चूहा और खरगोश Aneurysm मॉडल में Aneurysm भ्रम और जनक धमनी Patency के मूल्यांकन के लिए फ्लोरोसेंस एंजियोग्राफी

Neuroscience

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Summary

हम एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करने के लिए कुशलतापूर्वक aurysm perfusion और चूहों और खरगोशों में sidewall aneurysm के पोत patency का मूल्यांकन, फ्लोरेसेइन आधारित फ्लोरोसेंट वीडियो एंजियोग्राफी (FVA) का उपयोग कर. 92.6% की एक सकारात्मक भविष्य कहनेवाला मूल्य के साथ, यह कोई विशेष उपकरणों की आवश्यकता के साथ एक सरल लेकिन बहुत प्रभावी और किफायती विधि है.

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Strange, F., Sivanrupan, S., Gruter, B. E., Rey, J., Taeschler, D., Fandino, J., Marbacher, S. Fluorescence Angiography for Evaluation of Aneurysm Perfusion and Parent Artery Patency in Rat and Rabbit Aneurysm Models. J. Vis. Exp. (149), e59782, doi:10.3791/59782 (2019).

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Abstract

मस्तिष्क aneurysm उपचार पूरा occlusion को प्राप्त करने पर केंद्रित है, साथ ही माता पिता की धमनी में रक्त के प्रवाह के संरक्षण. फ्लोरेसिन सोडियम और इन्डोसाइनिन ग्रीन का उपयोग क्रमशः रक्त प्रवाह और वाहिका परफ्यूजन स्थिति के अवलोकन को सक्षम करने के लिए किया जाता है। इस अध्ययन का उद्देश्य वास्तविक समय रक्त प्रवाह, पोत भ्रम की स्थिति और खरगोशों और चूहों में sidewall anureysms के शामिल होने के बाद aneurysms के occlusion सत्यापित करने के लिए FVA लागू करने के लिए है, साथ ही इन प्रजातियों में प्रक्रिया को मान्य करने के लिए.

बीस sidewall aneurysms एक दाता खरगोश की ग्रीवा धमनी पर एक decellularized धमनी पोत थैली suturing द्वारा 10 खरगोशों में बनाया गया था. इसके अलावा, 48 चूहों में 48 माइक्रोसर्जिकल साइडवॉल एन्युरिज्म बनाए गए थे। निर्माण के बाद एक महीने में अनुवर्ती कार्रवाई के दौरान, माता-पिता धमनी/एन्युरिज्म कॉम्प्लेक्स को विभाजित किया गया था और एफवीए खरगोशों में एक कान की नस कैथेटराइजेशन और चूहों में एक ऊरु शिरा कैटराइजेशन के माध्यम से एक अंतःशिरा फ्लोरोरेसिन (10%, 1 एमएल) इंजेक्शन का उपयोग करके किया गया था। तब एन्युरिज्म का काटा गया था, और पैटेंसी का बड़े-बड़े मूल्यांकन किया गया था।

मैक्रोस्कोपिक रूप से, खरगोशों में 16 एन्युरिज्म में से 14 ने पूरी तरह से कब्जा लुमिनियन के साथ कोई अवशिष्ट जनक धमनी भ्रम का संकेत नहीं दिया, हालांकि 11 (79%) FVA द्वारा पता लगाया गया. तकनीकी समस्याओं के कारण चार एन्युरिज्म को बाहर रखा गया था। चूहों में, अवशिष्ट एन्युरिज्म परफ्यूजन को 48 मामलों में से 25 में मैक्रोस्कोपिक रूप से देखा गया था। 23 में से, भ्रम के स्थूल सबूत के बिना, FVA 22 anureysms (96%) की घटना की पुष्टि की. एफवीए से जुड़ी कोई प्रतिकूल घटना नहीं थी। फ्लोरेसीन आसानी से लागू होता है और कोई विशेष उपकरण की आवश्यकता नहीं है। यह खरगोशों और चूहों के साथ एक प्रयोगात्मक सेटिंग में माता-पिता धमनी अखंडता और anureysm patency / अवशिष्ट भ्रम का मूल्यांकन करने के लिए एक सुरक्षित और अत्यंत प्रभावी तरीका है। एक विपरीत एजेंट के रूप में fluorescein का उपयोग FVA anureysms और अंतर्निहित पोत की कमी को नियंत्रित करने में प्रभावी प्रतीत होता है और यहां तक कि बाईपास सर्जरी के लिए अनुकूलित किया जा सकता है.

Introduction

पूर्ण एन्युरिज्म विलोप और माता-पिता धमनी अखंडता के साक्ष्य एन्युरिज्म सर्जरी में अत्यंत महत्वपूर्ण है। इस तरह के डॉपलर सोनोग्राफी, पारंपरिक सेरेब्रल एंजियोग्राफी (डीएसए), गणना टोमोग्राफी एंजियोग्राफी (सीटीए) या चुंबकीय अनुनाद एंजियोग्राफी (एमआरए)1, के रूप में माता-पिता धमनी पेटेंसी और एन्युरिज्म occlusion, की पुष्टि करने के लिए कई विकल्प हैं। 2. हालांकि, ये महंगे और समय लेने वाली विधियां हैं जो अक्सर प्रयोगशाला सेटिंग में उपलब्ध नहीं होती हैं। इसके अलावा, वे इस तरह के विकिरण जोखिम या आंदोलन कलाकृति से बचने के लिए प्रयोगात्मक जानवरों के अतिरिक्त sedation के लिए की जरूरत के रूप में प्रासंगिक दुष्प्रभाव हो सकता है।

नए endovascular उपकरणों की बढ़ती संख्या के साथ उभर तेजा, ऐसे उपकरणों के पूर्व नैदानिक परीक्षण के लिए लगातार जरूरत है. हालांकि, इन अध्ययनों अक्सर पोस्टमार्टम विश्लेषण पर भरोसा करते हैं (जैसे, मैक्रो पैथोलॉजी और हिस्टोलॉजी) और गतिशील भ्रम पर जानकारी की कमी. इसके अलावा, शोधकर्ता के लिए यह एक प्रयोगात्मक शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के दौरान तत्काल और विश्वसनीय जानकारी प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है. फ्लोरोसेंट एंजियोग्राफी एक लागत प्रभावी और दृश्य तकनीक1,3,4प्रदर्शन करनेकेलिए आसान है।

इस प्रकार, indocyanine हरे (आईसीजी) वीडियो एंजियोग्राफी अक्सर नैदानिक neurosurgical प्रक्रियाओं में प्रयोग किया जाता है और बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है5,6. Fluorescein वीडियो एंजियोग्राफी (FVA) एक वैकल्पिक तकनीक है, एक फ्लोरोसेंट संकेत है कि मानव दृष्टि की तरंगदैर्ध्य रेंज के भीतर है बनाने के अतिरिक्त लाभ के साथ, और इस तरह एक विस्तारित स्पेक्ट्रम अवरक्त कैमरे के बिना नग्न आंखों से देखा जा सकता है 7. फ्लोरेसीन वीडियो एंजियोग्राफी कम अक्सर नैदानिक मस्तिष्कवाहिकीय सर्जरी में प्रयोग किया जाता है और प्रयोगात्मक सेटिंग्स में FVA पर रिपोर्ट दुर्लभहैं 1,4.

इस रिपोर्ट का उद्देश्य चूहे और खरगोश preclinical मस्तिष्कवाहिकीय अनुसंधान में FVA के अनुप्रयोगों की व्यवहार्यता और गुंजाइश प्रदर्शित करने के लिए है.

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Protocol

कृन्तकों को पशु देखभाल सुविधा में रखा गया था और प्रयोगों की समीक्षा की गई और बर्न, स्विट्जरलैंड विश्वविद्यालय (बीई 108/16) और (बीई65/16) में पशु कल्याण समिति द्वारा अनुमोदित किया गया। सभी जानवरों को भोजन और पानी के लिए नि: शुल्क उपयोग के साथ एक मानक प्रयोगशाला आहार पर बनाए रखा गया. सभी पशु प्रयोगों 3Rs (बदलाव, कमी और शोधन) के सावधानी से विचार के तहत आयोजित किया गया. दस महिला न्यूजीलैंड सफेद खरगोश और 48 पुरुष Wistar चूहों शामिल थे. आने के दिशा निर्देशों का कड़ाई से पालन किया गया8.

नोट: एक दाता खरगोश की ग्रीवा धमनी पर एक decellularized धमनी पोत थैली suturing द्वारा 10 खरगोशों में बीस sidewall aneurysms बनाया गया था. इसके अतिरिक्त 48 चूहों में 48 माइक्रोसर्जिकल साइडवॉल एन्युरिज्म बनाए गए थे जिनका वर्णन4,9से पहले किया गया था। इमेजिंग प्रक्रिया और स्थूल विश्लेषण anureysm निर्माण के बाद 4 सप्ताह किया गया था.

1. फ्लोरेसीन वीडियो एंजियोग्राफी के लिए आवश्यक सामग्री की तैयारी

  1. एक नीले bandpass फिल्टर पर टैप करके टॉर्च को संशोधित (सामग्री की तालिकादेखें), जो एक उत्तेजना फिल्टर के रूप में कार्य करेगा. मशाल तो केवल नीले प्रकाश का उत्सर्जन करना चाहिए. अनफिल्टर्ड लाइट के किसी भी रिसाव से बचने के लिए काले टेप का उपयोग करें।
  2. एक हरे रंग की bandpass फिल्टर के साथ कैमरे (जैसे, माइक्रोस्कोप से जुड़ी) से लैस (सामग्री की तालिकादेखें), जो एक उत्सर्जन प्रकाश फिल्टर के रूप में कार्य करेगा. केवल हरी बत्ती अब के माध्यम से पारित करने में सक्षम होना चाहिए.

2. कार्यस्थल और सामग्री की तैयारी

  1. कीटाणुनाशक समाधान के साथ कार्यक्षेत्र को संक्रमित करें।
  2. संदूषण को रोकने के लिए बाँझ पर्दे के साथ तालिका को कवर करें।
  3. सर्जरी के लिए बाँझ उपकरणों का प्रयोग करें।

3. सर्जरी के लिए जानवरों की तैयारी

  1. जानवरों का वजन करें।
  2. संज्ञाहरण को प्रेरित करें और वजन के अनुसार खुराक को समायोजित करें।
    1. खरगोशोंके लिए, संतुलित संज्ञाहरण शुरू करते हैं। इंजेक्शन के दौरान एक हाथ से उनकी आंखों को ढालें ताकि उनकी डर प्रतिक्रिया को कम किया जा सके। जानवरों को अलग करने में मदद करने के लिए एक चादर के साथ पिंजरे को कवर।
    2. इंजेक्शन से पहले 4% isoflurane और 96% ऑक्सीजन के साथ एक गैस कक्ष में चूहों Anesthetize.
  3. संज्ञाहरण की गहराई की निगरानी करें। जानवरों सो रहे हैं सुनिश्चित करने के लिए उनके उंगलियों के बीच चुटकी।
    1. उनकी पीठ पर खरगोशों की स्थिति. उन्हें प्रतिक्रिया नहीं करनी चाहिए।
    2. चूहोंके लिए , उनकी पूंछ चुटकी और सुनिश्चित करें कि कोई प्रतिक्रिया नहीं मनाया जाता है.
  4. सूखापन को रोकने के लिए कृन्तकों की आंखों पर मरहम लगाएं। निगलने के किसी भी मौका से बचने के लिए चूहों की जीभ बाहर खींचो.
  5. संज्ञाहरण के संरक्षण के साथ शुरू करो.
    1. खरगोशोंके लिए, कैथेटराइज़ (22 जी परिरक्षित चतुर्थ कैथेटर इंजेक्शन बंदरगाह के साथ, सामग्री की मेजदेखें) कान की नस. संतुलित संज्ञाहरण बनाए रखें। एकाधिक एक साथ इंजेक्शन सक्षम करने के लिए एक तीन तरह stopcock का प्रयोग करें.
    2. चूहोंके लिए 50 मिलीग्राम/किलोग्राम केटामाइन हाइड्रोक्लोराइड और 0.5 मिलीग्राम/किलोग्राम मेडेटोमाइडी हाइड्रोक्लोराइड इंट्रापर्टोनली इंजेक्ट करें। सर्जरी के दौरान एक हानिकारक टो चुटकी के साथ संज्ञाहरण की निगरानी करें। प्रतिक्रिया के मामले में, अतिरिक्त संवेदनाहारी प्रशासन.
  6. एक सुपाच्य स्थिति में बोर्ड पर जानवरों टेप और बारीकी से चीरा स्थान दाढ़ी। बीटासेप्टिक के साथ क्षेत्र को संक्रमित करें।
    1. खरगोशोंके लिए, गर्दन को कीटाणुरहित करना, विशेष रूप से स्टर्नोक्लेडोमास्टॉइड मांसपेशियों के आसपास।
    2. चूहोंके लिए, क्षेत्र को मूत्राशय से ट्रांसवर्स बृहदान्त्र को कीटाणुरहित करता है.
  7. सर्जरी के दौरान एक मुखौटा के माध्यम से ऑक्सीजन प्रशासन और एक हीटिंग पैड के साथ शरीर के तापमान को बनाए रखने।

4. धमनी की तैयारी

  1. सर्वोत्तम परिणामों के लिए, चुने गए पोत को आस-पास के ऊतकों9,10से पूरी तरह अलग करें .
    1. चूहोंके लिए, पूंछ नस की पहचान (कम इनवेसिव, अधिमानतः जीवित जानवरों के लिए इस्तेमाल किया) या fluorescein इंजेक्शन4,11के लिए एक ऊरु शिरा विच्छेदन .
      नोट: खरगोशोंके लिए, फ्लोरेसीन इंजेक्शन के लिए जहाजों का कोई और विच्छेदन की आवश्यकता नहीं है क्योंकि कान की नस पहले से ही संज्ञाहरण के लिए उपयोग की जा रही है।
  2. आसपास के ऊतकों के साथ इसके विपरीत बढ़ाने के लिए चुने गए पोत के तहत एक सफेद पैड स्थिति।
  3. विच्छेदन धमनी पर माइक्रोस्कोप के लिए घुड़सवार कैमरे को फोकस करें।

5. फ्लोरेसीन वीडियो एंजियोग्राफी

  1. फ्लोरेसेइन सोडियम (100 मिलीग्राम/एमएल) से भरे 5 एमएल सिरिंज को कवर करें, प्रकाश के जोखिम से बचाने के लिए एल्यूमीनियम पन्नी के साथ सामग्री की तालिकादेखें। रोशनी बंद करें (जितना संभव हो) और fluorescein सोडियम नसों में इंजेक्ट करें. फोटोब्लीचिंग को रोकने के लिए अंधेरे में इंजेक्शन।
    1. खरगोशोंके लिए, कैथेटरीकृत कान की नस में थ्री-वे स्टॉपकॉक के माध्यम से 0.3 एमएल/किलोग्राम फ्लोरेसिन सोडियम इंजेक्ट करें।
    2. चूहोंके लिए, कैथेटर या 25 जी सुई के माध्यम से ऊरु शिरा में 0ण्4 एमएल/किलोग्राम फ्लोरेसिन सोडियम इंजेक्ट करते हैं।
  2. सुई या कैथेटर को 0.5 एमएल लवणीय समाधान के साथ फ्लश करें ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि सभी डाई को इंजेक्ट किया जाता है।
  3. संशोधित टॉर्च के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र रोशन.
  4. संशोधित कैमरे के साथ फिल्माने शुरू करें। इंजेक्शन के कुछ सेकंड बाद रक्त प्रवाह दिखाई देना चाहिए (चित्र 1) .
    नोट: यहाँ, हम फ्रेम दर का इस्तेमाल किया - 50 फ्रेम /

6. मैक्रोस्कोपिक विश्लेषण

  1. एन्युरिज्म और पैरेंट धमनी संकुल को पुन: व्यवस्थित करें, और सूक्ष्म-स्केडर के साथ मूल धमनी को खोलकर और मूल धमनी और एनेरीस्म के छिद्र का मूल्यांकन करके पैटेंसी स्थूल रूप से मूल्यांकन करें (चित्र 1, 2)9देखें। aneurysms के आकार को मापने. Aneurysm-पैरेंट-कला-कला-जटिल तो आगे के विश्लेषण के लिए संग्रहीत किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, ऊतक विज्ञान).

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Representative Results

सर्जरी के दौरान हृदय गति और रक्तचाप की निगरानी की गई। इस बीच, खरगोशों में हृदय गति 193/ खरगोशों के शरीर का वजन 3.05-4.18 किलोग्राम था और चूहों का वजन 335-690 ग्राम था।

हम दस में से आठ खरगोशों मेंएफ.वी.ए. तकनीकी कठिनाइयों के कारण दो खरगोशों में चार एन्युरिज्म परीक्षाएं कैमरे के साथ दर्ज नहीं की गई थीं। चूहों में एफवीए से संबंधित कोई तकनीकी कठिनाइयों की सूचना नहीं मिली थी। हालांकि, Femoral नस puncturing कठिनाइयों के कारण एक चूहे में FVA नहीं किया जा सका.

आठ खरगोशों में 16 एन्युरिज्म में से दो एन्युरिज्म ने मूल धमनी (पुष्टि की गई मैक्रोस्कोपिक रूप से) के लगातार भ्रम को दिखाया (तालिका 1देखें) जबकि एफवीए ने अवशिष्ट भ्रम के साथ पांच मामलों की पहचान की। 14 खरगोश aneurysms कोई अवशिष्ट perfusion मैक्रोस्कोपिक रूप से दिखाया, लेकिन 11 (79%) बाद में FVA का उपयोग कर पाया गया. अवशिष्ट परफ्यूजन को 48 चूहों में से 25 में स्थूल रूप से देखा गया (सारणी 1) और अन्य 23 चूहों ने अवशिष्ट परफ्यूजन के कोई स्थूल लक्षण नहीं दिखाए (चित्र 2) . उन 23 aneurysms में से 22 तो FVA (96%) का उपयोग कर की पुष्टि की गई. कुल मिलाकर, 27 मामलों में से 25 की पुष्टि की जा सकती है, जिसके परिणामस्वरूप 92.6% का सकारात्मक पूर्वानुमानमान मूल्य, 100% की संवेदनशीलता दर और 94.1% की विशिष्टता। (सारणी 2)।

संक्षेप में, 25 aneurysms अवशिष्ट perfusion दिखाया, 53 माता पिता की धमनियों पेटेंट थे और 11 पुष्टि मैक्रोस्कोपिक रूप से और वीडियो एंजियोग्राफी पर के रूप में occluded थे. वहाँ केवल मामूली खरगोशों में FVA के साथ जुड़े जटिलताओं थे; कैथेटराइजेशन के दौरान सीमांत कान नस के छिद्र के रूप में। आगे कोई प्रतिकूल घटनाओं का अनुभव किया गया. एफवीए के कारण कोई मृत्यु दर और कोई रुग्णता की सूचना नहीं मिली थी।

Figure 1
चित्र 1 : एक खरगोश में पेटेंसी कल्पना. (क) मूल धमनी की कमी फ्लोरोसेंट छवि पर स्पष्ट रूप से दिखाई देती है (फ्लोरेसीन से हरा उत्सर्जन देखा जाता है)। () यह धमनी (प्रवाह की छवि) है। दोनों धमनियों का स्थूल रूप से निरीक्षण किया गया (सी-डी) . पैनल (सी) पैनल ए से धमनी में दिखाता है; लुमेन खुला है. पैनल (डी) पैनल बी से धमनी को दर्शाता है जहां अधिग्रहण को स्थूल रूप से देखा जा सकता है। नारंगी डॉटेड रेखाएं मूल धमनी की सीमाओं को चिह्नित करती हैं। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्र 2 : एक चूहे में भ्रम की कल्पना. (ए) यह पैनल अवशिष्ट पराकृत अवशिष्ट एन्युरिज्म को दर्शाता है (लाल डॉटेड रेखा अवशिष्ट परफ्यूजन को चिह्नित करती है)। (बी) कोई भ्रम का पता नहीं लगाया जा सकता है। पैनल (सी) स्थूल जांच के दौरान पैनल ए से धमनी को दर्शाता है; एन्युरिज्म छिद्र खुला है। (डी) एक occluded anureysm पर neointima के मैक्रोस्कोपिक दृश्य. नारंगी डॉटेड रेखाएं मूल धमनी और एन्युरिज्म के गुंबद को चिह्नित करती हैं। पैनल (ए) और (बी) फ्लोरोसेंट केवल छवियों रहे हैं और हरे रंग fluorescein उत्सर्जन से पता चलता है. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Patency/Residual perfusion
मैक्रोस्कोपिक + मैक्रोस्कोपिक - फ्लोरेसीन + फ्लोरेसीन -
खरगोश 14 5 11
चूहों 23 25 22 21
कुल 25 39 27 32

तालिका 1: Patency परीक्षण. माता-पिता की धमनी की कमी केवल खरगोशों में ही परीक्षण की गई थी और इसे यहां दिखाया गया है। फ्लोरेसेइन ने मैक्रोस्कोपिक मूल्यांकन की तुलना में माता-पिता की धमनियों की अधिक कमी का पता लगाया। (इस सेटिंग में सभी चूहों एक खुला माता पिता धमनी था, के रूप में aneurysms पेट महाधमनी पर सीवन थे.) एन्युरिज्म की पटीकांत का परीक्षण केवल चूहों में ही किया गया था। एफवीए का उपयोग करते हुए 23 मैक्रोस्कोपिक रूप से पता लगाए गए पैटेंस में से 22 की पुष्टि की गई। 25 में से इक्कीस ने एफवीए पर कोई नरमी नहीं दिखाई।

मैक्रोस्कोपिक धनात्मक मैक्रोस्कोपिक ऋणात्मक कुल
फ्लोरेसीन सकारात्मक 25 27
फ्लोरेसीन नकारात्मक 0 32 32
कुल 25 34

तालिका 2: दो-से-दो तालिका FVA की विशिष्टता और संवेदनशीलता की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया।

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Discussion

FVA कृन्तकों में जहाजों की जांच करने के लिए एक आशाजनक और सीधी विधि है और वाणिज्यिक उपकरणों और ऑफ-द-शेल्फ उपकरणों के साथ किया जा सकता है। FVA किसी भी सर्जरी के दौरान लागू किया जा सकता है जहां पोत अखंडता के intraoperative मूल्यांकन की जरूरत है के रूप में जहाजों उचित विच्छेदन पहले की जरूरत है.

लेखकों ने संक्रमण, इस्किमिया और कम्पार्टमेंट सिंड्रोम12जैसी अनजाने घटनाओं के कम जोखिम के कारण धमनी इंजेक्शन के लिए शिरापरक इंजेक्शन को प्राथमिकता दी। अंतःशिरा इंजेक्शन भरोसेमंद सक्षम बनाता है, स्थानिक रूप से सीमित, अत्यधिक केंद्रित धुंधला, और छोटे डाई खुराकों की आवश्यकताहै 13,14. इसके अतिरिक्त, शिरापरक इंजेक्शन फ्लोरेसीन14,15की एक त्वरित निकासी की अनुमति देता है। एक वैकल्पिक विधि के लिए सीधे चुना धमनी में विपरीत एजेंट इंजेक्ट करने के लिए है। इस विधि इन प्रयोगों में इस्तेमाल नहीं किया गया था के रूप में जांचकर्ताओं को रक्त और fluorescein के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र contaminating को रोकने के लिए चाहता था. आदेश में इस जोखिम को कम करने के लिए, परिधीय शिरापरक विपरीत एजेंट इंजेक्शन की सिफारिश की है13.

FVA के लाभ उच्च विपरीत हैं (आसानी से मानव आँख के साथ पता लगाने योग्य), उच्च संवेदनशीलता के रूप में ऊपर दिखाया गया है (तालिका 2), कम लागत और आसान हैंडलिंग16. फ्लोरेसिन सोडियम भ्रम की जांच करने के लिए चुना विपरीत एजेंट था। अकेले दृश्यप्रकाश डाई और ठेठ हरी प्रकाश के उत्सर्जन की उत्तेजना के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. फिर भी, इस विपरीत एजेंट नीले प्रकाश (लगभग 480 एनएम) के साथ सबसे अच्छा काम करता है और एक मजबूत हरी प्रकाश (तरंग लंबाई लगभग 530 एनएम)15का उत्सर्जन करता है। Yoshioka एट अल के अनुसार, fluorescein रंग धमनी बहुत जल्दी14. इसके अलावा, फ्लोरेसिन समृद्ध रक्त का प्रवाह वास्तविक समय15,17में देखा जा सकता है। FVA के लिए आवश्यक कम समय एक और लाभ प्रस्तुत करता है; इस श्रृंखला में यह एक FVA का संचालन करने के लिए 2 मिनट (जेड 1min) के एक औसत लिया.

एक विपरीत एजेंट के रूप में fluorescein का उपयोग करने का नुकसान यह है कि यह केवल पतली धमनी दीवारों जो बहुत सावधान विच्छेदन की मांग के साथ अच्छी तरह से काम करता है. इशिकावा एट अल ने 15 की गणना या अविचलित धमनियों द्वारा मोटा दीवारोंके माध्यम से प्रकाश के विफल उत्सर्जन के कारण डाई के विलुप्त होने को दिखाया . इंजेक्शन के बाद, फ्लोरोरेसिन जिगर में फ्लोरोसेंट फ्लोरोरेसिन ग्लूकुरोनाइड के लिए metabolized है। इंजेक्शन के बाद 30 मिनट के भीतर, फ्लोरेसीन ग्लूकुरोनाइड की एकाग्रता फ्लोरेसेइन की एकाग्रता से अधिकहै 18। Fluorescein एक लंबे समय निकासी समय की आवश्यकता है. फ्लोरेसीन के अंतःशिरा इंजेक्शन के बाद तत्काल उपचार की सिफारिश नहीं की जाती है क्योंकि धमनी और एन्युरिज्म पहले इंजेक्शन17से पहले से ही फ्लोरोसेंट हैं .

फ्लोरेसीन का आण्विक भार केवल 376 केडीए है जो डाई के रिसाव की अनुमति देता है। संवहनी दीवार भी फ्लोरोसेंट जो झूठी सकारात्मक प्रवाह मूल्यांकन करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं हो जाता है (आवेदन के बाद समय के साथ बढ़ रही है). फ्लोरेसीन14के इंजेक्शन के बाद लगभग 5 मिनट से शुरू होने वाले पोत की दीवार का एक पैची रंगन देखा गया . हालांकि, स्पॉटी रंगन केवल बड़ी धमनियों में मनाया गया था। लघु और मध्यम धमनियों ने इस दाग वाली संरचनाको 17नहीं दिखाया . अवशिष्ट भरने का पता लगाने के लिए तुरंत एन्युरिज्म का मूल्यांकन करने की सिफारिश की जाती है।

हालांकि विषाक्तता का खतरा बहुत कम होता है, लेकिन फ्लोरेसीन केकुछ मामलों में हृदय और श्वसन प्रतिक्रियाओं का वर्णन किया गया है। इस अध्ययन में कोई गंभीर प्रतिकूल घटना हुई; केवल जटिलताओं कान नस वेध के 2 मामलों थे. लेन एट अल के अनुसार, सोडियम फ्लोरेसीन हानिकारक नहींहै यहां तक कि जब मनुष्य में इस्तेमाल 17 . दूसरी ओर, फ्लोरेसीन काफी अस्थिर है और सफेद प्रकाश16 के संपर्क में नहीं होना चाहिए - इसके बजाय एक लाल प्रकाश स्रोत का उपयोग किया जा सकता है।

खरगोशों के लिए फ्लोरेसीन की एकाग्रता का चयन करने के लिए, जांचकर्ताओं ने चूहों में सबसे कम ज्ञात कार्य खुराक के साथ शुरू किया (0.2 एमएल 100 मिलीग्राम/एमएल फ्लोरेसीइन सोडियम) और इसे धीरे-धीरे बढ़ाकर 1 एमएल कर दिया। एक मजबूत फ्लोरोसेंट संकेत है कि खुराक पर पंजीकृत किया गया था. यदि फ्लोरोसेंट में सुधार होता है तो परीक्षण करने के लिए खुराक धीरे-धीरे बढ़ा दी गई थी - जो मामला नहीं था। लेखकों के साथ जारी रखने का फैसला किया 1 एमएल 100 mg/mL fluorescein सोडियम13.

एक अन्य डाई intraoperatively जहाजों की जांच करने के लिए उपलब्ध आईसीजी है. इसका आकार 775 केडीए है और इस प्रकार के ऊतकों में मुश्किल सेप्रवेश 14. इसके लंबे उत्सर्जन तरंगदैर्ध्य के कारण ऊतक अधिक आसानी से प्रवेश कर जाता है क्योंकि ऊतक 800 दउ19 पर अधिक पारदर्शी होते हैं और गहरी संरचनाएं14,16दिखाई देती हैं . 750-800 एनएम के भीतर उत्तेजना तरंगदैर्ध्य16,20 की आवश्यकता है और इसके विपरीत एजेंट से उत्सर्जन तरंगदैर्ध्य लगभग 800 एनएम16है, दोनों मानव आँख के लिए अदृश्य बना रही है। रक्त प्लाज्मा में अपने कम आधे जीवन के समय के कारण, डाई इंजेक्शन और बार बार reused किया जा सकताहै 16. इस डाई का उपयोग करने के लिए सीमाएं मोटी दीवारों धमनियों20 और दृश्य स्पेक्ट्रम13के बाहर प्रकाश की आवश्यकता के साथ समस्याओं में शामिल हैं। नतीजतन, आईसीजी महंगे उपकरणों पर निर्भर है और हर प्रयोगशाला में आसानी से लागू नहीं है।

अंत में, FVA एक तेज, सस्ती और विश्वसनीय विधि aneurysms और कृंतक aneurysm मॉडल में parent धमनियों के स्क्रीन patency के लिए उच्च संवेदनशीलता के साथ है. यह वस्तुतः कोई रुग्णता और मृत्यु के साथ जुड़ा हुआ है. यह सर्जरी और अनुवर्ती के दौरान वास्तविक समय रक्त प्रवाह की निगरानी की अनुमति देता है. इसकी प्रभावकारिता में सुधार करने के लिए, इंजेक्शन अंधेरे में किया जाना चाहिए और सबसे अच्छा सावधानी से विच्छेदन जहाजों पर किया जाता है। इस विधि को आसानी से और सुरक्षित रूप से एक मस्तिष्कवाहिकीय प्रयोगशाला में लागू किया जा सकता है, और प्रयोग की लागत को कम कर सकते हैं.

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Disclosures

सभी लेखकहितों के टकराव की पुष्टि नहीं करते हैं।

Acknowledgments

इस अध्ययन के भाग में Kantonsspital Aarau, स्विट्जरलैंड से एक अनुसंधान अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
For rabbits
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Catheter 22G Vasofix Safety
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Glas plate
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Infusion pump Perfusor Secura
Ketamine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml, 50ml
Tape
Three-way-stopcock
Torch light
Xylazin any generic products
For rats
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Isoflurane
Ketamine hydrochloride any generic products
Medetomidine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Plate
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml
Tape
Torch light

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References

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