Farelerde Korku Yastıkları Trace

Behavior

Your institution must subscribe to JoVE's Behavior section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Aşağıdaki deneyde farelerde iz korku şartlandırma için bir protokol açıklar. Çağrışımlı bellek Bu tür nötr uyarıcı ve koşulsuz uyaran ayıran bir iz dönemini kapsıyor.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Lugo, J. N., Smith, G. D., Holley, A. J. Trace Fear Conditioning in Mice. J. Vis. Exp. (85), e51180, doi:10.3791/51180 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Bu deneyde öğrenme ve hafıza ölçmek için bir tekniği mevcut. Burada sunulan iz korku klima protokolde nötr uyarıcı ve koşulsuz uyarıcı arasındaki beş eşleşmeleri vardır. Her klima deneme ayıran bir 20 saniye iz süresi vardır. Ertesi gün dondurma üzerinde koşullandırılmış uyarıcı (CS) ve eser süresinin sunumu sırasında ölçülür. Üçüncü gün bağlamsal hafızayı ölçmek için 8 dk test yoktur. Temsilcisi sonuçları koşulsuz uyarıcı olmadan sesi sunumları alınan farelere kıyasla caydırıcı koşulsuz uyarıcı (şok) ile sunuldu fareler vardır. Trace korku klima başarıyla diğer korku klima yöntemlerle bulunmayan farelerde ince öğrenme ve bellek açıkları ve geliştirmeler tespit etmek için kullanılır olmuştur. Korku şartlandırma Bu tür medyal prefrontal korteks ve hipokampus arasındaki bağlantılara bağlı olduğu düşünülmektedir. Bir akım tartışma bu yöntem, amigdal ile bağımsız olduğuna inanılmaktadır olmadığıdır. Bu nedenle, diğer korku klima test bu gecikme korku şartlandırma aracılığıyla gibi amigdala bağımlı öğrenme ve bellek etkisini incelemek için gereklidir.

Introduction

Korku klima nötr uyarıcı (NS) caydırıcı bir koşulsuz uyarıcı (US) ile eşleştirilmiş. NS normal bir sesi olduğunu ve ABD ile tekrarlanan eşleşmeleri aracılığıyla şartlı uyaran (CS) olur. CS sonra caydırıcı ABD yokluğunda, örneğin dondurma gibi bir şartlı yanıt (CR) ortaya çıkarabilir. Yaygın olarak kullanılan bir korku klima protokol gecikme klima olduğunu. Bu protokolde NS ve ABD'nin başlangıcı bitişik veya uyaran sunum bazı örtüşme ile. Eşzamanlı klima, geriye klima, ve iz Klima 1: gecikme korku klima zamansal birleşmeli klima en sık kullanılan türlerinden biri olmasına rağmen, çağrışımlı klima geçici düzenlemeler diğer bazı türleri vardır. Iz korku klima bir "iz" döneminde sonuçlanan birkaç saniye NS ve ABD arasında bir uyarıcı-interval var.

Çeşitli çalışmalarda açığı bildirdiiz korku şartlandırma s nörotoksik lezyonlar yapılar üretilmektedir zaman bu hipokampta 2-5 ya da farmakolojik maddeler, hipokampta reseptör fonksiyonunu bloke etmek için kullanılan girdi. Iz klima ve bağlamsal şartlandırma açıklarının hipokampus sonuçlarına lezyon, ancak gecikme korku klima 8 bozmaz. Iz korku klima kullanmanın birçok faydası vardır. Korku şartlandırma protokolü üç günlük bir test süresi boyunca elde ve mekansal olarak bağlı değildir hipokampusa bağlı bellek sağlar edilebilir. Trace korku klima Morris su labirenti, roman nesne tanıma testi, ya da hipokampus bağımlı bellek araştıran diğer labirent testlere tamamlayıcı bir test olarak kullanılabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Aşağıdaki deneyde kullanılan fareler, 14 saat ışık ve 10 saat karanlık (saat 20:00-06:00) günlük döngü ile, 22 ° C'lik bir ortam sıcaklığında oluşturulmuş ve Baylor Üniversitesi barındırılmıştır. Fareler, yiyecek ve su ad libitum erişim verildi. Farelere Tüm prosedürler Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Sağlık Rehberi Ulusal Enstitüleri ile uyumlu ve hayvan protokol Baylor Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı.

Genel bakış

Iz şartlı korku görev Wiltgen ve arkadaşları 9 tarafından açıklanan prosedürlere dayanmaktadır.

1.. Ekipman hazırlanması

Korku şartlandırma aygıtı bölme (26 cm x 22 cm x 18 cm) olan akrilik iki tarafında, metal, iki taraf ve hafif bir ayak şoku uygulamak için kullanılan bir ızgara alt kat oluşur. Test odası evsağlıklı bir zayıflatılmış odası içinde d. Odası da hareket algılama yazılımı etkileyen dışarıdan ışık önlemek için hafif sıkı.

  1. Test odası için şok seviyelerini, ışık seviyeleri ve ses şiddeti seviyesini ayarlayın. Test odasının arka plan düzeyi ölçün. Bu odasında arka plan gürültü 65 dB. Bu düzeyini ölçmek için bir ses ölçeri kullanın. Metre, 70 dB için ayarlanmış yavaş ayarı C, ve algılama ayarlanmış olmalıdır.
    1. 0,5 mA şok seviyesini ayarlayın. Doğru şok seviyesini (Malzeme bkz. Tablo) kalibre harici kalibrasyon cihazı kullanın. Şok jeneratörün iç ölçümü doğru değildir. Şok jeneratörü doğru bir standart amper metre ile ölçülen edilemez bir şifreli şoku.
    2. Izgara çubukları birer kurşun koyun ve diğer kurşun 3 veya 4 bar üzerine yerleştirin. Ürkütmek için şok jeneratör kullanın. Doğru seviyesi elde edilinceye kadar şok seviyesini ayarlayın. Ea için yapınch klima odasına korkuyorum.
    3. Odanın ışık seviyesini ölçerken odasına kapıyı kapatın. Yaklaşık 1.0 ışık seviyesini ayarlayın. Bu, bu deneyde kullanılan freezeframe yazılımına özel bir sayıdır. Harici bir ışık ölçer 2 lux olarak okuyacaktır. Işık seviyesi, ev ışığı konumunu taşıyarak ya da lensin kondansatör ayarlanması ile ayarlanabilir. Ayarladıktan sonra lens için ayarlama vidalarını sıkmak için emin olun.
    4. 85 dB ses desibel seviyesini ayarlayın. Desibel seviyesini (Malzeme bkz. Tablo) kalibre için test kafes içinde harici bir desibel ölçer kullanabilirsiniz. Sunulan ses 2,700 Hz sesi olacaktır. Not: 6 aylık daha yaşlı fareler kullanılarak ise eski farenin açıklarını işitme gelmiş olabilir çünkü beyaz gürültü kullanmak daha iyi olabilir.
  2. Aparatı ayrı tutma odaya konular almak hazır olduktan sonra. Not: test odası olarak aynı odada fare ev yapmayın.
  3. Etiket incitest sırasına göre test edilecektir farelerin kuyruk e. Bu test önce aşırı kullanımı azaltmak için en iyisidir. Alternatif olarak, kuyrukları deneyden önce bir gün stresi ele azaltmak için etiketli olabilir. Fareler, onları, 30 dakika boyunca oda gelmesini sağlayacak etiketlendi sonra. Test tamamlandıktan sonra fareler konut için ekstra temiz kafesleri var.

2. Klima Gün 1 Trace

  1. Kafesin her fare çıkarın ve korku klima odasına taşınması için tek tek kafeslere yerleştirin. Her kafes için temiz yatak kullanın. Fareler doğru test düzeni sağlamak için transfer kafes bir yapışkan not yerleştirin. Not: fareler tek başına ev sahipliği varsa o onların evde kafes içinde taşınabilir.
  2. Test odasında fare yerleştirin ve kapağını kapatın. Yazılım programını başlatın.
  3. Eğitim günde, fareler, 3 dakika için bölmeyi araştırmak için izin verir. Yazılım daha sonra 20 saniye sesi (85 dB, 2700 Hz) t sunuyorHayvan o. 20 saniyelik bir süre sonra, bir iz hafif şok (2 saniye, 0.5 mA) hayvana tatbik edilmektedir.
  4. Bu videoyu görüntülerken tarafından caydırıcı uyaranları aldığını onaylamak için konunun reaksiyonu kaydedin. A 200 sn arası deneme aralığı 5 klima denemeler ayırır. Her deneme sonra bir 20 saniye gecikme bir şok ardından 20 saniye ses oluşur.
  5. Test hayvan test kafesine çıkarmadan önce, 1 dakika boyunca test odası içinde kalmasına izin tamamlandıktan sonra.
  6. Geri transferi kafeste hayvan koyun ve onun ev kafesine geri. Ek fareler evlerine kafes varsa o zaman tek tek bütün fareler tam test kadar fareyi ev. Bu test edilmemiştir diğer farelerin stresi azaltacaktır. Alternatif bir çözüm tek başına sürekli olarak bir kafes fareleri kaldırma etkisini azaltmak için testten önce bir hafta tüm fareleri ev olacaktır.
  7. EAC sonra% 30 izopropanol ile test odası temizh hayvan test edilmiştir.
  8. Tekrar test kohort tüm fareler için 2,2-2,7 adımları.
  9. Kohorttaki son fare test edildikten sonra onların koloni odasına tüm fareleri dönün.

3. Trace Fear Klima 2. Gün: İz Hafıza Testi

  1. Trace bellek test 2. günde ortaya çıkar. Bu protokolde 3 ton sunumları vardır. Iz klima testi için yeni bir bağlamda fareler yerleştirin.
  2. Üç 20 sn ton sunumlar ardından 2 dk temel dönemi ile bir programı çalıştırmak için yazılım hazırlayın. Her sesi sunum arasındaki sa 220 sn ITI vardır.
  3. Yeni bağlam durum için, şekil, doku ve iyileştirme odasının rengi değiştirmek için bölmenin kat açık akrilik ekler yerleştirin.
  4. Taban elemanının altında bir ağırlık teknesi vanilya özü yerleştirerek odacık içinde koku değiştirin.
  5. % 70 etanol yerine% 30 izopropanol ile odası temizleyin. Not: Bu yardımcı olacaktıryeni bir bağlam oluşturmak için.
  6. Tutma odaya fareler getirin ve gerekirse test için kuyruklarını yeniden isimlendirmekte.
  7. Parçalanmış kağıt ile yatak değiştirerek yeni içerik transferi kafesleri hazırlayın. Not: Bu bir roman bağlamı oluşturmada yardımcı olacaktır.
  8. Daha sonra programı başlatmak test odasında fareler yerleştirin. Test tamamlandıktan sonra% 70 etanol ile odası temizleyin.
  9. Iz klima tamamlandıktan sonra evlerine kafesine fareler dönün. Tüm fareler test edildiğinde onların koloni odasına tüm fareleri dönün.

4. Trace Fear Klima 3. Gün: İçerik Bellek Testi

  1. Üçüncü gün içeriksel klima yapılır. 8 dakika boyunca donma davranışı kaydetmek için bir programı çalıştırmak için yazılım hazırlayın.
  2. Test etmeden önce ve her bir fare test edildikten sonra% 30 izopropanol ile odası temizleyin. Bağlam Gün 1 ile özdeş olmalıdır. Transfer kafesler günde 1 ile aynı olmalıdır.
  3. Daha sonra programı başlatmak test odasında her fare yerleştirin. Test tamamlandıktan sonra% 30 izopropanol ile odası temizleyin.
  4. Tamamlandığında onların koloni odasına tüm fareleri dönün.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Temsilcisi sonuçlar için nötr uyarıcı aldı ama koşulsuz uyaran (hayır şok koşul) almadım farelere kıyasla koşulsuz uyarıcı (şok durumu) ile nötr uyarıcı eşleşmeleri alınan kontrol C57BL/6J yetişkin farelerin veri sunmak. İlk protokol doğru yapılmış olup olmadığını belirlemek için bu davranış testi kurarken bu durumu çalıştırmak için önemlidir.

Şekil 1 'in veri izi korku şartlandırma testinde C57BL/6J fareler eğitim gün temsil eder. Bu eğitim gün boyunca tüm koşulları karşısında gruplarını karşılaştırmak için genellikle gerekli değildir. Bununla birlikte, temel olarak ilk fark olup olmadığını değerlendirmek için temel dönemi incelemek için yararlıdır. Biz temel koşul t (1,10) dondurma düzeylerinde herhangi bir fark bulamamışlardır = 0.6, p = 0.56. Bu dondurma hiçbir başlangıç ​​farklılıklar olduğunu göstermektedir leVELS. Genel olarak düşük donma seviyesi erken öğrenme duruşmalarda var ama klima eşleştirme çalışmalarda üzerinde donma davranışında bir artış var. Biz grup F (1,10) bir temel etkisi bulunan 16 dönemler boyunca Şok ve Şok durum arasındaki farklılıkları = 60.3, p <0.001 analiz karma model ANOVA yapıldığında. Grup F (1,10) bir ana etkisi vardı = 215.9, p <0.001, ve bir grup ve zaman etkileşimi F (1,10) tarafından = 133.9, p <0.001. Analiz iki grup arasında devir arasında önemli bir fark olduğunu gösterir.

Şekil 2 için veri ton şok eşleşmeleri sahip farelerde (Şok durum) ve 5 ton klima çalışmalar boyunca şok eşleştirme (Şok Durum) olmadan aynı prosedür alan fareler arasındaki donma davranışını göstermektedir. Şok Durumu fareler iz korku şartlandırma ton şok eşleşmeleri arasında bir ilişki kurdu. Karışık-Tasarım ANOVA Grup F (1, 10) için öğrenme temel etkisini incelemek için kullanılan = 83.48, p <0.001 oldu. Klima çalışmalarda (zaman) F (3,30) = 24.83, p <0.001 ve grup X zaman etkileşimi F (3,30) = 4.7, p <0.01, bir ana etkisi de vardı. Bir grup x zaman etkileşim olduğu için, her zaman noktasında, ayrı t-testi, her zaman noktasında iki grup arasındaki fark incelemek üzere yapılmıştır. Sesi t (1,10) = 8.6, p <0.001;; iz süresi t (1,10) = 5,3 Ayrı t-testi temel t grup (1,10) = 6.8, p <0.001 arasında anlamlı bir fark ortaya , p <0.001 ve arası deneme aralığı t (1,10) = 5.1, p <0.001. Sesi, iz dönemde, ve arası deneme aralığı için veri üç sunumlar arasında ortalama edildi. Veri izleme klima deney başarıyla iz klima protokole öğrenme farklılıkları ürettiğini göstermektedir.

Şekil 3 için veri Freez göstermektonu şok eşleştirmeleri (Şok Durumu) vardı fareler ve bağlam durumda şok eşleştirme (Şok Durumu) olmadan aynı prosedürü alınan fareler arasındaki davranışı ing. Iz klima uygulanmaktadır sonra bağlam durumunun testi 48 saat sunuldu. Şok Durumu fareler Şok durum farenin F (1,10) = 12.5, p <0.01 'den orijinal bağlamında önemli ölçüde daha fazla donma vardı. Zaman F bir temel etkisi (7,70) = 5.5, p <0.001 de vardı, ancak zaman ve grup F (7,70) arasında ilişki yoktur = 0.78, p = 0.61. Veri CS iz korku klima bir ABD ile eşleştirilmiş zaman iz Klima deney başarıyla bağlamsal öğrenmeyi ürettiğini göstermektedir.

Şekil 1
Şekil 1.Iz korku klima eğitim günden itibaren veri. Siyah çubuklar caydırıcı koşulsuz uyaran (şok) alınan farelerin verileri temsil eder. Kırmızı çubuklar caydırıcı koşulsuz uyaran (şok) alırsınız ama sesi uyaranları almamıştır fareler temsil eder. Çubuklar, ortalama (SEM) eğitim gün boyunca fareler için yüzde dondurma ortalama ± standart hatayı temsil eder.

Şekil 2,
Şekil 2.. Veri iz korku klima aşağıdaki tonu test farelerin. Daha fazla donma bazal, sesi şoku (Şok Durumu) almadım farelere kıyasla vardı koşulsuz uyaran (Şok koşul) alınan fareler, iz ve intertrial aralığı (ITI). Çubuklar ortalamasını temsil etmektedirSesi test sırasında fareler için ortalama (SEM) yüzde donma Standart hatası ±. Astericks (***) önemli bir grup fark (p <0.001) gösterir.

Şekil 3,
Şekil 3,. Iz korku şartlandırma sonra bağlam testinde test farelerden elde edilen veriler. Şok alınan fareler 8 dakika boyunca deneme bağlam deney durumda Şok durumda fareler ile karşılaştırıldığında daha fazla donma vardı. Veri noktaları, bağlam test sırasında ortalama (SEM) fareler için yüzde dondurma ortalama ± standart hatayı temsil eder. Astericks (***) önemli bir grup fark (p <0.001) gösterir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Iz korku klima altında yatan sinir devresi aydınlatmıştır çeşitli çalışmalar olmuştur. Trace korku klima hipokampus 12-14 CA1 oluştuğuna inanılır. Kanıt medial prefrontal korteks (Mpfc) iz göz kırpma klima 15 büyük bir rol oynar ve Mpfc iz korku klima dahil olmak üzere tespit edilmiştir ki de vardır. Bir çalışma, böylece iz aralığı 17 sırasında hafızayı sürdürmek bir yapı sağlayarak, Mpfc nöronlar iz döneminde sürekli etkinlik sağlamak bulundu.

Mpfc rolünü inceleyerek bir çağrışımlı bellek oluşturan moleküler olayların zaman çizgisini incelemek mümkündür. Runyan vd. 16. Mpfc de ekstraselüler sinyal ile düzenlenen kinaz (ERK) inhibe bellek tutma ile müdahale bulundu, ama hafıza kodlama ile müdahale etmedi. Fosfonatlar olarak Ayrıca, bir artışprefrontal kortekste horylated ERK önce hipokampüste daha bildirilmiştir. ERK uzun süreli bellekte yer olduğuna inanılan bu yana, Mpfc uzun süreli belleğin tutma yer alan önemli bir yapı olabilir. Diğer çalışmalar, uzun süreli bellek ve Mpfc ve hipokampus arasındaki etkileşim, diğer sinyal yollarının rolünü incelemek olabilir.

Iz korku klima başka bir kullanımı ince hipokampus bağımlı öğrenme ve hafıza değişiklikleri inceleyerek olduğunu. GABAerjik inhibisyon azaltmak Genetik manipülasyonlar gecikme korkusu klima değiştirmeden iz klima geliştirmek. Başka bir çalışmada iz korku klima sadece GABAA δ altbirimini 9 yoksun dişi farelerde gelişmiş olduğunu gördük. Ayrı bir çalışma iz korku klima GABAa α4 22 yoksun farelerde gelişmiş olduğunu gördük. Bu nedenle, korku klima iz ince hipokampus bağımlı öğrenme ve hafıza geliştirmeleri incelemek yararlı olabilir or açıkları. Trace klima bir bağlamsal korku klima protokolü 23 kullanılarak tespit edilmiştir ne benzer GABAeric aktivite nörosteroidlerin etkiyi saptamak için yeterli duyarlı olabilir. Bir nakavt veya erkek ve dişi fareler kullanılır transgenik fare öğrenme ve bellek açıklarını incelerken bu önemli bir göz olabilir.

Iz korku klima Mpfc ve hipokampus rolünü incelemek yararlı olabilir kanıt bir şey bile olsa, iz korku klima amigdala-bağımsız olup olmadığını bazı tartışmalar var. Bir raporda da amigdala ve iz ve korku klima 24 geciktirmek için hipokampus katkısını incelemek için bir çift ayrılma çalışma yürüttü. Onlar GABAa agonist tarafından amigdala inaktive zaman düşüklüğü iz korku klima edinimi veya konsolidasyon aksatmadan bağlamsal ve gecikme şartlandırma vardı Muscimol. Th inaktivasyonuE dorsal hipokampus gecikme korkusu klima bozmadan iz klima ve bağlamsal bellek bozulmuş. Bu sonuçlar kuvvetle iz korku klima amigdala gerektirmez destek olsa da, diğer çalışmalarda çelişkili sonuçlar 25-27 bulduk. Kwapis vd. 25. gecikme konsolidasyon ve korku klima iz bazolateral amigdala içine protein sentezi inhibitörü anisomysin infüzyon tarafından bozulur bulundu. Bu kağıtlar birbirlerine çelişiyor gibi görünse de iz korku klima yaparken dikkate alınması gereken birkaç usul farklılıklar vardır.

Iz korku klima incelerken birkaç deneysel parametreleri dikkate almak önemlidir. Bir birleştirici şartlandırma bu tür kullanımı hayvan türüdür. Tarafından çalışma Kwapis vd. 25. kullanılan sıçanlar ve Raybuck ve Lattal 24 çalışma kullanılan fareler yüzden oradaiz korku klima temelini neurocircuitry türler farklılıklar olabilir. Bu yazıda tarif edilen protokol fareler için tasarlanmıştır. Bu protokol, sıçan ya da diğer türler için kullanılabilir ancak amigdala ve hipokampus inaktive bir çift ayrılma deneysel tasarım kullanmak doğrulama çalışmaları diğer hayvanlarda geçerliliğini belirlemek için yapılması gerekir.

Başka bir göz antrenman günde iz klima denemelerinin sayısıdır. Daha fazla ya da daha az klima denemeleri nöral yapıların iz korku şartlandırma işe hangi etkileyebilecek olabilir. Bu protokolde beş Klima çalışmalarda kullanılmıştır. Ek klima çalışmalar eklenecek olursa o zaman ek eşleşmeleri ile işe hale diğer nöral yapılara ek aktivasyonu var olabilir. Eşleşmeleri sayısının değiştirilmesi için ise ek olarak, izleme süresi uzatılır ya da kısaltılır edilebilir. Ancak, sho bazı kanıtlar vardırrt iz aralıkları hipokampus meşgul etmeyin ve CS ve ABD'nin sunumu arasında hiçbir aralığına sahiptir korku klima, geciktirmek için benzer sonuçlar üretebilir. Bu nedenle 15-20 saniye arasında değişen bir iz aralığı hipokampus meşgul için çeşitli çalışmalarda bildirilmiştir. Başka bir alterasyon koşulsuz uyaranın gücü olabilir. Burada sunulan protokolde şok 0,5 mA için kuruldu. Ek Eşlendirmeler ihtiyaç varsa şok seviyesi 0,3 mA indirdi olabilir. Az şoklar ihtiyaç varsa, o şok seviyesi 0,7 mA olarak ayarlanmış olabilir. 0.7 mA 'den daha yüksek bir şok seviyesi kaçınılmalıdır.

Hipokampus bağımlı iz klima için doğrulama çalışmaları yaparken sinirsel yapı inaktive edildiğinde bir husustur. Bu alternatif devre bu önceki eğitim durdurulmuş olduğu zaman hipokampus kullanmamakta bağlamsal korku koşullandırması kullanılabilir bulunmuştur. Bu nedenle, d inaktivasyonu zamanlamasıiz klima sırasında ifferent nöral yapıların önemli bir husustur.

Korku klima deneyler için bir diğer önemli husus başlangıç ​​seviyesidir. Taban seviyesinin birçok çalışma sesi sunumu 32 sırasında donma seviyelerinden başlangıç ​​seviyelerine çıkarmak veya arası deneme aralığı 33 başlangıç ​​seviyelerine çıkarmak beri rapor önemlidir. Bu manipülasyonlar taban seviyeleri aynı genelinde grupları olduğunu altta yatan varsayım var. Ancak, pozitif bir korelasyon temel korku düzeyleri ve sesi korku düzeyleri 34 arasında rapor edilmiştir. Jacobs ve ark. 34 tarafından kağıt başlangıç ​​seviyelerini azaltmak ve nasıl korku klima sırasında bazal düzeyleri için hesap için çeşitli stratejiler açıklanmaktadır. Çıkarma yöntemi kullanılarak, taban seviyeleri üzerinde sesi klima donma oranı yöntemini kullanırken, ya da inci kullanırken Bunlar önemli hususlar vardırtemel düzeyde farklılıkları hesaba e bazal öndeğişken yöntemi.

Ilk korku kasa kurulurken, önemli bir kontrol eşleştirilmemiş kontrol grubunun kullanılmasıdır. Unpaired kontrol grubu CS ve ABD'nin sunumu arasında rastgele aralıklarla vardır bir deney düzeneği oluşabilir. CS ve ABD farklı günlerde 29 sunulmuştur yerde başka bir yaklaşım olabilir. Eşleştirilmemiş kontrol grubu bu anlayışın, yenilik stres, pseudoconditioning ve donma davranışı katkıda diğer faktörler gibi nonassociative etkilerini belirlemek için yararlıdır. Smith ve diğ. 29 iz korku şartlandırma protokollerin farklı kullanımı ve nasıl fareler üç farklı suşlarda nonassociative etkilerini azaltmak için optimize edilebilir açıklanmaktadır. Farelerde korku klima optimize Bunlar önemli hususlar vardır.

Trace korku klima Severa sunuyorgecikme korku klima ve mekansal öğrenme bulgularını tamamlayıcı l avantajları. Ancak, bir kemirgen, iz klima denemelerin sayısı ve devre manipülasyon zamanlamasının seçim anlamlı sonuçların sonucunu ve yorumunu değiştirebilir farkında olmalıdır. Başka bir sınırlama iz korku klima amigdala-bağımlı öğrenme incelemek için kullanılabilir olup olmadığını tartışmalı olmasıdır. Ilk olarak, bir tedavi ya da bir nakavt hayvan etkisini inceleyen bu bir sınırlama olabilir. Stratejisi açısından ilk amigdala-bağımlı öğrenme ve hafıza ve hipokampus bağımlı içeriksel-klima, incelemek bir gecikme korkulan klima protokolünü kullanmak için iyi olurdu. Bir sonra daha fazla iz korku klima öğrenme ve bellek farklılıkları incelemek için deneklere başka bir kohort kullanabilirsiniz.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Acknowledgments

Bu çalışma Baylor Üniversitesi Araştırma Konseyi tarafından hibe ve Epilepsi Vakfı'nın bir araştırma bursuyla desteklenmektedir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
FreezeFrame Coulbourn
30% Isopropanol Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30%
70% Ethanol
Amp-meter Med-Associates ENV-420 Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only)
Digital Sound Level Meter 33-2055
Vanilla Extract McCormick Pure Vanilla Extract
Sticky Notes Post-it 3 in x 3 in

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Powell, R. A., Honey, P. L., Symbaluk, D. G. Introduction to learning and behavior. 4th ed, Wadsworth Cengage Learning. Forthcoming.
  2. Tsaltas, E., Preston, G. C., Gray, J. A. The effects of dorsal bundle lesions on serial and trace conditioning. Behav. Brain Res. 10, 361-374 (1983).
  3. McAlonan, G. M., Dawson, G. R., Wilkinson, L. O., Robbins, T. W., Everitt, B. J. The effects of AMPA-induced lesions of the medial septum and vertical limb nucleus of the diagonal band of Broca on spatial delayed non-matching to sample and spatial learning in the water maze. Eur. J. Neurosci. 7, 1034-1049 (1995).
  4. Chowdhury, N., Quinn, J. J., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus involvement in trace fear conditioning with long, but not short, trace intervals in mice. Behav. Neurosci. 119, 1396-1402 (2005).
  5. Quinn, J. J., Oommen, S. S., Morrison, G. E., Fanselow, M. S. Post-training excitotoxic lesions of the dorsal hippocampus attenuate forward trace, backward trace, and delay fear conditioning in a temporally specific manner. Hippocampus. 12, 495-504 (2002).
  6. Misane, I., et al. Time-dependent involvement of the dorsal hippocampus in trace fear conditioning in mice. Hippocampus. 15, 418-426 (2005).
  7. Quinn, J. J., Loya, F., Ma, Q. D., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus NMDA receptors differentially mediate trace and contextual fear conditioning. Hippocampus. 15, 665-674 (2005).
  8. McEchron, M. D., Bouwmeester, H., Tseng, W., Weiss, C., Disterhoft, J. F. Hippocampectomy disrupts auditory trace fear conditioning and contextual fear conditioning in the rat. Hippocampus. 8, 638-646 (1998).
  9. Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Ferguson, C., Homanics, G. E., Fanselow, M. S. Trace fear conditioning is enhanced in mice lacking the delta subunit of the GABAA receptor. Learn. Mem. 12, 327-333 (2005).
  10. Davis, R. R., et al. Genetic basis for susceptibility to noise-induced hearing loss in mice. Hear. Res. 155, 82-90 (2001).
  11. Zheng, Q. Y., Johnson, K. R., Erway, L. C. Assessment of hearing in 80 inbred strains of mice by ABR threshold analyses. Hear. Res. 130, 94-107 (1999).
  12. Moyer, J. R., Thompson, L. T., Disterhoft, J. F. Trace eyeblink conditioning increases CA1 excitability in a transient and learning-specific manner. 16, 5536-5546 (1996).
  13. Leuner, B., Falduto, J., Shors, T. J. Associative memory formation increases the observation of dendritic spines in the hippocampus. J. Neurosci. 23, 659-665 (2003).
  14. McEchron, M. D., Disterhoft, J. F. Hippocampal encoding of non-spatial trace conditioning. Hippocampus. 9, 385-396 (1999).
  15. McLaughlin, J., Skaggs, H., Churchwell, J., Powell, D. A. Medial prefrontal cortex and pavlovian conditioning: trace versus delay conditioning. Behav. Neurosci. 116, 37-47 (2002).
  16. Runyan, J. D., Moore, A. N., Dash, P. K. A role for prefrontal cortex in memory storage for trace fear conditioning. J. Neurosci. 24, 1288-1295 (2004).
  17. Gilmartin, M. R., McEchron, M. D. Single neurons in the medial prefrontal cortex of the rat exhibit tonic and phasic coding during trace fear conditioning. Behav. Neurosci. 119, 1496-1510 (2005).
  18. Crow, T., Xue-Bian, J. J., Siddiqi, V., Kang, Y., Neary, J. T. Phosphorylation of mitogen-activated protein kinase by one-trial and multi-trial classical conditioning. J. Neurosci. 18, 3480-3487 (1998).
  19. Martin, K. C., et al. MAP kinase translocates into the nucleus of the presynaptic cell and is required for long-term facilitation in Aplysia. Neuron. 18, 899-912 (1997).
  20. Crestani, F., et al. Trace fear conditioning involves hippocampal alpha5 GABA(A) receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 8980-8985 (2002).
  21. Crestani, F., et al. Decreased GABAA-receptor clustering results in enhanced anxiety and a bias for threat cues. Nat. Neurosci. 2, 833-839 (1999).
  22. Moore, M. D., et al. Trace and contextual fear conditioning is enhanced in mice lacking the alpha4 subunit of the GABA(A) receptor. Neurobiol. Learn. Mem. 93, 383-387 (2010).
  23. Cushman, J. D., Moore, M. D., Jacobs, N. S., Olsen, R. W., Fanselow, M. S. Behavioral pharmacogenetic analysis on the role of the alpha4 GABA(A) receptor subunit in the ethanol-mediated impairment of hippocampus-dependent contextual learning. Alcohol Clin. Exp. Res. 35, 1948-1959 (2011).
  24. Raybuck, J. D., Lattal, K. M. Double dissociation of amygdala and hippocampal contributions to trace and delay fear conditioning. PLoS ONE. 6, (2011).
  25. Kwapis, J. L., Jarome, T. J., Schiff, J. C., Helmstetter, F. J. Memory consolidation in both trace and delay fear conditioning is disrupted by intra-amygdala infusion of the protein synthesis inhibitor anisomycin. Learn. Mem. 18, 728-732 (2011).
  26. Gilmartin, M. R., Kwapis, J. L., Helmstetter, F. J. Trace and contextual fear conditioning are impaired following unilateral microinjection of muscimol in the ventral hippocampus or amygdala, but not the medial prefrontal cortex. Neurobiol. Learn. Mem. 97, 452-464 (2012).
  27. Baysinger, A. N., Kent, B. A., Brown, T. H. Muscarinic receptors in amygdala control trace fear conditioning. PLoS ONE. 7, (2012).
  28. Wanisch, K., Tang, J., Mederer, A., Wotjak, C. T. Trace fear conditioning depends on NMDA receptor activation and protein synthesis within the dorsal hippocampus of mice. Behav. Brain. 157, 63-69 (2005).
  29. Smith, D. R., Gallagher, M., Stanton, M. E. Genetic background differences and nonassociative effects in mouse trace fear conditioning. Learn. Mem. 14, 597-605 (2007).
  30. Rudy, J. W., O'Reilly, R. C. Contextual fear conditioning, conjunctive representations, pattern completion, and the hippocampus. Behav. Neurosci. 113, 867-880 (1999).
  31. Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Anagnostaras, S. G., Sage, J. R., Fanselow, M. S. Context fear learning in the absence of the hippocampus. J. Neurosci. 26, 5484-5491 (2006).
  32. Reijmers, L. G., Perkins, B. L., Matsuo, N., Mayford, M. Localization of a stable neural correlate of associative memory. Science. 317, 1230-1233 (2007).
  33. Huerta, P. T., Sun, L. D., Wilson, M. A., Tonegawa, S. Formation of temporal memory requires NMDA receptors within CA1 pyramidal neurons. Neuron. 25, 473-480 (2000).
  34. Jacobs, N. S., Cushman, J. D., Fanselow, M. S. The accurate measurement of fear memory in Pavlovian conditioning: Resolving the baseline issue. J. Neurosci. Methods. 190, 235-239 (2010).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics