Eenvoudig en Computer-assisted Olfactorische testen voor Muizen

Behavior

Your institution must subscribe to JoVE's Behavior section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Brai, E., Alberi, L. Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice. J. Vis. Exp. (100), e52944, doi:10.3791/52944 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Reukzin is sterk geconserveerd tussen soorten en is vereist voor de reproductie en overleving.

Bij mensen reukzin is één van de betekenissen die is aangetast door veroudering en is een sterke voorspeller van neurodegeneratieve ziekten. Aldus wordt reukzin testen gebruikt als een niet-invasieve diagnostische methode van neurologische tekorten vroeg detecteren. Om de mechanismen die ten grondslag liggen aan olfactorische netwerk gevoeligheid te begrijpen, heeft olfactorische onderzoek in knaagdieren momentum opgedaan in het afgelopen decennium.

Hier is een zeer eenvoudige, efficiënte en reproduceerbare tijd olfactorische testmethode van aangeboren geurwaarneming en gevoeligheid in muizen presenteren we zonder of vooraf voedsel of water beperking. De tests worden uitgevoerd in een vertrouwde omgeving aan de muizen, vereisen slechts de geuren en 2 min sessie geurstof blootstelling. De analyse wordt uitgevoerd, post-hoc computergestuurd ondersteunde commando's ImageJ en kan derhalve, Van begin tot eind uitgevoerd door een onderzoeker.

Dit protocol vereist geen speciale hardware of configuratie nodig en is geïndiceerd voor elk laboratorium geïnteresseerd zijn in het testen van olfactorische perceptie en gevoeligheid.

Introduction

Reukzin is een van de meest ontwikkelde en belangrijke zintuigen bij zoogdieren. Elke impairment in olfactorische activiteit kan beïnvloeden voedselinname, sociaal gedrag en, in het ergste geval, zelfs overleven. Bij mensen olfactorische verslechtering leeftijdsafhankelijk 1 en als een sterke voorspeller van neurologische aandoeningen 2-6. De olfactorische identificatie-test ontwikkeld door de Universiteit van Pennsylvania vertegenwoordigt momenteel een van de meest gebruikte, niet-invasieve en kwantificeerbaar, diagnostische tests die vroege neurologische tekorten 7 kunnen beoordelen en te voorspellen met een hoge kans op de progressie van dementie 8,9.

De toegankelijkheid van het olfactorische systeem en de bekendheid van de reukzin bij knaagdieren, heeft een intense lijn van onderzoek aanpakken van de onderliggende mechanismen die olfactorische functies 10 aangewakkerd. We hebben eerder aangetoond dat het verlies van functie van de signalering receptof Notch1 beïnvloedt olfactorische vermijden 11. In dit protocol gebruiken we muizen ontbreekt de signalering ligand, Jagged1, in neuronen of glia om olfactorische prestaties te bestuderen.

Innate reukzin wordt gedefinieerd door drie parameters als waarneming, discriminatie tussen geuren en olfactorische gevoeligheid 4. Olfactorische testen bij knaagdieren kan op verschillende manieren en dragstherapie onderzoeken maken gebruik van olfactometers, waarvan de geur aan het dier verschaffen van een specifiek dampconcentraties en een nauwkeurig tijdschema 12-14. Toch is dit instrumentatie is duur en zijn mogelijk alleen beschikbaar in gespecialiseerde faciliteiten. In ons werk, bieden wij een eenvoudige, snelle en reproduceerbare olfactorische testprotocol, dat wordt uitgevoerd met behulp van vluchtige geuren. De tests beschreven maatregel perceptie van een lokstof of een afstotende geur en de discriminatie tussen de geur en water 11,15,16 evalueren. Met dezelfde setup, we kan de gevoeligheid voor een geur bij verschillende concentraties 16,17 meten. De post-hoc-computerondersteunde videoverwerking, geïnspireerd door het werk van de pagina en collega's 18, biedt resultaten zonder de noodzaak van het experimentele verblinding en de mogelijkheid van een persoon om het hele experiment uit te voeren.

Dit protocol is bedoeld als uitgangspunt voor het bestuderen olfactorische gedrag bij muizen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle dierlijke procedures het in overeenstemming zijn met de EU-Richtlijn 2010/63 / EU betreffende de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt en zijn goedgekeurd door de lokale Animal Care Committee (kanton Fribourg, Zwitserland).

1. Dierlijke Voorbereiding

  1. Proefdieren
    1. Experimenten uitvoeren van mannelijke volwassen wildtype en transgene muizen (C57BL / 6 achtergrond) van 3-5 maanden. De drie groepen muizen overeen met wildtype nestgenoot controles (groep A, Jagged1 flox / flox 19) en twee voorwaardelijke KO muizenlijnen (groep B, en C Jagged1ncKO, Jagged1gcKO).
    2. Huis muizen onder standaard laboratorium omstandigheden in een geventileerde ruimte, met een 12 hr gecontroleerde donker / licht-cyclus en zorgen voor voedsel en water ad libitum.

2. Experimentele Setup

  1. Experimentele arena
    1. Voor de experimentele arena, gebruik dan een schone gesteriliseerde muis kooi (36 cm lengte x 20,5 cm breed x 13,5 cm hoog) (Figuur 1A).
    2. Wijs elke muis aan een genummerde kooi met fris beddengoed, 3 cm hoog. Als kooien worden hergebruikt, zoals in de geur gevoeligheid test, de volgende maatregelen te nemen om kruisbesmetting tussen geuren en muizen te voorkomen.
      1. Markeer de waterzijde.
      2. Reinig de smallere wanden van de kooien met twee tissuepapier besproeid met 70% ethanol, een voor elke zijde.
      3. Stapel kooien volgens de genotype van de muizen en tijdelijk op te slaan onder een laminaire afzuigkap.
  2. Camera
    1. Monteer een camera op een statief aangepast met het oog op 58 cm van de onderkant van de kooi (figuur 1A). Bevestig de positie van het statief en de kooi en bakenen met markeringen om de camera te centreren op de bovenkant van de kooi.
    2. Record video's bij 320 pixels x 240 pixels, 15.08 frames per seconde als MOV-bestanden.
  3. Geuren
    1. Resuspendeer de scents, op indicatie, in het oplosmiddel waarin zij oplosbaar zijn.
    2. Voor de voorkeur testen gebruik pindakaas. Resuspendeer de pindakaas pinda olie (10% w / v).
    3. Ter vermijding testgebruik pure 2-methylboterzuur (2-MB) acid (98%).
    4. Voor de gevoeligheidstest Gebruik female urine uit dezelfde muizenkolonie en achtergrond (C57BL / 6).
      1. Gemakshalve verzamelen van de urine 1-2 dagen voorafgaand aan het olfactorische proef. Restrain en houd de muis onder de kap met zijn buik boven de kooi net. Onder de kooi rooster plaatst een plastic petrischaal met de druppels urine te verzamelen.
      2. Verzamel de urine van elk vrouwtje in een 1,5 ml buis en meng alle urinemonsters te normaliseren van variabiliteit tussen de dieren. Bewaar bij -20 ° C tot gebruik.
      3. Op de dag van het experiment dooi urine en voer 4 verdunningen met tweemaal gedestilleerd water met een verdunningsfactor van 10 (1:10, 1: 100, 1: 1000, 1: 10.000).

3. Olfactorische Testing

Opmerking: In dit protocol geuren zijn bewust gekozen die worden gezien als sterke lokstoffen (pindakaas en vrouwelijke urine) of sterke afstotende (2-MB zuur) 15. Het is belangrijk de voorkeur en gevoeligheidstests aangename geuren voorafgaand voeren naar vermijdingstest om de mogelijkheid van enige interferentie met de olfactorische gedrag elimineren. Niettemin is het voor de eenvoud in dit document, voorkeur en vermijdingstest zullen beide worden beschreven in de perceptie testen. Elke behavioral sessie start met een gewenning fase.

  1. Gewenning Phase
    1. Plaats het dier in de schone toegewezen kooi en laat deze onderzoeken voor 5 min (Figuur 1B). Daar de omgeving van de experimentele kooi bekend aan de kooi, deze korte tijd genoeg om voor gewenning.
    2. Als de gevoeligheid testen in één dag is voltooid, voert gewenning maar één keer voor de application van de hoogste verdunde geur. Als de gevoeligheid test op verschillende dagen wordt uitgevoerd, op elke dag een gewenning fase op een nieuwe, schone kooi nodig is.
  2. Perception Test
    1. Na gewenning, het activeren van de camera en onmiddellijk pipet 60 ul van de aangename geur (pindakaas) en 60 ul van de neutrale geur (leidingwater) op de tegenoverliggende wanden van de kooi op ongeveer 10 cm van de bodem (figuur 1C).
    2. Laat de muis verken de geuren voor 2 min (figuur 1D). Daarna schakelt de camera uit.
    3. Op dit moment, verder met de volgende muis vanaf de gewenning fase. Voer de vermijdingstest exact dezelfde wijze door toepassing van 60 pi van het afstotende geur (2-MB acid) en 60 pl water.
  3. Gevoeligheid-test
    1. Evalueer de aantrekkelijkheid drempel van mannelijke muizen met toenemende concentraties van vrouwelijke urine in de volgende volgorde: 1: 10.000; 1: 1000; 1: 100; 1:10 en pure urine.
    2. Na gewenning, bloot elke muis met de hoogste verdunning gepipetteerd door de experimentator zoals eerder beschreven in 3.2.1.
    3. Noteer de verkennende gedrag van de urine versus water, binnen een 2 min tijdsbestek op een video camera. Nadat alle muizen cohorten worden getest op de hoogste verdunning (1: 10.000), blootgesteld aan een hogere concentratie van urine, zoals hierboven aangegeven.

4. Post-hoc gegevensanalyse

Opmerking: Alle gedragstesten beschreven worden volgens de instructies data-analyse verwerkt post hoc.

  1. Open MOV Bestanden in ImageJ voor Windows-systemen
    1. Installeer Quick Time voor Java met behulp van de aangepaste instellingen van http://www.apple.com/quicktime/download.
    2. Installeer de Quick Time plugin van de website ImageJ (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html).
    3. Importeer de QTJava.zip (C: Program Files QuickTime QTSystem) in de bibliotheek extensometersion van ImageJ (.ImageJ jre lib ext).
    4. Kopieer ook de QTJava.zip in de map plugins en hernoem het als QTJava.jar.
    5. Installeer de zes scripts bevestigd in de map macro's (ImageJ plugins Macros).
    6. Open ImageJ en compileren en uitvoeren van de Quick Time plugin, daarna dicht ImageJ.
    7. Heropenen ImageJ en open het MOV-bestand via Bestand> Importeren> met Quick Time.
  2. Video Adjustment
    1. Zodra het videobestand wordt geopend in ImageJ, snijd de video om een ​​constante 2 min exploratie vanaf het moment de onderzoeker de geurstoffen is gepipetteerd in de kooi (T0) te verkrijgen. Identificeer het frame overeenkomt met de T0 en verwijder de vorige frames met stappen van 1 (ImageJ Image Stapels ToolsSlice remover). Gebruik hetzelfde commando om alle frames boven de 2 min exploratie verwijderen.
    2. Zorg ervoor dat de kooi is gecentreerd en gebruik zo nodig de Afbeelding> Transformatie> opdracht Roteren aan te passen.
  3. Video Processing
    Opmerking: Video verwerking is volledig computerondersteund en maakt gebruik van macro commando's bij dit artikel.
    1. Om het gebied op de kooi van een 127 pixels x 218 pixels grootte beperken lopen de Stap 1 macro vanaf de Plugin> Macro's> Uitvoeren commando. Beweeg de vaste rechthoek over de kooi (Figuur 2, Stap 1).
    2. Snijd de oppervlakte van de kooi op het gebied van belang (ROI) met de macro Stap 2 (Figuur 2, Stap 2).
    3. Gebruik de Stap 3 macro om de muis afbeelding van de achtergrond te halen door het toewijzen van een drempel signaal, ontvlekken en filteren van het signaal variantie. De waarden in de Z-as grafiek geven de gemiddelde grijswaarden, die overeenkomt met de intensiteit van de muis schaduw zich binnen het ROI van de "waterkamer" tijdens de 2 min exploratie. Kopieer de resultaten in een werkblad genoemd naar het ROI in rekenbladbestand (Figuur 2, Stap 3).
    4. Gebruik de Stap 4 macroextraheer de gemiddelde grijswaarden van de muis in het ROI "geur chamber". Kopieer de resultaten in een werkblad genoemd naar de ROI in dezelfde spreadsheetbestand zoals in 4.3.3 (figuur 2, stap 4).
    5. Om de analyse van de muisbewegingen in het ROI "water perimeter" verder te beperken gebruiken Stap 5 macro. Kopieer het resultaat op het werkblad genoemd naar de ROI in dezelfde spreadsheetbestand zoals in 4.3.3 (figuur 2, stap 5).
    6. Om de analyse van de bewegingen van de muis in de ROI "geur perimeter" beperkt gebruik maken van de Stap 6 macro. Kopieer het resultaat op het werkblad genoemd naar het ROI spreadsheetbestand zoals in 4.3.3 (figuur 2, stap 6).
    7. Verwerk alle video's en controleer de consistentie van het aantal frames per dieren. Hier, nemen alle voor 1810 frames die overeenkomen met een 2 min verkenning sessie.
    8. Voor elk dier en voor elke ROI soort frames met een gemiddelde grijs values groter dan 0. Verdeel het aantal frames van de waarden die overeenkomen met 1 seconde en het verkrijgen seconden doorgebracht in elk ROI.

5. Statistische analyse

  1. Voor elke test controleren homogeniteit van variantie binnen groepen / genotypes van Bartlett's test met de formule beschikbaar http://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/.
  2. In de aantrekking en vermijding test uitvoeren vergelijken de tijd doorgebracht met water versus geur binnen één groep onder toepassing van een ongerichte t-toets bij gelijke of ongelijke varianties afhankelijk van de resultaten van de Bartlett-test. Vergelijk de tijd doorgebracht met de geuren afgetrokken tegen de tijd doorgebracht met water tussen de genotypen door one-way ANOVA met Bonferroni post-hoc-test.
  3. In de gevoeligheid testen analyseren de vergelijkingen van de tijd doorgebracht met de geur afgetrokken van de tijd doorgebracht met water tussen groepen op een specifieke verdunningen van urine door eenzijdige ANOVA met Bonferroni post-hoc-test. Vergelijk de gevoeligheid tussen groepen aan de groeiende concentraties geur door 2-Way ANOVA met herhalingen met Bonferroni post-hoc-test.
  4. Interactie tussen genotypen en behandelingen in de aantrekkingskracht en vermijding testen worden onderzocht door 2-way ANOVA met Bonferroni post-hoc-test.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De perceptie test meet de aantrekkingskracht pindakaas en vermijding 2-MB zuur. Drie groepen muizen worden getest en de tijd doorgebracht in de "geur omtrek" worden gekwantificeerd ten opzichte van water. In de preferente proef de controlegroep A vertoont significante voorkeur voor de geur in vergelijking met water (8 t = 2,52, p <0,05). Aan de andere kant, groep B geen significante aantrekkingskracht pindakaas te tonen en besteedt meer tijd met water (6 t = 3,22, p <0,05). Zo is het anders gedraagt ​​uit controlegroep A (F 1,7 = 26.39, p <0,005). Bovendien, groep C geeft geen discriminatie en besteedt ongeveer hetzelfde moment met water en pindakaas (t 8 = 0,78, p = 0,45). Over het algemeen drie groepen anders gedragen (F 2,9 = 19,83, p <0,005) en er is een significante interactie tussen genotype en behandeling (pindakaas en water) (2,1 F = 4,90, p <0,005) (

In reactie op 2-MB acid toont de controlegroep een vermijden reflex en daardoor brengt meer tijd met water (t 8 = 2,67, p <0,05). Evenzo groep B toont een uitgesproken vermijden reflex 2-MB acid (6 t = 3,71, p <0,01). Daar staat tegenover dat groep C geen onderscheid tussen de twee geuren en brengt vergelijkbaar maal met 2-MB zuur en water (8 t = 2,2, p = 0,6) (figuur 3B). In het algemeen vergelijkt de vermijdingsreactie de drie groepen geen significant ander gedrag (F 2, 9 = 0,76, p = 0,49) als een gevolg daarvan is er geen interactie tussen behandeling en genotype (F 1, 2 = 0,52, p tonen = 0,63).

In de olfactorische gevoeligheid test om vrouwelijke urine, de curve geeft de voorkeur aan urine in verschillende concentraties versus water (voorkeur index = tijd doorgebracht met urine afgetrokken tegen de tijd doorgebracht met water). In this test, zien we dat de controle groep A heeft een attractie drempel om urine bij een verdunning van 1: 1.000 en displays toenemende aantrekkingskracht urine met stijgende concentraties. Groep B en C geven een 100-voudig hogere drempel attractie (01:10) vergeleken met groep A (2,9 F = 4,78, p <0,05). Groep B en C-display vergelijkbare gevoeligheid curves (F 1,19 = 0,36, p = 0,55). Vergelijking van de gevoeligheid tussen groepen blijkt dat groep A een hogere gevoeligheid voor vrouwelijke urine in vergelijking met groep B en C (2,19 F = 7,12, p <0,01) (Figuur 4).

Figuur 1
Figuur 1: Vertegenwoordiging van de setup wordt gebruikt om de olfactorische tests uit te voeren. (A) camera boven de kooi. (B) Muizen worden in een kooi geplaatst voor een 5 minuten gewenningsperiode. (C) De odorants gepipetteerd op de wand van de kooi. (D) De verkennende activiteit van een geurstof versus water wordt getest in een 2 min venster.

Figuur 2
Figuur 2:.. Workflow van computerondersteunde videoverwerking gebruik van macro commando's in ImageJ Het voorbeeld verwijst naar een muis uit groep A blootgesteld aan urine bij een 1:10 verdunning Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3
Figuur 3:. Representatieve resultaten van olfactorische voorkeur en vermijding proeven De muizen van de drie groepen (n = 5 voor groepen A, n = 4 voor groepen B en n = 5 voor groepen C) werden blootgesteld aan (A), maar pindater en (B) 2-MB zuur een 2 min verkenning sessie. De totale tijd het verkennen van de geur (zwarte cirkels) versus water (grijze cirkels) is vertegenwoordigd. Significante verschillen in olfactorische gedrag tussen groepen zijn aangegeven met zwarte horizontale balken en sterretjes. Significante verschillen in snuiven tijden tussen de geur en water binnen groepen worden weergegeven door grijze horizontale balken en sterretjes. * P <0,05, ** p <0.01, *** p <0,01 (grijze horizontale balken, t-toets, zwarte horizontale balk, one-way ANOVA). Error bars zijn standaard fouten van het gemiddelde (SEM).

Figuur 4
Figuur 4:. Representatieve resultaten van de gevoeligheid tests om toenemende concentraties van vrouwelijke urine De voorkeur index curve, die door de exploratie tijd met urine in verschillende concentraties afgetrokken tegen de tijd doorgebracht met water, laat zien dat de groepA (n = 5) het hoogste gevoeligheid voor urine in vergelijking met groep B (n = 4) en C (n = 5). * P <0,05 (zwarte horizontale balken, one-way ANOVA). Error bars zijn SEM.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De in dit protocol voorgesteld testen toelaten om verschillende aspecten van aangeboren olfactorische gedrag bij muizen te evalueren: perceptie te geuren, discriminatie tussen geuren versus water en gevoeligheid voor geuren. Dit protocol kan worden toegepast op elke geur dat naar keuze en voorkoming schaal eerder aangetoond 15. Aangezien het protocol is gebaseerd op experimentele activiteit is het belangrijk dat muizen geen motorische beschadiging of angst, die hun beweging kunnen beïnvloeden en verstoren olfactorische exploratie weergegeven. De beschreven testen zijn bedoeld voor volwassen mannelijke muizen maar ze kunnen worden aangepast aan reukzin ook onderzoeken bij volwassen vrouwen of oude muizen.

Voor de aanvang van een dergelijk onderzoek naar reukzin bij muizen is het belangrijk om aandacht te besteden aan de volgende aspecten: 1) uitvoeren van elke test met een interval van ten minste 3 dagen. Vermijden moeten worden getest als laatste om interferentie van olfactorische geheugen 20 minimum te beperken; 2) voert de experiments op hetzelfde tijdstip van de dag, bij voorkeur in de late namiddag, wanneer de muizen in hun actieve cyclus 21 en gebruik gedempt lichtbron. Bovendien plannen de olfactorische testen op gezette tijden controles voor eventuele circadiane veranderingen olfactorische functie 22; 3) alvorens de vermijdingstest, die afstotende geurstoffen, zoals zuren gebruikt, breng een kooi destijds in de experimentele suite en houdt de kooi onder een laminaire afzuigkap. Deze stap is belangrijk gewenning aan de geurstof en het verkrijgen van een homogene reactie in dezelfde groep; 4) tijdelijk muizen geteste totdat alle muizen van dezelfde kooi zijn blootgesteld aan de geurstof te geurstof besmetting te minimaliseren scheiden; 5) Gebruik dieren van dezelfde stam, aangezien verschillende stammen kunnen zich op een heterogene wijze bij blootstelling aan geurstof 23; 6) de onderzoeker moet een laboratoriumjas dragen op alle tijden en handschoenen tussen dieren geur vermenging te voorkomen veranderen; 7)Na het pipetteren bediener langzaam vanaf de kooi te bewegen op een afstand van 1,3 meter tot enige verstorende stimulatie van de muizen in de olfactorische exploratie voorkomen; 8) muizen tonen gemiddelde grijswaarde slechts één kamer dienen van het onderzoek te worden uitgesloten, aangezien muizen wordt verwacht dat beide kamers staand in verschillende mate.

De beschreven methode biedt een aantal voordelen ten opzichte van andere protocollen: het is uiterst eenvoudig in te stellen, maakt gebruik van goedkope materialen, is het van snelle voltooiing en maakt gebruik van open source software, zoals ImageJ. Daarnaast bieden we macro's die klaar zijn om te worden geïnstalleerd en die kunnen op maat worden gebruikt en aangepast aan elke arena en meer dan 2 geur perimeters. Er dient te worden opgemerkt dat alleen de tijd doorgebracht in de aangegeven geur perimeter is een maat voor olfactorische activiteit. Overwegende dat de tijd doorgebracht in elke kamer geeft een uitlezing van de verkennende activiteiten van de muis en het is slechts een ruwe schatting van de olfactorische gedrag. Net als bij andere methoden, kan statistische power worden verkregen door het verhogen van het aantal dieren per groep.

In vergelijking met de olfactorische testen met behulp van olfactometers, die automatisch kan controleren voor dampdruk en levertijd 12 - 14, wordt het voorgestelde protocol minder gecontroleerd. Niettemin zijn de geuren toegepast in gelijke volumes op gedefinieerde afstand en hetzelfde tijdvenster. Derhalve houdt deze variabelen constant, in deze test een olfactometer is niet vereist. Er is een andere potentiële beperking van dit protocol, namelijk de tijd die nodig is voor het instellen en snijden van elke video een vast aantal frames te verkrijgen. Niettemin kan dezelfde computergestuurde analyse ook op meer geavanceerde opstellingen met geur poorten leveren van de geur op bepaalde tijdstippen. In dit geval kan de video snij automatisch ingesteld.

In vergelijking met andere protocollen met behulp van wattenschijfjes impregnated met geur attractie en vermijding testen, het huidige protocol voorziet in een aanvullende informatie over de olfactorische discriminatie tussen een nieuwe geur en een neutrale geur (water) 15,16 in een enkele experimentele sessie. Bovendien is het protocol niet experimentele blindering nodig en kan volledig worden uitgevoerd door een enkele onderzoeker met behulp van de onpartijdige computer-ondersteunde analyse.

Deze eenvoudige tests kunnen worden gebruikt voor het bewaken van de voortgang van neurale tekorten in Alzheimer of Parkinson's ziekte muismodellen en mechanismen van olfactorische transmissie onderzocht.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Mouse cage Italplast (Italy) 1144B 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height
Chipped wood bedding Abedd (Austria) LTE E-001 3 cm high
Peanut butter Migros (Switzerland) NA 1:10
2-Methylbutyric Sigma Aldrich (Switzerland) W269514 Pure
Female urine from fertile females of same mouse strain NA NA Dilution series
Camera Olympus (US) Camedia C-8080 MOV files
Quicktime for Java (Windows) Apple (USA) NA video plugin for visualizing MOV files
ImageJ for Windows NIH (USA) NA Video Processing/Analysis

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20 (2014).
  2. Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of olfactory functioning in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. Archives of Neurology. 55, (1), 84-90 (1998).
  3. Moberg, P. J., et al. Olfactory Dysfunction in Schizophrenia: A Qualitative and Quantitative Review. Neuropsychopharmacology. 21, (3), 325-340 (1999).
  4. Kovács, T. Mechanisms of olfactory dysfunction in aging and neurodegenerative disorders. Ageing Research Reviews. 3, (2), 215-232 (2004).
  5. Barrios, F. A., et al. Olfaction and neurodegeneration in HD. Neuroreport. 18, (1), 73-76 (2007).
  6. Doty, R. L. Olfaction in Parkinson’s disease and related disorders. Neurobiology of Disease. 46, (3), 527-552 (2012).
  7. Doty, R. L., Shaman, P., Dann, M. Development of the University of Pennsylvania Smell Identification Test: a standardized microencapsulated test of olfactory function. Physiology & Behavior. 32, (3), 489-502 (1984).
  8. Devanand, D. p, et al. Olfactory Deficits in Patients With Mild Cognitive Impairment Predict Alzheimer’s Disease at Follow-Up. American Journal of Psychiatry. 157, (9), 1399-1405 (2000).
  9. Conti, M. Z., et al. Odor Identification Deficit Predicts Clinical Conversion from Mild Cognitive Impairment to Dementia Due to Alzheimer’s Disease. Archives of Clinical Neuropsychology. 28, (5), 391-399 (2013).
  10. Keller, A., Vosshall, L. B. Better Smelling Through Genetics: Mammalian Odor Perception. Current opinion in neurobiology. 18, (4), 364-369 (2008).
  11. Brai, E., et al. Notch1 activity in the olfactory bulb is odour-dependent and contributes to olfactory behaviour. European Journal of Neuroscience. 40, (10), 3436-3449 (2014).
  12. Larson, J., Hoffman, J. S., Guidotti, A., Costa, E. Olfactory discrimination learning deficit in heterozygous reeler mice. Brain Research. 971, (1), 40-46 (2003).
  13. Alonso, M., et al. Olfactory Discrimination Learning Increases the Survival of Adult-Born Neurons in the Olfactory Bulb. The Journal of Neuroscience. 26, (41), 10508-10513 (2006).
  14. Wesson, D. W., Keller, M., Douhard, Q., Baum, M. J., Bakker, J. Enhanced urinary odor discrimination in female aromatase knockout (ArKO) mice. Hormones and behavior. 49, (5), 580-586 (2006).
  15. Kobayakawa, K., et al. Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb. Nature. 450, (7169), 503-508 (2007).
  16. Witt, R. M., Galligan, M. R., Despinoy, J., Segal, R. Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse. Journal of Visualized Experiments JoVE. (23), (2009).
  17. Lee, A. W., Emsley, J. G., Brown, R. E., Hagg, T. Marked differences in olfactory sensitivity and apparent speed of forebrain neuroblast migration in three inbred strains of mice. Neuroscience. 118, (1), 263-270 (2003).
  18. Page, D. T., et al. Computerized assessment of social approach behavior in mouse. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 3, 48 (2009).
  19. Nyfeler, Y., et al. Jagged1 signals in the postnatal subventricular zone are required for neural stem cell self-renewal. Embo J. 24, (19), Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=16163386" 3504-3515 (2005).
  20. Tong, M. T., Peace, S. T., Cleland, T. A. Properties and mechanisms of olfactory learning and memory. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, (2014).
  21. Steinlechner, S. Chapter 2.12 - Biological Rhythms of the Mouse. The Laboratory Mouse (Second Edition). Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780123820082000179 383-407 (2012).
  22. Corthell, J., Stathopoulos, A., Watson, C., Bertram, R., Trombley, P. Olfactory Bulb Monoamine Concentrations Vary with Time of Day. Neuroscience. 247, 234-241 (2013).
  23. Lehmkuhl, A. M., Dirr, E. R., Fleming, S. M. Olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51804 (2014).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics