Vurdering av Livskraftig of Human Fat Injeksjon i Nude Mus med Micro-Datatomografiscanning

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Atashroo, D. A., Paik, K. J., Chung, M. T., McArdle, A., Senarath-Yapa, K., Zielins, E. R., Tevlin, R., Duldulao, C. R., Walmsley, G. G., Wearda, T., Marecic, O., Longaker, M. T., Wan, D. C. Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography. J. Vis. Exp. (95), e52217, doi:10.3791/52217 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Lipotransfer er et viktig verktøy i kirurgens armamentarium for behandling av bløtvev underskudd på hele kroppen. Fett er den ideelle mykvevfyller som det er lett tilgjengelig, lett skaffes, billig, og iboende biokompatibelt. 1 Men til tross for sin voksende popularitet, er fett pode hemmet av uforutsigbare resultater og variable graft overlevelse, med publiserte oppbevaring priser som spenner alt fra 10 -80%. 1-3

For å lette undersøkelser på fett pode, har vi derfor utviklet en dyremodell som gjør det mulig for sanntids analyse av injisert fett volum oppbevaring. I korthet blir et lite kutt laget i hodebunnen til en CD-en naken mus, og 200 til 400 ul av bearbeidet lipoaspirate plasseres over skallen. Hodebunnen er valgt som mottaker området på grunn av sin manglende mors underhudsfett, og på grunn av den utmerkede bakgrunn kontrast levert av calvarium, som hjelpemidler ianalyseprosessen. Micro-computertomografi (micro-CT) brukes til å skanne pode ved baseline og deretter hver andre uke. CT-bilder er rekonstruert, og et bildebehandlingsprogrammer brukes til å kvantifisere pode volumer.

Tradisjonelt, teknikker vurdere fett pode volum har nødvendig euthanizing studien dyr å gi bare en enkelt vurdering av pode vekt og volum av fysisk måling ex vivo. Biokjemiske og histologiske sammenligninger har likeledes nødvendig studien dyr som skal avlives. Dette er beskrevet avbildningsteknikk tilbyr fordelen av å visualisere og objektivt kvantifisere volum ved flere tidspunkter etter første pode uten å måtte ofre studien dyr. Teknikken er begrenset av størrelsen av graftet i stand til å bli injisert som større grafts risiko hud og fett nekrose. Denne metoden har verktøyet for alle studier som evaluerte fett pode levedyktighet og volum oppbevaring. Den er spesielt godt egnet til providing en visuell representasjon av fett grafts og følgende endringer i volum over tid.

Protocol

MERK: Eksperimentelle protokoller og pasientsamtykkeerklæringer for å få fett ble gjennomgått og godkjent av Stanford University Institutional Review Board (Protocol # 2188). Alle dyr prosedyrer ble godkjent av Stanford Administrative Panel on Laboratory Animal Care (APLAC) under protokoll # 9999. Alle forsøkene ble gjennomført med streng overholdelse av dyr sikkerhet og humane retningslinjer omsorg.

1. Fat Høsting

  1. Bruke Coleman prosedyre 17-19, skaffe menneskelig fettvev fra magen, flanke, og / eller lår regioner av friske kvinnelige pasienter som gjennomgår elektiv fettsuging.
  2. Å behandle lipoaspirate for pode, begynner ved å la fettet til å bosette seg i 30 min.
  3. Lipoaspirate legger seg vanligvis inn i tre lag, med olje på toppen, fett i midten, og blod ved bunnen. Aspirer og kast den øverste oljelaget og bunn blod lag.
  4. Å fjerne eventuelle gjenværende tumesc videreent fluid eller celleavfall, sentrifuger fettet i 5 min ved 350 x g og 4 ° C, og suge den nedre vandige lag.
  5. Beregne mengden av fett som er nødvendig for poding, slik at for 20% leveringsfeil, og å overføre det ønskede volum av fett til 50 ml konisk (e). Multipliserer 400 med antall mus i studien for å oppnå mikroliter av fett som er nødvendig for poding.
  6. På dette punktet, hvis du utfører Cell Assisted Lipotransfer 20,21, sted volum av fett for pode på is. Deretter høster adipose-avledede stromale celler (ASCs) fra den gjenværende fett ved hjelp av standard teknikk som er beskrevet av zuk et al 22.

2. Fat Negl

  1. Få kvinnelige, homozygot CD-en naken mus for eksperimentell studie. Velg mus mellom 8-12 uker gammel.
  2. For å indusere anestesi, sted mus i en knockdown boks med 2,5% isofluran / oksygen-blanding på 2 l / min i ca 10 min. Vær oppmerksom på at anbefalte isoflurane dose varierer med musen belastning.
  3. Når respirasjon musen har avtatt, bekrefter tilstrekkelig sedasjon med en tå klype. Påfør veterinær smøre oftalmisk salve til begge øynene av musen.
  4. Hvis musen ikke vike i respons til tå klype, bekrefter dette en tilstrekkelig plan av anestesi. Plasser musen nese inn i en nosecone levere 2,5% isofluran / oksygen blanding på 1-2 l / min. Hvis musen trekkes fra tå klype, tilbake til knockdown boksen og retest etter 5 min.
  5. Sett opp sterile feltet under musen og deretter sterilisere hodebunnen med 2,5% povidonjodid etterfulgt av 70% etanol løsning. Gjenta to ganger til.
  6. Plasser operasjonsduker over musen og være forsiktig med å opprettholde sterile feltet. Sterile instrumenter, hansker og personlig verneutstyr skal brukes til enhver tid.
  7. Hvis fett volum å bli podet ble tidligere plassert på is, la fett å først justere til RT før levering.
  8. Returlast en 1 ml luer-lock sprøyte med 1 mlfett.
  9. Koble en 14 G, 8 cm lang fett pode kanyle til enden av sprøyten.
  10. Prime system ved å trykke inn sprøytestempelet til mellom 200 og 400 mL av fett igjen i sprøyta. Mens du trykker på sprøytestempelet bekrefte at kanylen er helt fylt med fett ved å observere fett avslutter distal kanyle hullet.
  11. Ved hjelp av fine tang, løfter rygghuden i midtlinjen liggende hale-mest aspektet av skallen. Gjør en 1,5 mm kutt i huden ved hjelp av gode saks.
  12. Plasser en enkelt 6-0 nylon sutur gjennom midten av kutt som senere vil bli brukt til å bringe sårkantene sammen etter poding blir utført. Ikke bind sutur.
  13. Skape en subkutan lomme over skallen ved å sette inn en kanyle gjennom huden snitt og som passerer kanylen frem og tilbake i et vifteformet mønster over skallen for å frigi eventuelle bindevev vedlegg til den overliggende hud.
  14. Når lommen er opprettet, plasserer du cannula i midtlinjen av musen direkte over skallen til spissen som ligger på den rostrale rste del av lommen, som bør være like bak en linje trukket mellom øynene. (Figur 1A)
  15. Sakte injisere fett i en retrograd mote, fremme stempelet mens du trekker kanylen tilbake. Bruk pinsett, ta sårkantene sammen og løfte dem opp til å holde noe fett fra å lekke ut av lommen.
  16. Knyt sutur som tidligere ble plassert, og pass på at den første knuten ligger lett mot huden. Bind tre mer kvadratiske knop og kutte sutur med en 3 mm hale. (Figur 1B)
  17. Bekreft med visualisering og manuell palpasjon at lommen ikke er overfylt og huden overliggende lommen er ikke anspent. Hvis lommen har blitt overfylt, kutt sutur og fjerne alt fett fra i lommen. Vask lommen ut med fosfat-bufret saltvann (PBS) pH 7,4 og re-injisere et mindre volum av fett.
  18. Fjerne mus fra ennesthesia og sted på ryggen eller siden i et rent bur av seg selv. Overvåke dyret for regelmessig pusting, normale bevegelser, fravær av blødning, og tegn på smerte eller ubehag. Administrere buprenorfin 0,1 mg / kg subkutant hver 6. time i opptil 48 timer hvis dyret er i smerte.
  19. Sørge for at dyret har våknet opp tilstrekkelig til å opprettholde sternum recumbency før du forlater den. Ikke plasser dyr inn i et bur med andre dyr før det er fullstendig restituert.
  20. Etter 4 timer, sørge for at dyret er i stand til å spise og drikke, flytte og puste normalt og at det ikke er blødning fra operasjonsstedet. Returnere det til dyret omsorg anlegget.

3. Micro-CT

  1. Scan mus for baseline volumet ved postoperativ dag 3, og deretter gjenta skanninger ved postoperative uker 2, 4, 6 og 8.
  2. Når bildebehandling musene på hvert tidspunkt, følger pre- og post-prosessuelle sedasjon og dyr omsorg retningslinjer som er skissert tidligere i STeps 2,2-2,4 og 02.17 til 02.19.
  3. Utføre søk på en mikro-CT-skanner med en rekonstruksjon voxel størrelse på 100 mikrometer eller bedre.
  4. Med en topp X-ray kilovoltage av 80 kVp og en anodestrøm på 450 uA, administrere en rasjon dose på omtrent fem centiGy under en 9 min skanning til hver mus. Vær oppmerksom på disse verdiene variere avhengig av skanne protokollen.
  5. Før gjennomføring av den første skanningen, kalibrere mikro-CT med en avbildning fantom som skiller mellom luft, vann og bein intensitet.
  6. Plassere fire mus inn skanneren i ventral stilling med to mus på toppen og to på bunnen. En skanning seng kan lett bygges ved bruk av 60 ml sprøyter for å holde musekroppen og 10 ml sprøyter som nese kjegler. 23
  7. Oppretthold mus ende under anestesi med en 2,5% isofluran / oksygenblanding ved 1-2 l pr min.
  8. Bekreft med speider bilde som hele skallen av musen, fra nese til første halsvirvelen, og fra toppen av skallen til bunnen av skull, skal avbildes.

4. Micro-CT Analyse

  1. Åpne rekonstruerte bilder med en mikro-CT bildebehandling analyse programvare som tillater etablering av regioner av interesse (ROI-er) ved å velge lydelementer som bruker terskler for piksel intensitet. Programvaren tillater også etablering av 3D overflater gjennom interpolering av utvalgte voxel, og for volumanalyse.
  2. Start med å laste de rekonstruerte CT-bilder i to-dimensjonale (2D) koronal aksial, og sagittal utsikt. (Figur 2A)
  3. Bruke aksial skive som en guide, navigere til sagittal skive som tilsvarer den venstre mest aspektet av fett pode. Velge en øvre og lavere terskel for pikselintensiteten som fanger opp alle voksler som tilsvarer fett pode, men som utelukker det omgivende vev og bein. (Figur 2B)
  4. Definere en ROI i sagittal syn som tilsvarer fett pode å bruke tidligere definerte pikselintensitet terskler. REPEAT denne framgangsmåten hver femte sagittal skive, navigere til høyre mest aspektet av pode er nådd. (Figur 2C)
  5. Interpolere utvalgte voxel fra alle 2D ROI er i en enkelt, kombinert 3D ROI. (Figur 2D)
  6. Rekord ROI volum beregnes av programvare.
  7. Gjengi 3D isosurface å visualisere den endelige fett pode volum. (2E)
  8. I påfølgende analyser, sørg for å holde piksel intensitet maksimums- og minimumsterskelverdier de samme som brukes til baseline analyse.

5. Fat Harvest-

  1. Etter mus har blitt skannet for uke 8 24,25 tidspunkt, bedøve musene som tidligere beskrevet ovenfor i trinn 2,2-2,4 og 02.17 til 02.19.
  2. Etter APLAC retningslinjer, avlive mus ved å skille sine spinal kolonner.
  3. Plasser musen i operative feltet. Ved hjelp tenotomy saks, åpne forsiktig lommen og dissekere than overliggende hud og bindevev vedlegg fra fett pode.
  4. På dette punkt, kan det bidra til å skjære en oppdatering av den overliggende rygghuden for å hjelpe til utvinning av transplantatet. (Figur 3A)
  5. Lett opprettholde trekkraft på pode med pinsett og slå pode fra side til side for å visualisere følgende punkter av spenning som må frigjøres med saks.
  6. Holde så nær transplantatet som mulig når excising å minimalisere bindevevet tatt med transplantatet. (Figur 3B)
  7. Etter excising pode, måle masse på en tarerte skala som er nøyaktig til minst 0,01 gram.
  8. Beregn volum av fettet transplantat ved hjelp av den målte masseverdi og den gjennomsnittlige tetthet av humant fett (0,9 g / ml) som en konverteringsfrekvens.
  9. Sammenligne beregnet volum av fett pode som oppnås ved hjelp av mikro-CT.
  10. Fat grafts kan bli behandlet for histologi eller videre analyse ved behov.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Fat grafts gradvis redusert i volum i løpet av studiet, noe som resulterer i 62.2% gjennomsnittlig overlevelse ved uke 8. (Figur 4A) 24 Ved ferdigstillelse av uke 8 scan ble hver fett pode ut i ett stykke. En Wilcoxan rank sum test ble brukt for å sammenligne forskjellen mellom volum målinger av fett grafts innhentet av enten mikro-CT eller beregnet fra fysisk masse. Ingen signifikant forskjell ble funnet mellom disse to metoder (tosidig p-verdi = 0,9362). (Figur 4B)

Med fem centiGy per scan og fem skanne tidspunkter, fikk hver mus ikke mer enn totalt 25 centiGy i løpet av studien. I samsvar med dette, er ingen av musene viste noen tegn på brutto kutane stråleskader.

Figur 1
Figur 1. (A) (B) naken mus ved fullført fett pode, med en enkelt nylon sutur brukes til å bringe såret kantene sammen. Lommen har blitt fylt, men er ikke anspent.

Figur 2
Figur 2. (A) Den rekonstruerte bilder vises først i aksial, koronal og sagittal utsikt. (B) Bruke aksialprojeksjon som en guide for å navigere til venstre mest aspektet av pode på sagittal visning. Innstilling av en terskelverdi for pikselintensiteten slik at alle vokslene velges innenfor terskelområdet vil representere fettvev, og dermed muliggjøre avgrensning av fettet pode volum. (C) ROI er definert i sagittal vis begynner ved den venstre del av transplantatet, og fortsatte noensinney femte skive beveger seg til den andre enden av graftet. (D) Alle valgte voksler fra 2D-ROI er interpolert i en enkelt 3D ROI. (E) en tre-dimensjonal overflate ble laget ved hjelp av kubikk-spline interpolasjon for å visualisere det totale fett pode volumer .

Figur 3
Figur 3. (A) Fat pode før explantation, med rygg flekk på huden fjernet. (B) Fat pode etter explantation.

Figur 4
Figur 4. (A) mikro-CT volumetrisk analyse viste gradvis tap av fett pode volum i løpet av åtte uker. (B) Slutt fett pode volum, målt ved mikro-CT, samsvarer nært til volumer beregnet fra massene av eksplantert fett podes. Den gjennomsnittlige tetthet av humant fett (0,9 g / ml) ble anvendt som en konverteringsraten.

Tabell 1
Tabell 1. Beregnet Micro-CT Volume vs. faktisk målte Fat Volume 24

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Frem til dette punktet har de fleste forskere støttet seg på ikke-bildediagnostikk for å kvantifisere den langsiktige overlevelsen av fett grafts, men disse metodene krever offer av studien dyret og gi bare en enkelt måling. 3,10-12 Vår studie representerer en forbedret analysemetode som gjør det mulig mål, sanntids kvantifisering av fett transplantatoverlevelse i en musemodell.

Kritisk i denne prosess er å sikre at tilstrekkelig immunkompromitterte mus brukes for undersøkelsen, da dette forhindrer at transplantatawisning som ville oppstå hvis mus med intakt immunsystem blir brukt. Bevare fett integritet er kritisk under innhøstingen, foredling, og plasserings faser av poding. I samsvar med tradisjonelt aksepterte standarder, bør fett for poding oppnås ved suging assistert figurforming (SAL). Under plassering, bør fett injiseres i en jevn strømningshastighet raskere enn 0,5 ml / sek. En 14 gauge kanyle er foretrukket for poding ina mus, men større diameter kanyler kan anvendes uten noen skade på fett. Mindre kanyler og nåler-særlig de smalere enn 16 gauge-er motet under plassering som de kan føre til at fett til sammenbrudd på grunn av økt skjærspenning. Selv om vi beskrive vår foretrukne teknikk for å behandle ovenfor, hvilken som helst kombinasjon av sedimentering, sentrifugering og / eller filtrering, kan anvendes så lenge som de olje- og blod lag er tilstrekkelig separert fra fettet før poding.

Fat grafts bør være minst 200 ul i størrelse for å minimere variasjoner i resultatene på grunn av den inkonsistente arten av fett poding. Større grafts opp til 400 ul i størrelse kan anvendes, men over dette volum, kan nedsatt vaskulær tilførsel og overdreven stramming av huden resultere i fett og hud-nekrose. Til slutt vil maksimal fett pode størrelse bestemmes ved overflatearealet og volumet av lommen. For å øke volumet av en pode som trygt kan leveres, pocket kan utvides med mer omfattende disseksjon. Dette kan imidlertid plassere fett utover grensene til toppen av skallen, som vil gjøre kontrasten mellom pode og omkringliggende vev mindre klar. Derfor vil følgende voksel seleksjons bli vanskeligere.

Ved innledende snitt i huden er liten nok, kan en sutur ikke være nødvendig så lenge fettet forblir inneholdt og blir ikke sett lekker ut av lommen. Hvis en sutur er plassert, må man passe på ikke å knytte den første knute for hardt, ellers hudskader kan forekomme. En ikke-absorberbare monofilament-sutur slik som nylon er å foretrekke, da den begrenser den inflammatoriske reaksjonen, og er mindre tilbøyelige til å huse infeksjon. Re-epitelialisering av snittet vil skje innen 24 til 48 timer postoperativt, og suturen kan fjernes på dette tidspunkt. Absorberbare og flettede suturer bør ikke brukes. Huden bør alltid håndteres med den minste kraften er nødvendig, og kirurgen bør ta vare ikke å knuse hudenmens du holder opp sårkantene.

Avhengig av undersøkerne 'bildeanalyseprogramvare, kan det nøyaktige forholdet mellom pikselintensiteten og tettheten av vev variere. Etterforskerne skal velge pixel intensitet terskler for å få en maksimal og minimal utvalg som mest presist skiller fett pode fra omkringliggende vev. De samme maksimum og minimum terskelverdier bør brukes under alle volum analyser for å opprettholde konsistens.

Det finnes flere metoder for å velge pode volum når piksel intensitet grenseverdier er satt. Selv om vi finner maleri med en pensel verktøy i sagittal visning beste i våre hender, til andre voxel seleksjonsmetoder skape en ROI kan brukes slik som å tegne med spline verktøy eller maleri i aksial visning. Det foretrekkes at en enkelt person utfører alt volum analyserer så regelmessig som mulig for å redusere målefeil.

Den ikke-invasiv natur av denne metoden, og den sanntids visualisering av pode evolusjon gi betydelige fordeler i forhold til tradisjonelle teknikker. Imidlertid er denne teknikken begrenset i sin evne til å identifisere levedyktighet og helse av rest grafts. Videre kan det ikke demonstrere relativ revaskularisering av grafts. Selv om endringer i utseende og pode tetthet kan hint på fett nekrose, infeksjon, cyste formasjon, eller LNG, er det vanskelig å trekke eksakte konklusjoner fra mikro-CT alene.

Vi håper denne teknikken vil fungere som et fundament som fremtidige studier kan gjennomføres for å bedre forstå de utløsende faktorene i fett pode overlevelse og tap. Variasjoner av denne type kan klargjøre rollen som stamceller, vekstfaktorer, cytokiner, gener, og celleoverflatemarkører spille i den endelige bevaring av fett pode volum. Med denne forbedrede verktøy for å teste kontrast hypoteser, ser vi frem til en bedre forståelse av fett overføring som omdannederms en lunefull teknikk for behandling av bløtvev underskudd inn i en mer forutsigbar en.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Denne studien ble støttet av Oak Foundation, Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine, og National Institute of Health, Grants NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683, og NIHU01HL099776 til MTLDCW ble støttet av ACS Franklin H. Martin Fakultet Stipendiat, den Hagey laboratorium for Pediatric Regenerative Medicine, og Stanford University Child Health Research Institute fakultetet Scholar Award. Mikro-CT ble utført ved Stanford Center for Innovation i In Vivo Imaging.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
SAL lipoaspirate
Centrifuge Beckman Coulter, Inc., Pasadena, CA
50 ml conical tubes BD Biosciences, San Jose, CA
CD-1 nude mice (Crl:CD1-Foxn1nu) Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA
Isoflurane Henry Schein, Dublin, OH
2.5% Betadine Purdue Pharma, L.P., Stamford, CT
70% Ethanol solution  Gold Shield, Hayward, CA
1cc luer-lock syringe BD Biosciences, San Jose, CA
14 gauge cannula Shippert Medical, Centennial, CO
Forceps Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
Tenotomy scissors Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
6-0 nylon suture Ethicon, Blue Ash, OH
Phosphate buffered saline Gibco, Carlsbad, CA
micro-CT scanner  Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Phantom  TriFoil Imaging, Northridge, CA
Imaging analysis software IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Scale  Mettler-Toledo International, Inc., Columbus, OH

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130, (1), 249-258 (2012).
  2. Kaufman, M. R., et al. Autologous fat transfer national consensus survey: trends in techniques for harvest, preparation, and application, and perception of short- and long-term results. Plast Reconstr Surg. 119, (1), 323-331 (2007).
  3. Smith, P., et al. Autologous human fat grafting: effect of harvesting and preparation techniques on adipocyte graft survival. Plast Reconstr Surg. 117, (6), 1836-1844 (2006).
  4. Eppley, B. L., Dadvand, B. Injectable soft-tissue fillers: clinical overview. Plast Reconstr Surg. 118, (4), 98e-106e (2006).
  5. Yarborough, J. M. The treatment of soft tissue defects with injectable collagen. Am J Med Sci. 290, (1), 28-31 (1985).
  6. Baumann, D. P., Butler, C. E. Soft tissue coverage in abdominal wall reconstruction. Surg Clin North Am. 93, (5), 1199-1209 (2013).
  7. Tukiainen, E. Chest wall reconstruction after oncological resections. Scand J Surg. 102, (1), 9-13 (2013).
  8. Zan, T., et al. Surgical treatment of facial soft-tissue deformities in postburn patients: a proposed classification based on a retrospective study. Plast Reconstr Surg. 132, (6), 1001e-1014e (2013).
  9. Bucky, L. P., Percec, I. The science of autologous fat grafting: views on current and future approaches to neoadipogenesis. Aesthet Surg J. 28, (3), 313-321 (2008).
  10. Lee, J. H., et al. The effect of pressure and shear on autologous fat grafting. Plast Reconstr Surg. 131, (5), 1125-1136 (2013).
  11. Kirkham, J. C., et al. The impact of liposuction cannula size on adipocyte viability. Ann Plast Surg. 69, (4), 479-481 (2012).
  12. Medina, M. A., et al. 3rd et al. Polymer therapy: a novel treatment to improve fat graft viability. Plast Reconstr Surg. 127, (6), 2270-2282 (2011).
  13. Horl, H. W., Feller, A. M., Biemer, E. Technique for liposuction fat reimplantation and long-term volume evaluation by magnetic resonance imaging. Ann Plast Surg. 26, (3), 248-258 (1991).
  14. Har-Shai, Y., Lindenbaum, E. S., Gamliel-Lazarovich, A., Beach, D., Hirshowitz, B. An integrated approach for increasing the survival of autologous fat grafts in the treatment of contour defects. Plast Reconstr Surg. 104, (4), 945-954 (1999).
  15. Fontdevila, J., et al. Assessing the long-term viability of facial fat grafts: an objective measure using computed tomography. Aesthet Surg J. 28, (4), 380-386 (2008).
  16. Meier, J. D., Glasgold, R. A., Glasgold, M. J. Autologous fat grafting: long-term evidence of its efficacy in midfacial rejuvenation. Arch Facial Plast Surg. 11, (1), 24-28 (2009).
  17. Coleman, S. R. Structural fat grafts: the ideal filler. Clin Plast Surg. 28, (1), 111-119 (2001).
  18. Coleman, S. R. Structural fat grafting: more than a permanent filler. Plast Reconstr Surg. 118, (3 Suppl), 108S-120S (2006).
  19. Pu, L. L., Coleman, S. R., Cui, X., Ferguson, R. E., Vasconez, H. C. Autologous fat grafts harvested and refined by the Coleman technique: a comparative study. Plast Reconstr Surg. 122, (3), 932-937 (2008).
  20. Matsumoto, D., et al. Cell-assisted lipotransfer: supportive use of human adipose-derived cells for soft tissue augmentation with lipoinjection. Tissue Eng. 12, (12), 3375-3382 (2006).
  21. Yoshimura, K., Suga, H., Eto, H. Adipose-derived stem/progenitor cells: roles in adipose tissue remodeling and potential use for soft tissue augmentation. Regen Med. 4, (2), 265-273 (2009).
  22. Zuk, P. A., et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Eng. 7, (2), 211-228 (2001).
  23. Habte, F., et al. Impact of a multiple mice holder on quantitation of high-throughput MicroPET imaging with and without Ct attenuation correction. Mol Imaging Biol. 15, (5), 569-575 (2013).
  24. Chung, M. T., et al. Micro-computed tomography evaluation of human fat grafts in nude mice. Tissue Eng Part C Methods. 19, (3), 227-232 (2013).
  25. Thanik, V. D., et al. A murine model for studying diffusely injected human fat. Plast Reconstr Surg. 124, (1), 74-81 (2009).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics