Förfarande för mänskliga vena Vener * These authors contributed equally

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

De mekanismer som leder till utvecklingen av intimal hyperplasi (IH) och ventransplantat misslyckande är fortfarande dåligt kända. Denna studie beskriver en ex vivo-system för att BEGJUTA mänskliga ådror under kontrollerad flöde och tryck. Dessutom effektiviteten av extern nätarmering att begränsa utvecklingen av IH utvärderades.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Longchamp, A., Allagnat, F., Berard, X., Alonso, F., Haefliger, J. A., Deglise, S., Corpataux, J. M. Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement. J. Vis. Exp. (92), e52079, doi:10.3791/52079 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Grunden för samtida terapier för omfattande aterosklerotiska kärlsjukdomar är venös bypass graft. Emellertid är dess hållbarhet hotas av intimal hyperplasi (IH) som så småningom leder till kärlocklusion och transplantat misslyckande. Mekaniska krafter, särskilt låg skjuvspänning och hög mur spänning, tros initiera och upprätthålla dessa cellulära och molekylära förändringar, men deras exakta bidrag återstår att redas ut. För att selektivt utvärdera rollen av tryck och skjuvspänning på biologi IH, var en ex vivo perfusionssystem (VVD) skapas för att BEGJUTA segment av humana vena vener enligt arteriell regim (hög skjuvning stress och högt tryck). Ytterligare tekniska innovationer tillät samtidig perfusion av två segment av samma anda, en förstärkt med ett externt nät. Vener skördades med hjälp av en no-touch teknik och omedelbart till laboratoriet för montering i VVD. Ett segment av den nyligen isolrerad venen inte perfunderades (kontroll, dag 0). De två övriga segmenten perfunderades i upp till 7 dagar, varvid en helt skyddad med ett 4 mm (diameter) externt nät. Trycket, flödeshastighet och puls kontinuerligt övervakas och justeras för att efterlikna de hemodynamiska förhållandena i lårbensartären. Efter avslutad perfusion, var vener demonteras och användas för histologiska och molekylär analys. Under ex vivo förhållanden, högtrycks perfusion (arteriell, medelvärde = 100 mm Hg) är tillräcklig för att generera IH och ombyggnad av humana vener. Dessa förändringar är reducerade i närvaro av en extern polyesternät.

Introduction

Hjärt-kärlsjukdomar är den främsta orsaken till sjuklighet och dödlighet i västvärlden en. Trots framstegen inom endovaskulära behandlingar förblir bypass operation grunden för samtida terapier, alltså mer än en halv miljon ventransplantat utförs årligen i USA. Trots decennier av forskning, 30-60% lägre extremitet ventransplantat misslyckas inom de första åren på grund av intimahyperplasi (IH) 2. Mekaniska krafter, särskilt låg skjuvspänning (SS) och hög mur spänning, är avgörande för initiering och utveckling av denna hyperplastiska effekten 3,4. För att lösa detta, var en ex vivo vener perfusionssystem (VVD) genereras för att studera under strikt kontrollerade hemodynamiska förhållanden (tryck och skjuvspänning), beteende humana vena ådror. I denna studie efter insättning i den arteriella-liknande cirkulation, högt tryck (medelvärde = 100 mm Hg) var tillräcklig för att stimulera proliftion och migration av glatta muskelceller in i intima-skiktet (IH) 5.

Däggdjurs studier har föreslagit att använda extern förstärkning som en effektiv metod för att stödja "arterialized ven" och motverka den akuta hemodynamiska förändringar venen ansikten gång implanteras i en arteriell miljö. Nätet förhindras över buk, ökad skjuvspänning och minskad väggspänning och därmed IH 6-10. Men de bakomliggande mekanismerna och dess tillämplighet på mänskliga ådror förbättra bypass öppenhet har inte beskrivits fullständigt. Våra VVD användes för att jämföra, Tillstånds imiterar förändringarna en ven ansikten gång införda i en arteriell regim (hög skjuvning stress och press), beteende humana vena vener i frånvaro och närvaro av en extern makroporös polyester tubulär mesh. Genom att förhindra patologisk ombyggnad och IH, mask lade fram bevis för dess potentiella kliniska effektivitet 11

Denna studie 1) införs en modell av ex vivo humana vena ådror perfusion under kontrollerade tryck och skjuvspänning 2) visar att extern makroporös polyesternät minskar IH och ger viktig information om dess potentiella kliniska tillämpning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Etikkommittén vid universitetet i Lausanne godkända experimenten, som överensstämmer med principerna i Helsingforsdeklarationen från 1975, reviderad 1983 för användning av mänskliga vävnader.

1. Human Great saphenusven Harvest

  1. Skaffa överskotts segment av icke-åder humana vena vener från patienter som genomgår nedre extremiteterna bypass operation för ischemi. I operationssalen, desinficera hela benet med en jodlösning och drapera patienten att exponera benet från ljumsken till foten.
  2. Gör en median snitt från ljumsken till knäet (lämnar avbruten huden delen).
  3. Skörda stora saphenusven med en stjälk av omgivande vävnad (no-touch-teknik). Säkra sidogrenar av venerna med 4-0 sidenslipsar. Omedelbart lagra minst 9 cm långa överskotts segment av den större vena saphena, med en yttre diameter på 2,5-4 mm vid 4 ° C i en RPMI-1640 Glutamax medium, kompletterat med 12,5% fetalt kalvserum och föra den till laboratoriet.

2. VVD Design

  1. Montera allmän utrustning som visas i figur 1. Autoklav all utrustning och hålla alla komponenter under sterila förhållanden. Dessutom se till att systemet är vattentätt och inte läcker kemikalier i mediet. Använd polymetakrylat metyl (PMMA-GS) för omslaget. Stål (X5 Cr Ni 18 10) och polyoxymetylen plast (POM) som ven support.
  2. Plan perfusionskammaren till önskad geometri för att medge placeringen av venen och dess anslutning. Se till djupet (eller radien om du använder cylindriska konstruktion) är minst 2,5 cm så det gör minimal böjning och utvidgning av fartyget tillsammans med ständig bevakning av odlingsmedia (Figur 1). Tätning är en viktig fråga och är anledningen rektangulära PMMA-GS konstruktionen används.
  3. Plan venen stöd till önskad geometry. För att undvika ven skarpa böjar eller över buk, tillåter längdjustering genom att skjuta eller dra (skruv kan inte användas för detta ändamål, eftersom venen skulle vridas tillsammans med skruv).
    OBS: En full stålstav ansluten med 2 glidande L-formade bitar som stöder de två ven cylindrar (5 mm diameter för att passa kärlet) och venen (Figur 1B och figur 2) används här.
  4. Plan trycket kolonn, så att den "vilande tryck" appliceras till systemet är: p = 0-10 = hx ρ xg, där p = tryck (N / m 2, Pa) h = höjd av fluid-kolonn (m) ρ = densiteten för vätskan (kg / m 3) och g = gravitationskonstanten (9,81 m / s 2). Design fyra anslutningsledningar, uppifrån och ner: att utöva påtryckning, om utflödet (från venen), inflödet (till ven) och tillåta medelförändringen.
  5. Förbered mediet. Baserat på tidigare studier 5,11-14 väljer RPMI-1640, kompletterat med Glutamax, 12,5% Fetalt kalvserum och 1% antibiotikum-antimykotikum-lösning (10.000 U / ml penicillin G, plus 10 mg / ml streptomycinsulfat, plus 25 mg / ml amfotericin B, plus 0,5 ^ g / ml: gentamycin). Skjuvspänning (SS) ges av SS = 4 μQ / π * r 3 Q är flödeshastigheten (ml / sek), r radien (cm) av venen segmentet och μ är viskositeten perfusionsmediet.
    1. Modulera SS genom att justera viskositeten genom tillsats av 70 kDa dextran. Mät viskositet med en viskosimeter. Här lägger 8% 70 kDa dextran att ställa SS till 9-15 dyn / cm 2.
  6. Ställ Utväxling pump för att inducera ett pulserande cardioid signal av 60 pulser / min och konstant amplitud alstra ett enkelriktat flöde av 150 ± 15 ml / min, oberoende av det tryck som anbringas i systemet och styrs av en dator. Se till att köra mjukvaran integrerar ständigt förvärv och övervakning av tryck, flödeshastighet, puls och signal. Om så önskas, använd en andra pump (ej synkhronized) för framställning av en icke-laminär, turbulent flöde.

3. VVD Montering (Figur 1)

  1. Innan du börjar, se till att all utrustning är steril. Genomföra följande steg inom aseptik i ett laminärt flöde huva.
  2. Placera venen i en petriskål fylld med medium. Använd ett kirurgiskt blad och dela venen i 3 lika stora segment.
  3. Skölj genast ett segment i PBS. Dela upp segment i 3 delar, fixa en i formalin för morfometri. Frys de andra två för kvantitativ transkript (RT-PCR) och protein (western blot)-analys. Anser att dessa segment som en kontroll, icke-perfusion ven.
  4. Använd de 2 återstående segment för perfusion.
    1. Mycket försiktigt injicera medel i venen och fastställa normalflödesriktningen; i närvaro av ventiler venen är omvänd.
    2. Tätning venerna är av yttersta vikt för experimentell framgång. Kontrollera om det läcker genom säkerheter. Fäst eventuella läckor med 6-0 silke suturer.
    3. </ Ol>
    4. Anslut vensegmentet mellan de två metallcylindrar, en ände åt gången (2,3, figur 1). Säkra cylindrarna med Ethibon 3-0 runt fördjupning (Figur 1A och B).
      1. Placera hela venösa segment in i perfusionskammaren tidigare fylld med medium. Upprepa samma procedur för det andra segmentet.
        OBS: Om du inte riktigt täta venen till cylindern kommer att vara en källa till läckage, kräver reintervention, och avsevärt öka risken för infektion och experimentell misslyckande.
    5. För att förstärka (mesh) det andra segmentet, släpper de två cylindrarna (med venen bifogas) från de L-formade stycken (2.3 och Figur 1).
      1. Var försiktig och rör inte venen med några instrument. Skjut mesh först på cylindern sedan på venen. En push / pull trängdes får maskan på venen.
      2. När mask täcker hela ytan av venen säkra jacketed ven till cylindrarna med Ethibon 3-0.
      3. Sätt ihop venen / cylinderförening till den L-formade stödet och överför den till perfusionskammaren, tidigare fylld med medium.
    6. Anslut varje metallcylinder (in-och utflöde) till en Y-splitter använder peroxid behandlade silikonslang med en inre diameter på 3,2 mm.
    7. Anslut utflöde delare till en andra Y-delare med användning av samma typ av rör. Från denna Y-splitter, använd en slang för att mäta perfusion trycket genom båda fartygen. Anslut den andra en tillbaka till kolonnen för att bilda en sluten slinga-system (fig 2).
    8. Inuti kuvösen, använda en lång (en meters längd) röret för att ansluta kolonnen trycket till pumphuvudet.
    9. Fyll i inrättades genom att ansluta pumphuvudet till inflödet Y-splitter med en annan lång längd rör (Figur 1).

    4. Vener Perfusion

    1. Efter VVD monteringen har samarmpleted, fyll kolumnen med medium (ligga under venen utflödeskanalen för att tillåta påfyllning). Lägg mer medel i kolonnen tills systemet är fullt. Flytta hela systemet i inkubatorn vid 37 ± 0,1 ° C med ett pH hålls konstant vid 7,40 ± 0,01 (med hjälp av en CO2 / pH algoritm baserad på Henderson-Hasselbach ekvationen).
    2. Ta med kugghjulspump huvudet utanför inkubatorn och anslut den till kugghjulspumpen enheten. Skruva stavarna för att säkra monteringen.
    3. Slå på pumpeffekt, se till att den är aktiverad på driv programvaran och tillåta 5 min för det medium som skall fördelas lika i varje fack.
    4. För att övervaka trycket, använd en arteriell line-övervakning. Anslut VVD tryckutgång (det motsvarar den arteriella katetern) till tryckomvandlare kopplad till datorn.
      1. Kontrollera att röret är helt fyllda med medium och inte innehåller några bubblor. De-bubblan odlingssystemet genom "arteriell line "röret (figur 2). Var uppmärksam på skärmen och leta efter ett pulserande kardioid signal på 60 pulser / min av konstant amplitud. Vid denna punkt, är den genomsnittliga tryck mellan 0-10 mm Hg. Om trycket är <0 och kolonnen töms successivt leta efter en läcka (ven säkerheter eller otillräcklig tätning mellan venen och röret).
    5. Ställ den minimala tryck till 6 mm Hg under en venös test eller vid 90 mm Hg under en artärtest. Under dessa förhållanden är en luftinsprutnings applicerar önskat tryck till kolonnen och systemet.
    6. Ändra medium var 2 dagar genom användning av röret är ansluten till kolonntrycket. För att förhindra tryckförändringen skador öppnar kolumnpluggen först.

    5. Slutförande av Perfusion

    1. Efter 3 eller 7 dagar av perfusion: vidta VVD ur inkubatorn och demon venerna. Kassera 5 mm proximal och distal ven ändar fäst vid utrustningen. Skär ett centralt, 5 mm tjock rings från den kvarvarande segmentet och fixa i formalin (morfometri). Frys de återstående fragmenten och reducera till pulver för ytterligare molekylära analyser.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Den VVD ger ett värdefullt verktyg för att självständigt bedöma de hemodynamiska krafter på human vena saphena transplantat ombyggnad och IH.

Figur 1 visar perfusionskammaren och venen stöd. I figurerna 1A och B, venen support före (figur 1 A) och efter (Figur 1B) montering, respektive, avbildas. Den består (från toppen till botten) av 1 vanligt rostfritt stål som mäter 9 cm, som fungerar som ett stöd för 2 L-formade bitar som lätt kan glida (från vänster till höger) och ger en tillförlitlig teknik för att justera stödstorleken till venen. Var och en av dessa bitar har en POM-skiva för att passa en stålcylinder (ven-kontakt) fixeras på plats med integrerad skruv (pilspets). Figur 1C-D visar perfusionskammaren enbart (C) och efter insättning av venen stödet (D). På perfusionskammaren är fördjupningar utformade för atthåll venen stöd på plats (överst) och för att undvika kinkning av förbindelseröret kommer in och ut från venen (botten).

Figur 2 visar realtidsbilder (Figur 2A) och en schematisk representation (Figur 2B) av VVD. De perfusionskammare, vener och dess stöd, samt kolumntrycket bibehålls i en kontrollerad miljö (temperatur, CO2 och O2) medan pumpen, tryck injektorn och styrenheter alla står utanför inkubatorn. Figuren illustrerar pump gearing (1) som genererar en pulsad signal styrs av en dator (2), som övervakar hastigheten flöde (3), tryck (4), och styr den minimala diastoliskt tryck (5); två segment av en samma vena saphena är anslutna i parallell med perfusion pump inuti separata perfusionskammare (6a och 6b) placerades i en cellodlingsinkubator.

I fig 3Visar histomorfometrisk analys att yttre förstärkning förhindrar intimal hyperplasi och patologiska media ombyggnad annars observerats efter 7 dagar under högt tryck (arteriell regim, medelvärde = 100 mm Hg) perfusion. I figur 3A, representativa histologiska snitt som färgats för hematoxylin-eosin (HE) avslöjar slemhinnan i lumen med kärnor av endotelceller och kärnorna hos SMC i media skiktet under alla förhållanden. Figurerna 3B-C visar representativa Van Gieson Elastic Lamina ( VGEL) färgade sektioner. I figur 3B är intiman förtjockad (IH) i venerna perfunderade vid högt tryck (medelvärde = 100 mm Hg) under 7 dagar jämfört med kontroll icke-perfunderade vener, ett fenomen som minskade i hög grad i närvaro av ett externt nät. Figur 3C illustrerar det patologiska utåt ombyggnad och media gallring i vener utsätts för 7 dagar Blodtrycks. Detta är till stor del förhindras av den yttre förstärkningen. Furthermore, i figur 3D, Massons trikromfläckning (blå = bindväv, röd = muskel) associerar detta patologiska remodeling med ihållande endast en av de tre muskelskikten och ackumulering av glatta muskelceller i det inre lagret (intima). Den yttre förstärkning bevarar fördelningen av SMC och mediestruktur.

Figur 4 illustrerar en aktuell klinisk tillämpning av den externa nät. Ett illustrativt exempel är extern förstärkning av en aneurysmatisk arteriovenösa fisteln (hemodialys åtkomst). Figur 4A visar ett tidsförlopp representation av venen förstärkning (från toppen till botten). Först framställdes den mask placeras runt en styv slang medan venen ytterkant är fastsatt på en spindel (övre panel). Därefter tillsattes venen dras genom röret tack vare dornen. När venen var på plats, var röret långsamt indragen, lämnar mesh runt venen (upper och mellersta panel). I detta särskilda fall, upprepades proceduren på båda sidor av venerna, och vener segment och mesh förstärkningar monteras av en end-to-end anastomos (nedre panelen). Figur 4B ger en större bild av den arteriovenösa ände till-sida anastomos, vilket visade att den mask lindas runt anastomosen genom att knyta den längs den bakre väggen av artären.

Figur 1
Figur 1. ven stöd och perfusionskammaren. A. ven stödet består av ett vanligt rör, 2 L-formade bitar, skivor och cylindrar (bilda toppen till botten). B. ven stöd monteras gång. C. Utsikt över perfusionskammaren. D. perfusion Kammaren är konstruerad för att hålla på plats venen stöd och låter sin connectjon till venen och anslutande rör.

Figur 2
Figur 2. ex vivo perfusionssystem. A. Den helt ihop vVD i cellkultur inkubator. B. Schematisk. 1) pumpen genererar en pulserande kardioid våg; 2) den dator som styr det tryck, flöde (typ, hastighet och amplitud); 3) flödesmätare; 4) tryckgivaren - arteriell linje; 5) tryck injektor; 6) två segment av ett mycket samma saphenusven är perfusion utan (6a) eller med extern armeringsnät (6b).

Figur 3
Figur 3 Den yttre förstärkning förhindrar intimahyperplasi. Ett. Representativa histologiska snitt färgades med hematoxylin-eosin (HE). Bar representerar 50 um. BC. Representativa histologiska snitt som färgats för elastin (VGEL). l = lumen m = media, IH = intimahyperplasi. Bar representerar 50 um. D. Representativa histologiska snitt färgade med Masson trikrom. Bar representerar 50 pm.

Figur 4
Figur 4 Yttre förstärkning av en aneurysmal fistel. A. Tidskurs fotografier av ven förstärkning (uppifrån och ner). B. Större bild av den arteriovenösa end-to-side anastomos.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denna studie avslöjar en ex vivo ven perfusionssystem (VVD) för att utföra omfattande hemodynamiska studier i mänskliga ådror. Detta system möjliggör vena ådror perfusion under definierade hemodynamiska parametrar i avsaknad av försvårande inflammatoriska och tillväxtfaktorer frigörs av cirkulerande celler in vivo. Således ger det en bättre förståelse av de underliggande involverade i kontrollen av IH i humana vener transplantat 5,11,12,15.

Reproducerbara och kvantifierbara hemodynamiska störningar är begränsade in vivo. Flera komplicerade murina mikro förfaranden har beskrivits. Med hjälp av en förbi isograft modell via en mellanliggande vena cava från en donator mus i den högra gemensamma halspulsådern och den ytterligare skapa ett utflöde filial ligation, mitten transplantat eller vanlig carotisstenos, flöde och SS minskade akut och förbättrad IH 3. Passiv kontra aktiv remodeling kan vidare vara interrogated hjälp av en mid-focal kontra distala gemensamma carotisstenos 16. I stora djur (får, gris och babian), bypass ympkvistar är tekniskt enklare och utgör en attraktiv metod för att testa prekliniska humana stora enheter som det nät som används i denna studie 8-10. Men dess kostnader och bristen på validerade molekylära verktyg begränsa användningen av dessa strategier. Slutligen dessa flödes manipulationer ständigt förändra väggspänning och misslyckas med att förhöra en enda beståndsdel. Dessutom intrikata relationer mellan hemodynamik och immun och endokrina system ytterligare begränsa analysen av en enskild aktör.

Flera problem uppstår med användningen av VVD. 1) Låg kvalitet bakteriell kontamination ofta tillsammans mänsklig ven skörden och ex vivo frånvaro av cirkulerande celler står som en viktig orsak till infektion. Detta är främst förhindras genom handtvätt bitarna för sig då autoklavering allt material föreanvända. Aggregatet dessutom utföras på mindre än 90 minuter och under rigorösa aseptik. 2) Tätning som tål upprepad sterilisering. Av denna anledning var en rektangulär PMMA-GS konstruktion användas, undvika användning av lederna och begränsa deformation. 3) SS och väggspänning beräknas vid definierade tidpunkter, baserad på kärllumen radie (histologi), flödet och viskositet är konstant. Integrationen av en longitudinell avbildning (högupplöst kamera, laser eller Doppler) som kontinuerligt övervakar ven diameter och / eller flöde kommer att ge mer detaljerad information om lokala flödesvariationer och tillåta cykliska belastningsberäkningar. 4) De två parallella ven segment kan ha okontrollerade skillnader i deras vägg efterlevnad och radie. Därför vi bara jämföra segment från en samma anda och antar att under samma tryck, är flödet liknande mönster i båda segmenten.

I denna studie har vener in till pulserande laminärt flöde; Men 50% of intima hyperplastiska skador inträffar i end-to-side perianastomotic områden i ven, där laminärt flöde störs. Turbulenta betingelser kan modelleras med tillägg av en andra pump, icke-synkroniserad med den första pumpen. Framtida studier kommer att utföras för att specifikt utvärdera effekterna av störningar laminärt flöde på IH och potentiellt fördelaktiga effekten av armeringsnät. Intressant nog tillåter den flexibla strukturen av maskomkrets omslag vid anastomos platser, som redan utförts för att reparera aneurysmatisk fistlar 17 (Figur 4). Således kunde maskorna visa sig användbart för att begränsa perianastomotic dilatation, störningar laminärt flöde och därmed minska IH på anastomosen webbplatser. Detta kan vara särskilt fördelaktigt i distal bypass-kirurgi, ofta påverkas av obalans diameter mellan venen och skenbens eller peroneal artär.

Sammanfattningsvis setup visas här tillåter parallell perfusion av mänsklig veins, under identiska hemodynamiska förhållanden. Dessa data visar att användning av en extern makroporös tubulär polyesternät är en effektiv metod för att begränsa utvecklingen av IH i ventransplantat insatta i en arteriell miljö 11. Detta system kan dra flera forskningsområden. Speciellt framkommer som ett kraftfullt verktyg för att utföra prekliniska studier som testar genomförbarheten och effektiviteten av olika metoder för att minska IH i mänskligt material, och är ett värdefullt tillskott till in vivo djurmodeller. Andra protes stöd eller maskor belagda med farmaceutiska medel kommer att utvärderas med hjälp av denna metod 6-10. Dessutom kunde en envision att testa lokalt tillämpade farmakologiska molekyler att förhindra IH i human vävnad, enligt nära fysiologiskt tillstånd. Genterapi insatser är också att uppnå, överföra en vensegmentet att överuttrycker eller tystnad mål gener av intresse.

Sammanfattningsvis kommer vårt system att öka vår unelse av den hemodynamiska bidrag till humana venen transplantatsjukdomar. Det ger en innovativ plattform för att testa nya behandlingsstrategier och kan uppstå som en "bänk för att vid sidan av översättningsverktyg."

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har ingenting att lämna ut.

Acknowledgments

Detta arbete har finansierats med bidrag från SNF [31003A-138.528], den Octav och Marcella Botnar Foundation, Novartis Foundation och Emma Muschamp Foundation. Vi tackar Martine Lambelet, och Jean-Christophe Stehle för deras utmärkta teknisk hjälp.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
RPMI 1640 - Glutamax Life Technologies 61870-010
Penicilline/Streptomycine/Fungizone Bioconcept 4-02F00-H
Dextran from Leuconostoc spp. 500 g Sigma-Aldrich 31390
Tampon PBS CHUV pH 7.1-7.3 1 L Laboratorium und Grosse Apotheke Dr. G. Bichsel AG 100 0 324 00
Cryosectionning embedding medium - Tissue-Tek OCT Compound Fisher Scientific 14-373-65
Silicon Tubing (Peroxide) L/S 16 (96400-16 ) - 7.5 m Idex Health & Science GMBH MF0037ST
Y-splitter  Idex Health & Science GMBH Y-connector
35 mm Culture dish Sigma-Aldrich CLS430165-100EA
15 ml Falcon tube BD Bioscence 352096
50 ml Falcon tube BD Bioscence 352098
Gearing pump - Reglo-Z Idex Health & Science GMBH SM 895   App-Nr 03736-00194
Pump Head Idex Health & Science GMBH MI0008 
Monitoring Kit TRANSPAC IV icumedical 011-0J736-01
20 ml Syringes B. Braun Medical SA 4612041-02
Etibon 3-0 FS-2 Ethicon- Johnson&Johnson EH7346H
Mesh ProVena 6-8mm B. Braun Medical SA 1105012-14
NaCl: Sodium chloride solution perfusion 0.9% (100 ml) B. Braun Medical SA 534534
Masterflex L/S Standard Drive Cole-Parmer Instrument Co 7521-10
Acquisition card National Instruments PCI-6024 E
Flowmeter module Transonic Systems Inc. TS410 and T402
Stopcock with 3-ways BD Connexta Luerlock 394600
Millex Filter Milian SE2M229I04

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Sal Go, A., et al. Executive summary: heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the american heart association. Circulation. 129, 399-410 (2014).
  2. Sal Conte, M., et al. Results of PREVENT III: a multicenter, randomized trial of edifoligide for the prevention of vein graft failure in lower extremity bypass surgery. Journal of Vascular Surgery. 43, 742-751 (2006).
  3. Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Bai, Y., Ozaki, C. K. Mouse vein graft hemodynamic manipulations to enhance experimental utility. The American Journal of Pathology. 178, 2910-2919 (2011).
  4. Davies, M. G., Hagen, P. O. Reprinted article "Pathophysiology of vein graft failure: a review". European journal of vascular and endovascular surgery : the official journal of the European Society for Vascular Surgery. 42, Suppl 1. S19-S29 (2011).
  5. Berard, X., et al. Role of hemodynamic forces in the ex vivo arterialization of human saphenous veins. Journal of Vascular Surgery. 57, 1371-1382 (2013).
  6. Vijayan, V., et al. Long-term reduction of medial and intimal thickening in porcine saphenous vein grafts with a polyglactin biodegradable external sheath. Journal of Vascular Surgery. 40, 1011-1019 (2004).
  7. Jeremy, J. Y., et al. On the biology of saphenous vein grafts fitted with external synthetic sheaths and stents. Biomaterials. 28, 895-908 (2007).
  8. Zilla, P., et al. Constrictive external nitinol meshes inhibit vein graft intimal hyperplasia in nonhuman primates. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136, 717-725 (2008).
  9. Zilla, P., et al. Utilization of shape memory in external vein-graft meshes allows extreme diameter constriction for suppressing intimal hyperplasia: a non-human primate study. Journal of Vascular Surgery. 49, 1532-1542 (2009).
  10. Yeoman, M. S., et al. A constitutive model for the warp-weft coupled non-linear behavior of knitted biomedical textiles. Biomaterials. 31, 8484-8493 (2010).
  11. Longchamp, A., et al. The use of external mesh reinforcement to reduce intimal hyperplasia and preserve the structure of human saphenous veins. Biomaterials. 35, 2588-2599 (2014).
  12. Saucy, F., et al. Ex vivo pulsatile perfusion of human saphenous veins induces intimal hyperplasia and increased levels of the plasminogen activator inhibitor 1. European Surgical Research. Europaische Chirurgische Forschung. Recherches Chirurgicales Europeennes. 45, 50-59 (2010).
  13. Dubuis, C., et al. Atorvastatin-loaded hydrogel affects the smooth muscle cells of human veins. The Journal of pharmacology and experimental. 347, 574-581 (2013).
  14. Deglise, S., et al. Increased connexin43 expression in human saphenous veins in culture is associated with intimal hyperplasia. Journal of Vascular Surgery. 41, 1043-1052 (2005).
  15. Muto, A., Model, L., Ziegler, K., Eghbalieh, S. D., Dardik, A. Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies. Circulation Journal : Official Journal of the Japanese Circulation Society. 74, 1501-1512 (2010).
  16. Tao, M., et al. A simplified murine intimal hyperplasia model founded on a focal carotid stenosis. The American Journal of Pathology. 182, 277-287 (2013).
  17. Berard, X., et al. Salvage treatment for venous aneurysm complicating vascular access arteriovenous fistula: use of an exoprosthesis to reinforce the vein after aneurysmorrhaphy. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery : the Official Journal of the European Society for Vascular Surgery. 40, 100-106 (2010).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics