобы остановить пищеварения удалить трипсина и добавляют 3 мл основной среды микроглии, которая содержит сыворотку, чтобы остановить ферментативного расщепления.
  4. Внесите вверх и вниз, чтобы сместить ткани. Фильтр клеточной суспензии использованием 40 мкм ячейки фильтра.

3. Подсчет клеток и покрытия

  1. Смешайте равные объемы клеточной суспензии и раствор DAPI.
  2. Граф клеток с использованием гемоцитометра.
  3. Пластина с плотностью в пределах от 5-7x10 5 клеток / мл в PDL покрытием 35 х 10 мм чашках. Покрытие по более низкой плотности предотвратить рост клеток, даже когда клетки культивировали в 12-луночных планшетах, которые имеют меньшую площадь по сравнению с 35 х 10 мм чашках.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Пример покоящихся и активированных клеток микроглии показано на рисунке 1. Микроглии визуализировали 24 часа после нанесения покрытия (рис. 1а) и обладают разветвленной (в состоянии покоя) морфологии. Воздействие грунтовки реагент, бактериальный липополисахарид (LPS) приводит к изменению морфологии микроглии, как клетки активируются (фиг. 1б).

Пример подсчета клеток для покрытия показана на рисунке 2. В связи с наличием клеточных остатков, DAPI Fluoromount (вместо трипановым синим) добавляли к равному объему суспензии клеток и помещены в гемоцитометре для подсчета клеток, как описано в 4, 13. DAPI позитивные клетки визуализировали с использованием флуоресцентного микроскопа. Использование повышенной яркости поля способствовало точный подсчет клеток, присутствующих (рис. 2). Вокруг 7x10 5 клеток были получены на мышь спинного мозга.

Содержание "> Клетки высевали в PDL покрытием 35 х 10 мм чашках для культуры ткани. Мы обнаружили, что покрытие с PDL было важным шагом, так как клетки не прилипать / расти, если пластины были покрыты. микроглии полностью приложить к культуральный планшет Примерно через два дня в культуре (рис. 3). спинного мозга мышей MacGreen, выражающие GFP под контролем микроглии / макрофагов промоутер CSF-1R, была использована для этого эксперимента.

Рисунок 1
Рисунок 1. Представитель образ новорожденных микроглии после двух дней в культуре. Микроглии культивировали от P0 C57/BL6 щенков мыши, и высевали на покровные без покрытия при плотности 2,5 × 10 5 клеток / мл., Гр. Необработанные микроглии, которые вернулись к отдыхая, разветвленная государства; B, D . Микроглии обрабатывали 100 нг / мл LPS в течение 4 ч и показать активированный амебоидных формы; Iba1 (зеленый, маркера, специфичного для макрофагов / микроглии белок клеточной поверхности) был использован для визуализации клеток, в то время как яркость изображения поля были использованы для показать общей популяции клеток. DAPI Fluoromount был использован для визуализации ядер и указывает на чистоту культуры.

Рисунок 2
Рисунок 2. Сотовые подсчета. DAPI Fluoromount смешивали с равным объемом суспензии клеток и помещали в гемоцитометр. Мы объединили светлого и флуоресценцию установка для визуализации DAPI-позитивными клетками и гемоцитометра сетки для точного количества клеток.

"FO: SRC =" / files/ftp_upload/50647/50647fig3highres.jpg "SRC =" / files/ftp_upload/50647/50647fig3.jpg "/>
Рисунок 3. Представитель изображения взрослого спинного микроглии мозга после двух дней в культуре. . спинного мозга MacGreen мыши была использована для культуры процедуры. Клетки высевали в PDL покрытием 35 х 10 мм чашки для культуры ткани при плотности 7x10 5 клеток / мл. Б. Яркое изображение области микроглии спинного мозга после двух дней в культуре. Микроглии (синие стрелки) и астроциты (красные стрелки) показаны. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Микроглии модулировать нормальное функционирование ЦНС, а также воспалительные реакции к различным патологиям. Функциональные синаптической ремоделирования микроглии был вовлечен в поддержание нормального гомеостаза мозга 15. Во время нейрогенного каскада они участвуют в оформлении нейронных клеток-предшественников из зубчатой ​​извилины гиппокампа 4, 16. Таким образом, необходимо развивать культуру система, в которой для изучения новорожденных и взрослых микроглии, которая будет охватывать широкая полоса развития и зрелости, в течение которого микроглии иметь несколько дискретных функций. Мы наметили быстрый и эффективный метод культуры микроглии от взрослого спинного и головного мозга новорожденных. Мы смогли получить препараты клеток у взрослых, которые были 70% микроглии, а оставшуюся часть, состоящую из астроцитов, и чистота новорожденных микроглии подготавливает к 100%.

Учитывая роль тхат астроциты были в регулировании состояния активации микроглии 17-19, важно оптимизировать условия культивирования для улучшения чистоты культуры. Хотя сочетание клеточной суспензии с равным объемом DAPI Fluoromount обеспечивает точное количество клеток, это не возможно отличить микроглии от других типов клеток с использованием этого метода. Чтобы улучшить чистоту взрослых микроглии подготовки, GFP покрытием Dynabeads можно инкубировать с суспензию клеток, полученных из MacGreen мышей, чей миелоидных клеток уже экспресс-GFP 20. Другое предложение было бы к пластине смешанной суспензии клеток в культуре блюда, которые ранее не были покрыты PDL для предотвращения астроцитов Приложение 13. Тем не менее, мы обнаружили, что клетки не растут на пластине, если они не были предварительно покрыты, которое в руках применим как к неонатальной и взрослых клеток.

Многие протоколы описания методов ISOLAtion и покрытия первичных микроглии либо из ткани головного мозга крысы или мыши используют встряхивание смешанного глиальных культурах отделить микроглии и тем самым получить очищенную населения для последующих экспериментов 12. Наш протокол отличается наиболее заметно для исключения сотрясения шаг, и сосредоточить внимание на очистку микроглии только населению через точно титрование условиях культивирования. По нашему опыту, пожимая смешанного глиальных культурах, чтобы удалить микроглии является эффективным, но имеет один существенный недостаток - то, что потрясен микроглии потребуется много дней, чтобы вернуться к полному покою морфологией 12. Это может быть проблематичным при условии, что активированной микроглии имеют значительно отличается цитокиновый профиль 21. Наш протокол, принимая при этом немного больше времени, чтобы получить чистый микроглии, поддерживает клетки в состоянии покоя во всем. Как и взрослые подготовки обсуждаются в следующем пункте, один недостаток нашего метода является возможнымность небольшой загрязнение другими типами клеток, а именно астроцитов.

Наша техника для культивирования взрослых микроглии значительно отличается от существующего метода. Многие протоколы требуют использования центрифугирования в градиенте плотности (перколлом), а также использованием проточной цитометрии, чтобы получить чистый микроглии населения 22. В нашем методе создания стабильной микроглии культуры от взрослого спинного мозга мы не использовать либо технику, которая делает для значительно менее трудоемким и сложным протоколом для исследователя, чтобы следовать. Хотя подавляющее большинство взрослых микроглии препараты приходят из тканей головного мозга, спинного мозга состоит из того же типа клеток - и, следовательно, наш протокол представляет справедливого сравнения с ранее описанными методами 22. Один компромисс в нашей протокол является немного менее чистого микроглии препарат, состоящий из 70% микроглии, а остальные фракции клеток на в основном из астроцитов оригиналовN. Это несоответствие может потенциально быть преодолена использованием дополнительной стадии выделения более чистой микроглии с использованием очень специфический тип клеток маркеры микроглии линии, такие как Iba-1 и F4/80 конъюгированных с магнитными шариками.

Большинство исследований, которые оценивают роль микроглии в неврологических заболеваний, которые влияют на спинном мозге были проведены с использованием клеток из головного мозга новорожденных, и, хотя это основательный подход для ответов на вопросы о роли микроглии в нормальном развитии, а также патологий, влияющих на мозг В частности, мы чувствовали, что более специфического метода были образованы для изучения функции микроглии во взрослом спинном мозге. Наши новорожденных метод очень эффективный способ ответить на большинство вопросов, касающихся нормального функционирования мозга, а также при определенных патологических условиях, и взрослый метод является хорошей альтернативой использованию новорожденных клетки для таких исследований, учитывая изменчивость в иммунологический ответ• между неонатальной микроглии и клеток взрослого организма, а также между микроглии от головного и спинного мозга 6-9. Микроглии, полученные из обоих методов, описанных также подходят для экстракорпорального совместного культивирования исследованиях (в основном мы культуре их нейронов или олигодендроцитов в нашей лаборатории), что адрес эффект микроглии на другие типы клеток, а также новорожденных и взрослых микроглии ответ на активацию раздражители.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Acknowledgments

Мы хотели бы поблагодарить членов Tsirka лабораторию для их советы и полезные замечания. Эта работа была поддержана R01NS42168 устанавливать, 12PRE12060489 в РБ, NSF-3MT IGERT и общение Тернер Диссертация на LT, и NSF-3MT IGERT к JCN.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
EDTA, 5mM Invitrogen 15567-028
Lidocaine, 60mM Sigma L-5647
Trypan Blue Sigma T8154
Trypsin/EDTA Cellgro 25-052-CI
DMEM, 1X Cellgro 10-017
Sodium Pyruvate Cellgro 25-000-Cl
Gentamycin Sulfate Biowittaker 17-518Z
35 x 10mm tissue culture dish Falcon 353001
Poly-D-Lysine, 100 μg/ml Dilute 1:20
HBSS, 1X Cellgro 20-023-CV

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ransohoff, R. M., Perry, V. H. Microglial Physiology: Unique Stimuli, Specialized Responses. Ann. Rev. Immunol. 27, 119-145 (2009).
  2. Ginhoux, F., Greter, M., Leboeuf, M., Nandi, S., See, P., Gokhan, S., Mehler, M., Conway, S., Ng, L., Stanley, E., Samokhavalov, I., Merad, M. Fate mapping analysis reveals that adult microglia derive from primitive macrophages. Science. 330, (2010).
  3. Kraft, A. D., Harry, G. J. Features of microglia and neuroinflammation relevant to environmental exposure and neurotoxicity. Int. J. Env. Res. Pub. Health. 8, 2980-3018 (2011).
  4. Sierra, A., Encinas, J. M., Deudero, J., Chancey, J., Enikolopov, G., Overstreet-Wadiche, L., Tsirka, S., Maletic-Savatic, M. Microglia shape adult hippocampal neurogenesis through apoptosis-coupled phagocytosis. Cell Stem Cell. 7, 483-495 (2010).
  5. Emmetsberger, J., Tsirka, S. Microglial inhibitory factor (MIF/TKP) mitigates secondary damage following spinal cord injury. Neurobiol. Dis. 47, 295-309 (2012).
  6. Gao, Z., Tsirka, S. E. Animal Models of MS Reveal Multiple Roles of Microglia in Disease Pathogenesis. Neurol Res. Int. 383087 (2011).
  7. Beggs, S., Trang, T., Salter, M. W. P2X4R+ microglia drive neuropathic pain. Nature Neurosci. 15, 1068-1073 (2012).
  8. Olson, J. K. Immune response by microglia in the spinal cord. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1198, 271-278 (2010).
  9. Batchelor, P. E., Tan, S., Wills, T. E., Porritt, M. J., Howells, D. W. Comparison of inflammation in the brain and spinal cord following mechanical injury. J. Neurotrauma. 25, 1217-1225 (2008).
  10. Schell, J. B., Crane, C. A., Smith, M. F., Roberts, M. R. Differential ex vivo nitric oxide production by acutely isolated neonatal and adult microglia. J. Neuroimmunol. 189, 75-87 (2007).
  11. Brannan, C. A., Roberts, M. R. Resident microglia from adult mice are refractory to nitric oxide-inducing stimuli due to impaired NOS2 gene expression. Glia. 48, 120-131 (2004).
  12. Tamashiro, T. T., Dalgard, C. L., Byrnes, K. R. Primary microglia isolation from mixed glial cell cultures of neonatal rat brain tissue. J. Vis. Exp. (66), e3814 (2012).
  13. Yip, P. K., Kaan, T. K., Fenesan, D., Malcangio, M. Rapid isolation and culture of primary microglia from adult mouse spinal cord. J. Neurosci. Methods. 183, 223-237 (2009).
  14. Ponomarev, E. D., Novikova, M., Maresz, K., Shriver, L. P., Dittel, B. N. Development of a culture system that supports adult microglial cell proliferation and maintenance in the resting state. J. Immunol. Meth. 300, 32-46 (2005).
  15. Ji, K., Akgul, G., Wollmuth, L. P., Tsirka, S. E. Microglia actively regulate the number of functional synapses. PLoS One. 8, e56293 (2013).
  16. Tremblay, M. -È, Majewska, A. A role for microglia in synaptic plasticity. Comm. Integr. Biol. 4, 220-222 (2011).
  17. DeWitt, D. A., Perry, G., Cohen, M., Doller, C., Silver, J. Astrocytes regulate microglial phagocytosis of senile plaque cores of Alzheimer's disease. Expt. Neurol. 149, 329-340 (1998).
  18. Aloisi, F., Penna, G., Cerase, J., Menéndez Iglesias, B., Adorini, L. IL-12 production by central nervous system microglia is inhibited by astrocytes. J. Immunol. 159, 1604-1612 (1997).
  19. Min, K. -J., Yang, M. -S., Kim, S. -U., Jou, I., Joe, E. -H. Astrocytes induce hemeoxygenase-1 expression in microglia: a feasible mechanism for preventing excessive brain inflammation. J. Neurosci. 26, 1880-1887 (2006).
  20. Sasmono, R., Oceandy, D., Pollard, J., Tong, W., Pavli, P., Wainwright, B., Ostrowski, M., Himes, S., Hume, D. A macrophage colony-stimulating factor receptor-green fluorescent protein transgene is expressed throughout the mononuclear phagocyte system of the mouse. Blood. 101, 1155-1163 (2003).
  21. Ekdahl, C. Microglial activation - tuning and pruning adult neurogenesis. Front Pharmacol. 3, 14 (2012).
  22. Sierra, A., Gottfried-Blackmore, A., McEwen, B., Bulloch, K. Microglia derived from aging mice exhibit an altered inflammatory profile. Glia. 55, 412-424 (2007).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics