Author Produced

Ultraljud i experimentella reproduktionstoxikologiska undersökningar på råttor

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Detta manuskript beskrivs verktyget av ultraljud utförs på honråttor att utforma experimentella modeller för reproduktiv och gynekologisk undersökning. En steg för steg förklaring om hur att utföra ultraljud utvärdering visas.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Med utvecklingen av assisterad reproduktiv teknologi och etiska begränsningarna av forskning på människor, har råtta djurmodeller allmänt använts i reproduktiv medicin. Tidigare har studier av reproduktiva systemutveckling hos gnagare baserats på engångs Histologisk undersökning av exciderad vävnad. Med utvecklingen av högupplösta transabdominal ultraljud, kan nyligen, högkvalitativa sonography nu utföras för att utvärdera de reproduktiva organ hos råttor, vilket gör att en ny metod för att studera det reproduktiva systemet. Bilder erhölls använder en högupplöst ultraljud system. Gynekologiska ultraljud utfördes på 28 åtta veckor gamla icke-dräktiga råttor och 5 dräktiga Sprague-Dawley-råttor. Vi beskriver hur man känner igen organ i det reproduktiva systemet och tillhörande strukturer i typiska vyer under olika faser av brunstigheten cykel. Färg flödet Doppler användes för att mäta blodflödet i livmodern artär och utvärdera uterin blod flöde mönster förändringar under olika stadier av graviditeten. Vi har visat att ultraljud prospektering är en användbar metod för att utvärdera förändringar i inre reproduktiva organ. Dess användning höjer möjligheten att genomföra ytterligare experiment, inklusive medicinska eller kirurgiska förfaranden, och ger möjlighet att övervaka sonographic ändringar inre organ utan att offra djur.

Introduction

Rat djurmodeller har använts i reproduktiv medicin, inklusive i embryot och cystor transplantation1,2. Dock tidigare studier av reproduktiva systemutveckling hos gnagare har baserats på engångs Histologisk undersökning av exciderad vävnad och longitudinella studier av dagliga reproduktivt organ ändringar varit inte möjligt i råttor3. Ultraljud har använts i assisterad reproduktiv teknologi hos människor i över 30 år, men denna värdefulla teknik har bara tillämpats på råttor nyligen.

Vårt mål var att upprätta ett ultraljud tillvägagångssätt för utvärdering av de reproduktiva organ hos Sprague-Dawley-råttor att designa experimentella modeller för reproduktion och gynekologi utredning och demonstrera förfarandet eftersom att vår kunskap, Det finns inga aktuella visualiserade publikationer om detta förfarande. Vi beskriver tillvägagångssättet av ultraljud undersökning av kvinnliga råttans reproduktiva systemet och nuvarande ultraljud fynd på anatomi och livmodern artär blodflöde med HD-ultraljud. Vi övervakas de egenskaper av endometriet, äggstockarna och livmodern artär blodflödet i icke-dräktiga djur i olika skeden av estrus cykel att utvärdera de betydande skillnaderna i livmoderslemhinnans tjocklek, cystor morfologi och uterin blodflödet i olika stadier av estrus cykel, liknande till kvinnor. Vi använde högkvalitativ ultraljudsutrustning med en 70 MHz frekvens och en resolution 30 µm. Vårt andra mål var att utvärdera förändringar i motståndet av livmoderns blodflödet hos dräktiga råttor. Denna teknik möjliggör studiet av dagliga förändringar i reproduktiva organ utan att offra djur.

I området i närheten finns det flera tekniska svårigheter i att utnyttja ultraljud på råttor. Dessa problem inkluderar: råtta endometriet är mycket tunnare än ett mänskligt kvinnliga4. Svårigheter i imaging äggstockarna hos råttor har tillskrivits tjockare hud och bukväggen muskulatur hos råttor, vilket resulterade i nästan fullständig dämpning av ultraljud5, och livmodern artären är mycket svårare att hitta i icke-gravida råttor. Vi har löst många tekniska problem med förfarandet, och för de problem som återstår, vi visar hur man kan minimera dem.

Framgångsrik övervakning av sonographic förändringar i reproduktiva organ hos råttor utan att behöva offra djur öppnas möjligheten att bygga framtida djurmodeller för reproduktiv medicin och andra kirurgiska ingrepp.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Denna studie utfördes i strikt överensstämmelse med rekommendationerna i Guide för skötsel och användning av försöksdjur från National Institutes of Health och i enlighet med anländer (djur forskning: rapportering i Vivo experiment) riktlinjer. Protokollet fått licens för djurförsök som överensstämmer med direktiv 2010/63/EU med tillståndsnummer A13170404 (Anexo 1). Alla experimenten utfördes i ett EU-certifierat laboratorium efter nationella riktlinjer för etisk vård av djur (RD 53/2013, EU direktiv 63/2010). Protokollet godkändes av kommittén för etik av djur experimenten av den universitet Murcia.

1. animaliskt förberedelse

Obs: Alla experiment stöttades av djur experiment avsnitt av Murcia universitetet och obstetrik och gynekologi avdelning av Murcia universitet.

  1. Använd 8 veckor gamla Sprague-Dawley-råttor (28 honråttor) väger 200-250 g i alla experiment.
    Obs: Vi använde här, också 5 dräktiga råttor.
  2. För att få dräktiga råttor, Bur åtta veckor gamla kvinnliga och bördiga hanråttor och mate från 17:00 -23:00 h. identifiering av en vaginal plugg på morgonen därpå tolkades som parning framgång. Överväga dag 1 av dräktigheten, följande dagen efter de parades.
  3. Utföra experimenten vid 9, 15 och 18 dagars dräktighet.
  4. Hus råttor i grupper om två med fri tillgång till mat och vatten och upprätthålla regelbundna 12 h ljus/mörk cykler.
  5. Efter acclimating anläggning förhållanden i minst två veckor, Använd dagligen morgon vaginal cytologi för att bedöma för brunst frekvens och regelbundenhet.
    Obs: Tjugoåtta råttor med en vanlig 4 till 5 dag brunst fas valdes ut för att ingå i studien.

2. beredning av råttor för Imaging

Obs: Bilder erhölls med högupplösta transabdominal ultraljud. Östruscykel faser bestämdes genom vaginala utstryk cytologi.

  1. Innan bildtagningsstudien, söva dammen i induktion kammaren med 2-3% isofluran gas.
  2. Ta bort djuret och omedelbart placera nosen inom en Kona ansluten till anestesi-systemet och behålla djuret på 1,5-2% isofluran under ultraljud undersökningen.
  3. Ta bort pälsen från den revbens marginalen till stjärtfenan buken med clippers och hårborttagningsprodukter grädde.
  4. Placera den sövda råttan i ryggläge på en uppvärmd tabell att säkra råtta och garantera optimal komfort och underhåll av fysiologiska parametrar för varaktigheten av en bildsession. Alla fysiologiska parametrar bör integreras med bilder och data fångas i realtid via ultraljud ansökan.
  5. Sätt försiktigt in en rektal sond (efter smörjning) för att övervaka kroppstemperatur (37,5 ° C ± 0,5 ° C).
  6. Placera givaren (30 Hz) i en stillastående hållare och flytta det längs den vertikala och horisontella axeln (fram-och baksida och sida till sida) med en manuellt manövrerad joystick eller för hand.
  7. Tillämpa petroleum-baserade oftalmologiska balsam för ögonen på råttan att undvika uttorkning under förfarandet.

3. granskningsförfarande

Obs: Anatomi av rats´ reproduktionsorganen: slidan ligger rygg till urinblåsan och delar sig i två livmoderns horn som sträcker sig mot njurarna. Äggstockarna är anslutna till livmoderns horn via oviducts (figur 1). Livmodern ligger i regionen bakre till njurarna.

  1. Identifiering av livmodern
    1. Genom att använda urinblåsan som ett landmärke för att hitta livmoderhalsen, följ livmoderhalsen för att hitta grenen av vänster och höger livmoderns horn.
    2. Växla till tvådimensionella visning/video genom att välja ”B-läge”. Mät varje livmoderns horn i regionen mid-isthmic på en sagittal mittlinjen bild ryggsköldens diameter. Upptäcka mätningar med hjälp av ultraljud systemprogramvara.
    3. Mäta den livmoderslemhinnans tjockleken från echogenic gränsen till echogenic gränsen över livmodercancer kaviteten på en sagittal mittlinjen bild i ”B-mode”.
    4. Ändra färg Doppler-läge genom att välja ”färg Doppler”. Använda färg Doppler för att identifiera blodtillförseln av endometriet och mäta blodflödet av endometriet. Välja följande parametrar i färg Doppler läge: högpassfilter inställd på 4 Hz, pulsad upprepning frekvens set mellan 4 och 48 kHz och pulsad Doppler gate ligger mellan 0,2 till 0,5 mm.
  2. Identifiering av livmodern artär blodflöde
    1. Erhålla Doppler vågformer i livmodern artären nära den laterala-inferior marginalen av utero-cervikal korsningen nära bäckenartären på varje sida.
    2. Använd följande parametrar i Doppler läge: högpassfilter inställd på 6 Hz, pulsad upprepning frekvens set mellan 4 och 48 kHz och pulsad Doppler gate ligger mellan 0,2 till 0,5 mm.
    3. Var noga med för att rikta blodflödet och Doppler balken att minimera Doppler vinkeln. Spela in vinkeln mellan Doppler balken och fartyget. Värden tas bortom en vinkel av 60° är felaktiga och bör undvikas6.
    4. Mäta peak systoliskt velocity (PSV) och slutet-diastoliskt velocity (EDV) från tre på varandra följande cykler. Sedan beräkna den systoliska diastoliskt (S/D) förhållande (PSV/EDV) och motstånd index (RI) ([PSV-EDV] / PSV) värden för varje livmoderns horn.
    5. Mäta livmodern artär blodflödet av 5 dräktiga råttor under den 9: e, 15th, 18: e dagen av dräktigheten.
  3. Identifiering av äggstocken och äggstockarna artär blodflöde
    Obs: Kvinnliga råtta äggstockarna ligger lateralt till njurarna på båda sidor av djuret och bosätta sig i fett kuddar finns i slutet av livmoderns horn (figur 1).
    1. Bild äggstocken, börja med sonden i ett tvärplan och placera den på den laterala delen av djuret något under revbenen. Njure och fettet pad har en hyperechoic utseende jämfört med äggstockarna.
    2. Mäta den yttre gränsen av äggstocken och folliklar. Siffrorna på skalan till varje bild är i millimeter, med 0,1 mm steg.
      Obs: Doppler färgläge och läget för Power-Doppler imaging hjälper till med identifiering av äggstockscancer intensitet och riktat flöde.

4. design av studien

  1. Kontrollera den estrus cykeln av vaginala utstryk cytologi.
  2. Dela alla råttor i två grupper. För grupp 1 eller pre fertila (eller periovulatory), inkludera de råttor som var i Proöstrus och estrus cykel faserna. För grupp 2 eller efter bördiga, inkludera de råttor som var i tidig diöstrus och sen diöstrus cykel faserna.
  3. Övervaka och jämföra ryggsköldens diameter varje livmoderns horn i regionen mid-isthmic i grupperna 1 och 2.
  4. Övervaka och jämföra livmoderslemhinnans tjocklek och egenskaper av endometriet i grupperna 1 och 2.
  5. Övervaka och jämföra storlek (maximal diametrar) och kännetecken av äggstockarna och lokalisera någon periovulatory folliklar i båda äggstockarna i grupperna 1 och 2.
  6. Övervaka och jämföra livmodern artär blodflödet i grupperna 1 och 2.
  7. Övervaka och jämföra livmodern artär blodflödet av gravida råttor i olika stadier av graviditeten (dagar 9, 15 och 18 graviditetsveckor).
  8. Utföra statistiska analyser med hjälp av SPSS. Presentera data som medelvärde ± standardavvikelse (SD) eller median med interquartile spänner. Analysera resultatet med hjälp av Students t-test mellan de olika grupperna. Ett P-värde på mindre än 0.05 ansågs en statistiskt signifikant skillnad.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Det fanns inga signifikanta skillnader i antero-posterior livmoderns horn diameter eller tjocklek på endometriet mellan de två sidorna av livmoderns horn (tabell 1). Den genomsnittliga livmoderslemhinnans tjockleken i gruppen 1 jämfört med gruppen 2, och var tjockare, men inga signifikanta skillnader (P > 0,05) hittades mellan de två grupperna (figur 3). Dock hittade vi vätska inuti livmodern (hos 8 av 28 råttor) nära estrus cykel förändringar i endometriet morfologi (figur 2).

Doppler studier visade också inga signifikanta förändringar i flödet hastighet vågform mönster i varje sida av livmoderns horn eller i olika faser av brunst hos icke-gravida råttor (tabellerna 1 och 2, figur 4A). Dock hos dräktiga råttor som dräktigheten avancerade, maximal systoliskt och slutet-diastoliskt hastigheter ökade betydligt, och beräknade motstånd index minskade signifikant (tabell 3, figur 4B).

Den genomsnittliga diametern i äggstockarna var inte signifikant (tabell 1). När morfologi av äggstockarna jämfördes mellan de två grupperna, sågs periovulatories folliklar och vätska runt äggstocken efter ägglossningen (tabell 2, figur 2).

Figure 1
Figur 1 : Anatomi Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2 : Mätning av livmoderslemhinnans tjocklek (B-läge). Tjockleken på livmoderslemhinnan (blå linje) (A). Den ryggsköldens livmoderns horn diametrar (stora blå linje) och tjocklek av endometriet (kort blå linje) under estrus cykel (B). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3 : (A) mätning av diametern på den vänstra äggstocken; (B) äggstocken och folliklar under brunst fas.

Figure 4
Figur 4 : Mätning av livmodern artär blodflöde. (A) livmodern artär blodflöde hos icke-gravida råttor. (B) livmodern artär blodflödet i 15 : e dagen av dräktiga råttor.

(P > 0,05, ingen signifikant skillnad i varje grupp). SD: Standard DesviationPSV: peak systoliskt velocityEDV: slutet-diastoliskt velocityS/D: systoliskt till diastoliskt ratioRI: motstånd index. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

Variabel
(mm±SD)
Vänster sida Höger sida P. värde
Horn diameter (mm) 1.78±0.24 1.73±0.28 0.626
Endometriet tjocklek (mm) 0.75±0.06 0.76±0.05 0,752
Äggstocken diameter (mm) 3.69±0.52 3.62±0.32 0,107
Follikeln storlek (mm) 1.68±0.31 1.74±0.29 0.859
PSV (mm/s) 91.52±17.91 93.07±22.87 0,055
EDV (mm/s) 34.18±9.36 36.67±11.14 0,178
S/D 2.78±0.59 2.62±0.50 0.294
RI 0.62±0.08 0.60±0.08 0.876
(P > 0,05, ingen signifikant skillnad i varje grupp).
SD: Standard Desviation
PSV: peak systoliskt hastighet
EDV: slutet-diastoliskt hastighet
S/D: systoliskt-diastoliskt förhållande
RI: motstånd index. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

Tabell 1: Skillnader i vänster och höger livmoderns horn och äggstock.

Variabel
(mm±SD)
Brunst fas
(Grupp 1)
Icke-brunst fas
(Grupp 2)
P.Value
Horn diameter (mm) 1.71±0.18 1.83±0.23 0.433
Endometriet tjocklek (mm) 0.78±0.04 0.72±0.05 0.168
Äggstocken diameter (mm) 3.71±0.56 3.66±0.47 0.515
PSV (mm/s) 92.05±17.93 94.15±20.62 0,886
EDV (mm/s) 37.81±9.64 34.72±5.38 0,096
S/D 2.61±0.58 2.77±0.44 0.249
RI 0.60±0.08 0.63±0.06 0,232
(P > 0,05, ingen signifikant skillnad i varje grupp).
SD: Standard Desviation
PSV: peak systoliskt hastighet
EDV: slutet-diastoliskt hastighet
S/D: systoliskt-diastoliskt förhållande
RI: motstånd index. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

Tabell 2: Skillnaderna mellan olika östruscykel faser hos icke-gravida råttor.

Variabel D9 D15 D18 P-värde
PSV(mm/s) 111.08±5.93a, b 122.64±7.49c 131.91±3.50 < 0,05
EDV(mm/s) 38.80±3.37d, e 56.43±3.10f 79.29±5.47 < 0,05
S/D 2.87±0.12g, h 2.17±0.16jag 1.67±0.14 < 0,05
RI 0.65±0.02 j, k 0.54±0.04L 0.39±0.05 < 0,05
PSV = Peak systoliskt hastighet
EDV = slutet-diastoliskt hastighet.
S/D = systoliskt-diastoliskt förhållande (PSV/EDV).
RI = motstånd index ((RI) = ([PSV – EDV] / PSV).
D9 = dag 9 graviditetsveckan
D15 = dag 15 graviditetsveckan
D18 = dag 18 av dräktigheten
SD: felen indikerar standardavvikelse (±).
(P < 0,05, ingen signifikant skillnad i varje grupp)
P-värde: D9 vs D15 en = 0,03; d = 0,001; g = 0,01; j = 0,01.
D9 vs D18 b = 0,003; e = 0,001; h = 0,01; k = 0,001.
D15 vs D18 c = 0,03; f = 0,001; Jag = 0,03; L = 0,04.

Tabell 3: Skillnaderna i livmodern artär blodflöde hos dräktiga råttor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

På grund av de processuella ändringarna och felsökning som krävdes i denna studie, trots vårt syfte att identifiera alla faser av brunstigheten cykel hos råttor med hjälp av ultraljud, gick det inte att hitta några betydande skillnader. Vi hypotes att dessa svårigheter kan bero på att cykelns brunstigheten varar bara några dagar hos råtta, till skillnad från cykeln hos kvinnor. Vi är säkra på att alla mätningar utfördes vid exakt rätt tidpunkt att avgöra eventuella skillnader. Därför vi omgrupperade brunstigheten cykel faserna i endast två faser att utvärdera för eventuella skillnader, men observerades ingen. Som förväntat, fann vi ingen signifikant skillnad mellan mätningar av varje livmoderns horn, som gör det möjligt för oss att välja antingen horn att utföra mätningar i framtiden. Studier på effekterna av isofluran användning på gnagare är motstridiga. Det kan vara teratogena, men bara om det administreras vid narkos koncentrationer i många timmar eller flera dagar. I vårt experiment var undersökning tiden hos de dräktiga råttorna mindre än 30 min, så vi inte har hittat några negativa effekter i alla dräktiga råttor eller deras avkomma.

Vi skulle vilja har hittat fler likheter med ultraljud utvärdering av fortplantningsorganen hos kvinnor, där det finns tydliga echogenic skillnader mellan follikulär fas, periovulatory och sekretoriska faser, men sådana förändringar sågs ej hos råtta modellen. Detta faktum kan förklaras eftersom råtta brunstigheten cykel faserna bara sista fyra till fem dagar. Kort estrus cykel faserna och dräktigheten perioder gör råttan ett perfekt djur för forskning på reproduktion5. Ändå, detta faktum kan vara orsaken till varför det finns inga signifikanta skillnader i diametern av livmoderns horn, livmoderslemhinnans tjocklek och cystor diameter i estrus och icke-brunst faser. Det är svårt att göra mätningarna vid exakt rätt tidpunkt att fastställa skillnader, och trots att ta mätningar varje dag, vi har inte hittat betydande förändringar.

Trots begränsningarna ovan föreslår vi användningen av ultraljud att övervaka förändringar i reproduktiva systemet, inklusive tjocklek och morfologi av reproduktiva organ. Vi kan bejaka denna användning av ultraljud eftersom tjockleken på endometriet i 8 veckor gamla Sprague-Dawley råttor mätt histopatologiskt (ett lager 359.13 ± 49.70 mm) av Jing o.a. 7 liknar resultatet här. Trots de olika teknikerna för att mäta livmoderslemhinnans tjocklek histopatologiskt och sonographically, fick vi liknande resultat. Även om power Doppler och färg Doppler har använts på dräktiga råttor för flera år8,9, har förekommit några utredningar mäta livmodern artär blodflöde hos icke-gravida råttor. Med utvecklingen av ultraljud, kan vi nu dra nytta av denna teknik för att övervaka förändringar i fortplantningsorganen under varje olika steg, även i början av graviditeten.

Framtida tillämpningar av ultraljud kan omfatta prospektering av mekanismen av embryo implantation och behandling av tunt endometrium i råtta djurmodeller. Också, genom att övervaka egenskaperna att utveckla folliklar, kan vi få mer omfattande kunskap om deras funktion i en äggstockscancer transplantation modell. För närvarande finns det några undersökningar med hjälp av 3D imaging och molekylär ultraljudsundersökningar av det reproduktiva systemet av råttor10, och vi kommer att tillämpa denna teknik på en tunt endometrium modell i framtiden.

Vi kan dra slutsatsen att råttan är en lämplig modell för studier av reproduktivt organ dynamics med transkutan ultraljud bio-mikroskopi, som inte kräver offer av djur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har något att avslöja.

Acknowledgements

Denna forskning stöddes av djur experiment avsnitt av Murcia universitet och obstetrik och gynekologi avdelning av Murcia universitet. Vi tackar alla de tekniker som arbetar på CEIB (Centro experimentella sv Investigaciones Biomédicas), avsnittet i djurförsök av den universitet Murcia, som har samarbetat i detta projekt.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hunter, R. K. II, et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10, (12), e0144823 (2015).
  2. Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7, (3), 185-199 (2006).
  3. Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
  4. Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. 2nd, Elsevier Academic Press. 147-164 (2006).
  5. Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7, (69), (2009).
  6. Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
  7. Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101, (2), 587-594 (2014).
  8. Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, (3), H1421-H1428 (2006).
  9. Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72, (3), 762-766 (2005).
  10. Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5, (2), 206-217 (2015).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics