Nøkkelelementer i Foto attraksjon Bioassay for insekt studier eller overvåking programmer

Behavior

Your institution must subscribe to JoVE's Behavior section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Foto-attraksjon bioassay arenaer brukes til å bestemme den optimale lyse farger å maksimere insekt attraksjon; men bioassay og metoder er spesifikke for insekt atferd og habitater. Passelig utstyr og modifikasjoner er forklart for nattlige eller dagaktive og terrestriske eller antenne insekter.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Cohnstaedt, L. W., Disberger, J. C., Paulsen, E., Duehl, A. J. Key Elements of Photo Attraction Bioassay for Insect Studies or Monitoring Programs. J. Vis. Exp. (137), e57445, doi:10.3791/57445 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Optimalisert visuelle Oktenol vil øke insekt overlapping effektivitet ved hjelp av målet insekt medfødte handlinger (positive Foto-taxier) som et middel for å lure insekt til en befolkning eller overvåking trap. Lys utslipp diodene (lys) har opprettet kan tilpasse alternativer med bestemte bølgelengder (farger) og intensiteter båndbredder, som kan tilpasses til målet insekter. Foto-attraksjon atferdsmessige bioassay kan bruke lysdioder for å optimere det attraktive farger for et insekt arter til bestemte livshistorie stadier eller atferd (mating, fôring eller søker ly). Forskere må deretter bekrefte bioassay resultatene i feltet og forstå visuelle Oktenol begrenset attraktive avstand.

Kløverblad bioassay arena er en fleksibel metode for å vurdere Foto attraksjon samtidig vurdere en rekke naturlig insekt atferd som rømme og fôring svar. Arenaen kan brukes til bakkenett eller antenne insekt eksperimenter, samt dagaktive og nattlige insekter. Data collection teknikker med arenaen videotaping, telle kontakt med lampene eller fysisk samle insekter som de er tiltrukket mot lyset. Analysen kontoene for insekter som gjør ingen valg og arenaene kan være enkelt (nonkompetitiv) farge eller flere (konkurranse) farger. Kløverblad design forårsaker insekter med sterk thigmotaxis å gå tilbake til midten av arenaen hvor de kan vise alle alternativene i en konkurransedyktig LED tester. Kløverblad arena presenteres her har blitt brukt med mygg, sengen avlyttinger, Hessian fly, huse fluene, skarp midges, røde mel biller og psocids. Bioassay brukes til å utvikle nøyaktig og effektiv insect feller å lede utviklingen og optimalisering av insekt feller brukes til å overvåke pest befolkningen svingninger for sykdom vektor risikovurderinger, innføring av fremmede arter, og/eller brukes til befolkningen undertrykkelse.

Introduction

Nesten alle Entomologiske overvåking avhenger av luktesans eller visuelle Oktenol og ofte begge. Flyktige olfactory Oktenol kan spre i miljøet som resulterer i et stort attraktivt område. Men kan visuelle Oktenol ha et mer begrenset område på grunn av virvelløse sammensatte øyet løse bilder1,2,3. Derfor må visuelle Oktenol være optimalisert til insekt rundt å maksimere attraksjon og trap benytter seg av målet insekt naturlige atferd.

Visuelle attraksjon er basert på bølgelengder fra solen og andre lyset som er absorbert eller reflektert av objektets overflate; organismer vise denne absorpsjon/brytning av bølgelengder som farge. Insekt visjon har funnet med blå, grønn og ultrafiolett (UV) bølgelengder1. Insekter bruk deres visjon for å hjelpe å finne kamerater, mat og ly4. Insekter kan visuelt definere objektet størrelser, farger, figurer, bevegelser og kontraster5,6. Nattlig aktive insekter er generelt gråspraglete av ulike kontrast og intensitet4, mens diurnal insekter kan løse farger og bilder, i tillegg til kontrast på grunn av større Foton tilgjengelighet på dagtid. Overvåking feller bruk insekt visuelle stikkord til sin fordel å optimalisere attraksjon og fange7.

Den vanligste metoden for evaluering av foto-attraksjon var observasjon av insekt bevegelse mot forskjellige fargede figurer som blomster8 eller objekter (for eksempel gule kort9,10). Visual bioassay bruker koloniserte insekter kan bidra til å identifisere det optimale området av bølgelengder og/eller innhold, noe som reduserer antall feltforsøk. Visuell bioassay som "Tosidig lys tunnelen" ble laget for testing fluer11. Problemet med to dobbeltsidige lys tunneler er at de ikke gjøre rede for insekter som ikke samles inn. De fleste insekter sitter fast på interne hjørnene og langs kantene på arenaer. Bare to farger kan også testes samtidig. Andre analyser omfatter metoder av Steverding & Troscianko (2004)12, som falt tsetse fly tiltrekning til bred band (±50 nm) av lyse farger. Light emitting diodes lysemitterende (lysdioder) har blitt innlemmet i feller å forbedre insekt attraksjonen ved å optimalisere bølgelengdene slippes ut lys1,13,14. Optimalisere visuelle tiltrekningen av disse feller eller overvåking enheter forbedre insekt samling effektivitet ved hjelp av insekt medfødte atferd for å lokke insekter. På denne måten brukes bioassay resultater til å optimalisere eksisterende fangst teknologien. "Terrestriske leddyr felle" som forbedret industrien standard dome-type fellen for rød mel bille overvåking (US patent # US8276314B2)) og den "metoden og komposisjoner for forbedret lys feller" som av lys emitting diodes til antennen insekt feller (US patent # US2009/0025275A1). To patenter bruker LED-teknologi som var optimalisert bruker bioassay resultatene for å forbedre insekt feller.

Denne studien beskriver en foto attraksjon bioassay arena og metoder at etterforskerne å evaluere insekt svaret for å begrense bølgelengder som en konkurransedyktig eller enkelt attraktiv farge. Utstyr og eksperimentelle modifikasjoner presenteres for nattlige, dagaktive, terrestrial og antenne insekter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. bioassay-komponenter

  1. Terrestriske arena konstruksjon
    1. Bruk metall blinkende materiale strimler av 2,54 cm lengde. Bøy hver stripe i en halvsirkel har en diameter på 15.24 cm (figur 1).
    2. Koble endene av hver halv sirkel og danne en cloverleaf figur fra de fire stykker. Koble en låsing mutter og en #10 maskin skrue til endene av hver halv sirkel å holde dem sammen.
    3. Bore et hull i midtpunktet av hver halvsirkel 0,79 cm nederst på arenaen. Påføre LED 5 mm holders å hull boret i hver halvsirkel.
    4. Å redusere refleksjon, spray matt svart spraymaling gjennom arena14 å dekke metall blinkende. Bruk en flytende tekstur (f.eks., Fluon) å hindre insekter i å klatre ut av arenaen over spraymaling.
  2. Antenne arena konstruksjon
    Merk: Antenne arena har en lignende størrelse og dimensjon til terrestriske arena; men polyacrylic materiale ble brukt (figur 2). Det klare plasten gir alle lyset passerer gjennom. Det klare plasten hindrer refleksjon som forstyrrer eksperimentet. Det klare plasten kan også å bli filmet.
    1. Tråd lengst poeng av hver halvsirkel tillate samling beholdere for å skru på hovedarena. Kløverblad figuren sender insekter tilbake til midten. Ingen eksterne hjørner oppmuntre insekt menigheten; men har samling koppene for antenne insekter alle interne hjørner og ingen eksterne hjørner.
    2. For den antenne arena samling containere, bruk skrukork polymethylpentene beholdere (125 mL, 64 mm ytre diameter, 74 mm høyde) og bore bunnen (15 mm diameter).
    3. I hver av beholderne bottoms, påføre gjengede rør (15 mm diameter, 60 mm lengde).
    4. Fest en 5 mm LED holder lokkene i hver beholder. Tråd samling bur lokket på store munnstykket samling buret.
    5. Sete gjengede røret fra arena i små hullet på motsatt side av samlingen buret. Sikre at hele gjengede røret slutten er flush med veggene i arenaen og passer godt til samling buret.
      Merk: Gjengede røret var laget av Teflon. Teflon gløder fargen på LED som buret sitt samling. Gjengede røret var det eneste elementet som gløder med hensyn til insekter i arenaen på grunn av en grå plast substans på bunnen av hver samling buret.
  3. Elektronikk forberedelse
    Merk: Det er ulike farger (bølgelengder) lysdioder er avhengige av kjemikalier som brukes til å konstruere LED og derfor et bredt spekter av farger er mulig (tabell 1).
    1. Alle eksperimenter, bruke standard 5 mm lysdioder med positive og negative leder. Lysdiodene kan være smale i sin rekkevidde av bølgelengde ± 5 nm eller kan være stor i deres bølgelengde utvalg ± 50 nm.
    2. Definere visningsvinkelen som maksimal konisk vinkel som en skjerm kan vises. Disse er ellers kjent som gjennom hull lysdioder. Gjennom hull LED krever enten gjennom hull spor på en PCB, en ledningsnett, eller ledninger som er loddet til de negative og positive terminalene. Overflate mount LED krever riktig PCB design og loddetråd innlemme dem.
    3. Innlemme Reostater i elektronikk til å styre LED strøm inntak (LED intensitet) (Figur 3). Bruk en lys spectrometer (W/m2) intensitet og bølgelengde (nm) av lysdioder for hvert eksperiment.

2. arena forberedelse

  1. Før mellom hver replikere nøye demontere og rengjøre arena med en luktfri, slipende såpe i varmt vann for å fjerne lukt eller uønsket Oktenol. Bruk en svamp med et lavt slipemiddel for å unngå riper arena.
    1. Grundig tørr arena og sett den til side til slutt air tørking i forberedelse til neste rettssaken. Dette hindrer vannflekker fra utviklingsland. Riper og vannflekker kan forårsake brytning på disse punktene på arenaen. Skjevheter opprette feil i resultatene.
    2. Når arena må håndteres, slitasje nitrilhansker for å unngå å innføre menneskelige lukt på overflater av arenaen.
  2. Registrere følgende miljøforholdene: fuktighet, temperatur, lufttrykk, dato, start-/ sluttidspunkt, eksterne lyskilder og LED posisjoner i arena. Skriv ned disse verdiene og overvåke deres trender fra eksperimentet å eksperiment. Dette sikrer riktige uniform eksperimentelle gjentak, posten miljøforholdene før og etter gjentak.
  3. Eksperimenter
    Merk: Dette oppsettet er i stand til å enkelt og konkurransedyktig lys testing.
    1. Enkelt lys tester, bruke en lysemitterende på en enkelt kløverblad mens resten av kløver bladene ikke emitting fra dem.
    2. For konkurransedyktige eksperimentet avgi lys fra alle fire cloverleafs med ulike egenskaper i konkurranse med hverandre.
      Merk: Andre eksperimenter kan vurdere betydningen av insekt tilstand (matet, sultet, teneral, paret, blod matet, osv.) og livshistorie. Innspilling/atferdsanalyse programvare kan brukes til å registrere og kvantifisere atferd. For nattlige eksperimenter, kan infrarøde kameraer brukes til å vise insekter, som vil lyse hvite i IR-opptak i motsetning til mørk arena.
    3. Rotere LED posisjoner etter hvert replikere til å kontrollere den potensielle effekten av lys interferens mellom motstridende lyskilder og noen miljømessige preferanser.
    4. For å telle antall samlinger for insekter som ikke går inn i hull, bruk infrared LEDs, et infrarødt kamera og programvare14. Videoinnspillingen viser antall bille besøk til hver LED. En samling er ikke regnet med mindre insekt flytter fra midten av arenaen mot en LED i motsetning til etter en kant forbi en LED.
  4. Arena oppsett
    1. Definere en pedestal med fire identiske mason krukker og plassere en svart Lin klut oppå. Lin er svarte å holde lys reflekteres av bunnen av arenaen.
    2. Plass bunnplate arenaen på denne sokkelen. Montere hvert stykke arena på denne platen.
    3. Plass kløverblad arena sentralt rundt utgivelsen punktet i bunnplate. Holde dette sentrale lar insekter å dukke opp fra midten av eksperimentet, gi dem ingen innledende preferanse.
    4. Installere lys emitting diodene (lys) i beholderen fire samling LED holdere.
    5. Definer det elektrisk utstyret å styre lys.

3. Start bioassay

  1. Plass klart lokket på arenaen over arenaen parallelt sokkelen. Hvis insekter slippes gjennom sokkelen, skal arena lokket allerede være på arenaen. Dette inneholder insekter og gir visuell vurdering eller videoopptak (terrestrial insekter).
    1. Om nødvendig av arten (antenne insekter) midlertidig nakkens insekter å tillate lesing fra merdene (fremveksten) og tillate arena introduksjon. Slå insekter ned kan gjøres med midlertidig med karbondioksid eller en kald temperatur (< 20 ° C for myggene-4.0 ° c for myggen).
    2. Bruker en aspirator, ekstra ønsket sex og antall insekter fra slått ned insekter. Deretter introdusere insekter inn i arena gjennom bunnplate. Bruk et rør eller annet aspirasjon verktøy for insekt utvinning. For mye håndtering eller lange eksponeringer vil redusere overlevelse.
    3. Starte bioassay opptak/vurdering før akklamasjon å bekrefte insekter er svare bare lyset og ikke viser en flukt respons. Å unngå escape svar, en gir en Akklimatisering tid av 1 time å insekter før slå på elektronikk. Insekter orientere mot bestemte bølgelengder av lys under deres flukt svar når den plasseres i et nytt miljø.

4. slutt og kvantifisere bioassay

Merk: Varigheten av hver eksperimentelle replikere vil avhenge insekt atferd og responsen timing, generelt bruker en lengre eksponering, flere svar pleier å være mer informativ.

  1. Registrere miljøforhold.
  2. Stopp opptak som av infrarødt kamera, hvis brukt.
  3. I tilfelle du bruker samling kamre: etter hver replikere, plassere kløverblad arena i en fryser for å drepe insekter for kvantifisering. Arenaen bør ikke stå i fryseren for lenge fordi frysing miljøet kan føre til sprekk.
  4. Kvantifisere insekt oppførsel av telle insekt respondere i samlingen burene eller analysere video. Insekter som forble i kløverblad arenaen var regnet som har gjort noe valg. For eksempel ble Culicoides funnet for å være mest tiltrukket UV lys sammenlignet med gjør valg7.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Terrestriske arena er brukt til å forbedre pest overvåking feller for rød mel biller14 og antenne arenaer for hessian fluer15 og skarp myggene7. Selv om kløverblad arenaene var lik, betingelsene for hver insekt Art var annerledes og innkvartert evalueringen av nattlige eller dagaktive insekter som kan gjennomgå eller fly. Enda viktigere disse laboratorium studier oversatt til feltet programmer for å overvåke insekt pest befolkningen endringer, innføring av invasiv Art, befolkningen undertrykkelse eller sykdom vektor risikovurderinger.

Rød mel biller, en lagret produktet pest, ble evaluert i terrestriske arena og filmet bruker et infrarødt kamera14. Svar ble vurdert positivt for en farge, hvis en bille flyttet mot og kontaktet LED. Arena installasjonsprogrammet en konkurransedyktig stil med fire lamper eller tre lys og en mørk tom for kontroll. Prøve dataene angir biller var mest tiltrukket til nær UV LED (390 nm) (Figur 4). Denne informasjonen ble brukt til å lage en bedre rød mel beetle felle med en åttekantet UV LED-matrise, som resulterte i en 20% økning i samlingen sammenlignet med en 1% innspillingshastigheten med den opprinnelige feromon attractant alene.

Hessian flyr, hvete feltet beskjære skadedyr evaluert for foto attraksjon med antenne arena med en diurnal angi15. Hessiske fluer var mest tiltrukket grønne bølgelengder med høy intensitet (figur 5). Kvinner foretrakk de grønne spektra av 502 og 525 nm. Men foretrakk begge kjønn høy intensitet lys (16 M/m2). Dette er den første rapporten Hessian fly attraksjon å velge slippes ut bølgelengder og intensiteter av lysdioder under kontrollerte forhold. Disse resultatene brukes til å utvikle en bedre Hessian fly oppdagelsen felle for uninfested hvete felt.

Sykdom vektor skarp midge, Culicoides sonorensis overføre virus, som i cervids, ovids og bovids kan medføre epizootisk hemoragisk sykdom eller blå tungen sykdom. C. sonorensis ble testet med antenne arena nattlige vilkår til å bestemme de optimale fargene som tiltrakk sukker søker skarp myggene7. Den høyeste andelen skarp myggene ble tiltrukket av ultrafiolett (UV) lys og lysintensiteten var viktig med smarteste lys blir mest attraktive (figur 6). Sukker-søker og flukt atferd ble utløst av 355 nm og 365 nm i bølgelengde henholdsvis og skarp myggene skilles mellom tofargede lyset. Bruke disse bølgelengder, tiltrekningen av C. sonorensis til lys feller kan forbedres og lysene innlemmet i insecticidal sukker feller16.

Figure 1
Figur 1: denne tegningen gjenspeiler dimensjonen av terrestriske arenaen. Utgivelsen pek midt på arenaen samt poeng LED vedlegg på toppen av hver halv sirkel er merket. Også presentert er et eksempel på en konisk lys projeksjon fra en LED. Den optimale visningsvinkelen til LED er 45° selv om den arena designen gir mer smale eller brede visningsvinkler som halve sirkler vil begrense lys crossover unntatt midt på arenaen. Terrestriske arena har en lavere profil forhold til antennen arena fordi insekter ikke trenger plass til å fly, som hjelper videoopptak fokuserer på insekter. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: antenne lys analysen arena konstruert fra klar akryl selv om den har de samme design fordeler av terrestriske arena, men gir flere vertikal mellomrom for flygende insekter evaluering. Fire samling beholdere har LED av ulike bølgelengder belyse deres respektive toppen av kløverblad. Denne illustrasjonen viser arena definere konkurranse stil med rød, grønn, blå og UV lys. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: den elektriske skjematisk av en 6 V DC-strømkilde knyttet til Reostater (potentiometers) som kontrollerer kraften til hver LED (lysdiode) så intensiteten av hver LED kan justeres uavhengig. Nøytral tetthet papir kan også brukes til å redusere intensiteten uten å endre de slippes ut bølgelengdene. Bølgelengde og bølgelengdeområde justeres ved å velge forskjellige LED kjemikalier. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: (Øverst) Bevegelsen av ti røde mel biller i 5 min ble vurdert i kløverblad arena. Besøk var definert bevegelse mot en farge resulterer i berøre LED. Testet fargene var blå (410 nm) og UV (390, 380 og 360 nm). Standard feilfelt angis og betydelige forskjeller er merket med bokstavene (p < 0,0001), forskjellige bokstaver angir signifikant forskjellig måte. (Nederst) Videre evaluering av bevegelse med lavere intensitet farger var over, men med fargene UV (390 nm), grønn (555 nm), rød (655 nm), og gul (587 nm). (Figur 4 ble gjengitt fra Duehl et al. 2011 med tillatelse.) Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 5
Figur 5: menn og kvinner hessiske fluer evaluert for foto attraksjon seg å forhindre cofounding faktorer. (Vekselstrøm) er kvinner direkten svar og (D-F) er mannlige. Betydelige forskjeller angis med forskjellige bokstaver (P < 0,05), forskjellige bokstaver angir signifikant forskjellig måte. (A og D) Både menn og kvinner ble tiltrukket betydelig grønn (527 nm) sammenlignet med rød (624 nm), gult (590 nm), og blå (472 nm). (B og E) De grønne spectra 502-525 nm var mest attraktive og (C og F) lysintensiteten var viktig. (Figur ble gjengitt fra Schmid et al. 2017 med tillatelse.) Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 6
Figur 6: (Øverst) Culicoides sonorensis ble tiltrukket betydelig mer for UV-lys enn blå, grønn eller rød. Forskjellige bokstaver angir signifikant forskjellig betyr (P < 0,05), forskjellige bokstaver angir signifikant forskjellig måte. Sukker måltider ble gitt før hver replikere. (Nederst) Tiltrekning til lysintensiteten ble vurdert ved hjelp av Culicoides sonorensis bevegelse mot samme UV lys, men på forskjellige intensiteter (4, 8 og 12 watt) og et blått lys (24 watt). (Figur ble gjengitt fra Snyder et al. 2016 med tillatelse.) Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Ekstra tabell 1: generelt LED tabell for bølgelengder. Det finnes flere smale LED bølgelengder; Denne listen viser bare brede områder av lysdioder som finnes i insekt visjon spectra. Klikk her for å laste ned denne filen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Foto-attraksjon bioassay er et viktig verktøy for å finne den optimale attraktive farger og minimere alternativene for feltforsøk på disse fargene. Imidlertid flere faktorer må vurderes når du optimaliserer bioassay for en bestemt insekt inkludert: enkelt lys vs. konkurransedyktige lys eksperimenter, lysstyrke, optimale spectral området, ambient lys forstyrrelser, statlige insekter og naturlige atferd som kan begrense mulige svar.

De fleste insekter har noen phototaxis, som kan være en medfødt rømme mekanisme forårsaker insekt å bevege seg mot lyset. Dette kan testes ved å gi en enkelt lyskilde i arena og la de andre tre sidene mørke. Men en konkurransedyktig test vil ha fire farget lys og demonstrerer farge preferanse basert på hvert lys insekt svaret. Bioassay brukere må bestemme om de er testing for lys attraksjon eller lys preferanse. Konkurransedyktig arena kan defineres til å se etter frastøting også. Husk at insekter ikke kan fortsatt gjøre et utvalg av lys farge, hvis de bo i arena og ikke orientere mot en lys. Disse ingen valg insekter må regnskapsføres i resultatene.

Lys emitting diode lysstyrke må alltid tas i betraktning, og arena lys må økes eller senkes til samme intensitet; Derfor er det viktig å teste lysstyrke LED før hvert forsøk med en foto spectrometer. Potentiometers er viktig for å kontrollere spenningen til hver LED, som i sin tur justerer lysstyrken. Kommersielt produsert lysdioder variere spenning svar og så selv i en gruppe av lysdioder med de samme spectra, hver annen LED må vurderes, og potensiometeret justert før bruk. Selv med denne teknikken nøytral tetthet er filtre noen ganger nødvendig å redusere intensiteten i svært lyse pærer. Snyder et al. (2016) 8 og Schmidt et al. (2017) 10 fant lysstyrke å være en betydelig faktor i skarp midge og Hessian fly samlinger med lysere lys samle proporsjonalt flere insekter, selv om bølgelengde var den viktigste faktoren etterfulgt av lysstyrke.

Bioassay brukere vil ha nytte av testing smale bølgelengde spectra lysdioder. Snyder et al. (2016) 8 finner C. sonorensis stand til å skille mellom bølgelengder (10 nm fra hverandre) og dette skapte svært forskjellige atferdsdata svar. Smale bølgelengde lysdioder vil derfor være nødvendig å bestemme optimale smale bølgelengden til lyset for en gitt atferd.

Ytre lys kan forstyrre lys attraksjon. Schmidt et al. (2017) 10 fant hessiske fluer mye mer tiltrukket av farger når gitt en mørk arena enn under en tent. Men i en crepuscular arena (delvis lyser), fungert lysene best. En mørk arena blokkerer 100% av ytre lys og brukes til å teste nattlige insekter i mer naturlig visuelle miljøet. Arenaene kan også brukes i naturlig lys til å simulere visuelle miljøet av en dagaktive insekt, en viktig faktor for å sikre attraksjon under virkelige verden overlapping forhold.

Selv om visuell attraksjon er viktig, kan olfactory Oktenol (feromoner, kairomones) legges til som Duehl et al. (2010) 16. tiltrekningen synergistisk økt felle samling. En langdistanse attractant kan hjelpe i å bringe enkeltpersoner nærmere til attraktive lyskilden og kraftig økning overtrykkes attraksjon14. For eksempel var feromon slagkrysseren røde mel biller en kvinne sex feromon. Men kan tester ulike stadier som matet, unmated, nylig dukket opp, ovipositing, mat/vert søker eller andre stater være viktig fordi de har unike attraksjonene som kan de ulike livshistorie stadiene som larver, pupae eller voksne. Overlapping miljøet bør også vurderes i mat rike miljøer som mel mills mat lukt basert Oktenol blir mindre effektiv.

Arenaer kan endre eller påvirke insekt atferd selv under kontrollerte forhold som fast lys, fuktighet og temperatur. Små områder eller åpninger kan være restriktiv naturlig insekt bevegelser. For eksempel i en prøve Culex tarsalis mygg inn ikke de smale åpningene i samlingen merdene (LW Cohnstaedt, personlig observasjon) og huse fluene komme inn ikke i mørke områder11. I noen tilfeller kan disse løses ved hjelp av klebepapir og fange insekter som gå nær lysene, men kommer ikke burene eller videotaping insekt atferd. Derfor må alle laboratorium bioassay resultater bekreftes feltforsøk.

Den lette bioassay arena og protokoll beskrevet er unike fordi de kan tilpasses alle terrestriske eller antenne insekt arter. Arenaene design kontoer for høy aktivitet og lav aktivitet insekter (kløverblad figuren) og lysene er fleksible for ulike konkurransedyktig og ikke-konkurrerende analyser. Til slutt rommer denne metoden også de fleste noen livshistorie egenskap (slik som sultet, sukker/vert søker, livshistorie scenen, etc.). Disse grunnene å gjøre denne lys bioassay en universell og fleksibel protokoll for minimal tid eller penger investert.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen

Acknowledgements

Ingen

Materials

Name Company Catalog Number Comments
metal flashing material
#10 stainless steel machine screw Stock
#10 stainless steel locking nut Stock
5 mm LED holder Radio Shack Corp 276-080
matte black spray paint Stock
Fluon Stock
molded polyacrylic
screw top Nalgene Thermo Fisher Scientific Nunc polymethylpentene 125 mL, 64 mm outer diameter, 74 mm height
Threaded Teflon pipes Stock 15 mm diameter, 60 mm length
StellarNet light spectrometer Stellar Net, Inc BLACK Comet C-SR-25
LED infrared light source Tracksys LTD
infrared video camera Panasonic Corp WV-BP330 Panasonic CCTV camera
MEDIACRUISE software Canopus Corp

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Briscoe, A. D., Chittka, L. The evolution of color vision in insects. Annu. Rev. Entomol. 46, 471-510 (2001).
  2. Srinivasan, M. V., Venkatesh, S. Embodying natural vision into machines. From living eyes to seeing machines. Oxford University Press. U.K. 249-265 (1997).
  3. Srinivasan, M., Moore, R. J. D., Thurrowgood, S., Soccol, D., Bland, D. From Biology to engineering: insect vision and applications to robotics. Frontiers in sensing. Barth, F. G., Humphrey, J. A. C., Srinivasan, M. V. Springer. Vienna, Austria. 19-39 (2012).
  4. Allan, S. A., Day, J. F., Edman, J. D. Visual ecology of biting flies. Annu.Rev. Entomol. 32, 297-316 (1987).
  5. Brown, A. W. A. Studies of the responses of the female Aedes mosquito Part V. The role of visual factors. Bull. Entomol. Res. 44, 567-574 (1953).
  6. Brown, A. W. A. Studies on the responses of the female Aedes mosquito Part VI. The attractiveness of coloured cloths and Canadian species. Bull. Entomol. Res. 45, 67-78 (1954).
  7. Snyder, D., Cernicchiaro, N., Cohnstaedt, L. W. Sugar-feeding status alters biting midge photoattraction. Med. Vet. Entomol. 30, 31-38 (2016).
  8. Menzel, R., Shmida, A. The ecology of flower colours and the natural colour vision of insect pollinators: The Israeli flora as a study case. Biological Reviews. 68, 81-120 (1993).
  9. Walker, W. F. Responses of selected thysanoptera to colored surfaces. Environ. Entomol. 3, 295-304 (1974).
  10. Lelito, J. P., Fraser, I., Mastro, V. C., Tumlinson, J. H., Baker, T. C. Novel visual-cue-based stickytraps for monitoring of emerald ash borers, Agrilus planipennis (Col., Buprestidae). J. Appl. Entomol. 132, 668-674 (2008).
  11. Diclaro, J. W. II, Cohnstaedt, L. W., Pereira, R. M., Allan, S. A., Koehler, P. G. Behavioral and Physiological Response of Musca domestica to Colored Visual Targets. J. Med. Entomol. 49, (1), 94D100 (2012).
  12. Steverding, D., Troscianko, T. On the role of blue shadows in the visual behaviour of tsetse flies. Proc. R. Soc. Lond. B. 271, 16-17 (2004).
  13. Cohnstaedt, L. W., Gillen, J. I., Munstermann, L. E. Light-emitting diode technology improves insect trapping. J. Am. Mosq. Control Assoc. 24, 331-334 (2008).
  14. Duehl, A. J., Cohnstaedt, L. W., Arbogast, R. T., Teal, P. E. A. Evaluating light attraction to increase trap efficiency for Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae). J. Economic Entomol. 104, 1430-1435 (2011).
  15. Schmid, R. B., Snyder, D., Cohnstaedt, L. W., McCornack, B. P. Hessian Fly (Diptera: Cecidomyiidae) Attraction to Different Wavelengths and Intensities of Light-EmittingDiodes in the Laboratory. Environ. Entomol. 46, (4), 895-900 (2017).
  16. Cohnstaedt, L. W., Snyder, D. Design features of a proposed insecticidal sugar trap for biting midges. Vet. Ital. 52, (3-4), 265-269 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics