Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

طعم الفحص تفضيل الكبار Published: September 8, 2016 doi: 10.3791/54403

Introduction

الحيوانات تستخدم chemosensation للتمييز الشروط المواتية بصرف النظر عن ظروف الحرمان. هذا التصور يمكن أن تكون حاسمة لأشياء مثل تحديد أفضل المصادر الغذائية، وتجنب المواد السامة أو تحديد أفضل التزاوج شريك 1. وغالبا ما تنقسم Chemosensation إلى عنصرين الحسية: حواس الشم والحواس الذوقية. وهناك سمة مميزة الرئيسية لهذه الحواس هي أن الشم (الرائحة) يستخدم لأخذ عينات من البيئة الكيميائية الغازية المحيطة بينما ذوق حاسة (طعم) يتطلب اتصال جسدي مع الركيزة غير قلق. كلا طرائق الحسية تحفز الاستجابات العصبية التي يتم تجهيزها وفك الشفرة في الدماغ لإنتاج جذابة أو مثير للاشمئزاز السلوك المناسب 2. هذه الحواس هي بالتالي حاسمة لبقاء الحيوان.

ذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة هو كائن النموذج الذي لا تزال تنمو في شعبية للاستخدام في فهمجي كيف تنظر الحشرات الشم والذوق. ذبابة الفاكهة توفر مزايا هائلة على النظم نموذج الأخرى نتيجة للثروة من الأدوات الجينية المتاحة للتشريح المسارات الجزيئية الخلوية، والسلوكية. وقد تم العمل على مدى السنوات ال 15 الماضية بشكل خاص دور فعال في تشخيص هويات الخلوية محددة، مستقبلات الخلايا العصبية، ويشير الآليات التي تشارك في كل من الشم والذوق. الآن، يتم استخدام قوة الوراثة ذبابة الفاكهة لزيادة توضيح كيف يتم ترميز هذه العمليات على مستوى الخلايا العصبية واحدة ودائرة واحدة 3-6. وبالتالي، المقايسات التي توفر سجل بسهولة قراءات من التعديلات على مسارات الحسية هي حيوية للتقدم المستمر في هذه المجالات.

في حين أن الكثير معروف حول كيفية إشارات الشم يتم ترميز ومعالجتها في الدماغ، ومن المفهوم أقل بكثير عن آليات مماثلة في مسار الذوقية. نحن هنا وصف بروتوكول والتي يمكن استخدامها للتأكد preferen الذوقم في ذبابة الفاكهة. ذبابة الفاكهة، مثل الثدييات، يفضلون عموما المركبات تذوق الحلو بدلا من المركبات تذوق مرارة. ويمكن استخدام أي مزيج من هذه المصادر الغذائية في هذا التصميم التجريبي لتحديد كيفية تأثير تغيرات جينية معروفة الاختيار الذوق. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن بالمثل استراتيجيات التدخل الدوائي يتم تقييم لآثارها على تفضيل طعم الحيوانات. سهولة ومرونة هذا الاختبار يجعلها نموذجا مفيدا لفهم طبيعة الإدراك الذوقي في ذبابة الفاكهة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. المجاعة

  1. إعداد يطير قارورة المجاعة التي تشبع القطن الكرة مع 18.2 MΩ الماء في قاع القارورة الطيران القياسية. بدلا من ذلك، تشبع بالمثل شريط صغير من ورق الترشيح مع 18.2 MΩ المياه ومكان في زاوية داخل القارورة.
  2. جمع الذباب في مجموعات من ~ 100 الحيوانات على وسادة CO 2 ثم قم بإضافة الذباب إلى قارورة المعدة.
    ملاحظة: يتم الحصول على أفضل النتائج مع الحيوانات التي هي أقل من 5 أيام من العمر. ومع ذلك، فإن العمر الدقيق للحيوانات يمكن التحكم كمتغير تجريبي لتحديد التغيرات في تفضيل طعم مر الزمن.
  3. استخدام القطن الكرة أو رغوة سدادة لتأمين قارورة مغلقة. ضع قارورة الى جانبهم في حاضنة تسيطر بيئة. الحفاظ على درجة الحرارة عند 25 درجة مئوية، والرطوبة فوق 70٪. ترك قارورة يمسها لمدة 24 ساعة.

2. طعم تفضيل الفحص

  1. إعداد جميع tastants للفحص في نفس اليوم لالصورة الاختبار.
    ملاحظة: tastants الدقيقة لاستخدامها سوف تختلف اعتمادا على مسألة تجريبية يتم طلب. وفيما يلي مثال tastants المستخدمة في هذا البروتوكول. انظر القسم 4 لأمثل.
    1. إعداد مراقبة منبهة للذوق (1 ملم السكروز) من خلال الجمع بين 10 ميكرولتر من 100 ملي حل السكروز، 13 ميكرولتر من تلوين الطعام الأحمر، و977 ميكرولتر من 18.2 MΩ المياه.
    2. إعداد منبهة للذوق التجريبية (5 ملي السكروز) من خلال الجمع بين 50 ميكرولتر من 100 ملي حل السكروز، 10 ميكرولتر من تلوين الطعام الأزرق، و 940 ميكرولتر من 18.2 MΩ المياه.
  2. جعل غرف الفحص باستخدام 100 ملم × 15 ملم طبق بتري البلاستيكية القياسية التي أعدت على النحو التالي:
    1. وضع ثلاث قطرات 10 ميكرولتر من منبهة للذوق تحكم أقرب حافة لوحة عند 12:00 و 3 قطرات أخرى في 06:00. تأكد من أن تباعد بين قطرات مشابه.
    2. وضع ثلاث قطرات 10 ميكرولتر من منبهة للذوق التجريبية أقرب حافة لوحة في 03:00 وقطرات 3 آخرين في 09:00. تأكد من أن تباعد بين قطرات مشابه.
    3. كرر الخطوات من 2.2.1 و 2.2.2 لأكبر عدد ممكن من مكررات كما تريد.
  3. فارغة 1 قنينة من ~ 100 الذباب جوعا على وسادة CO 2 فقط لفترة كافية لتخدير جميع الحيوانات (حوالي 10 ثانية). فرشاة الحيوانات في وسط غرفة فحص المعدة، وتغطي مع غطاء الطبق.
    وينبغي تجنب فترات أطول من التعرض CO 2 إلى تحسين وقت الانتعاش وتدخل حدود مع سلوك التغذية: مذكرة. التعرض للالجليد (~ 5 دقائق) يمكن أن تستخدم لتخدير لتجنب CO 2 الآثار السلوكية التي قد تنشأ من التعرض حتى محدودة.
  4. وضع غرفة فحص في صندوق من الورق المقوى مبهمة. تأكد من تسمية من خارج منطقة الجزاء مع حالة وراثى التي يجري اختبارها.
  5. وضع الإعداد كامل (غرفة الفحص الواردة في صندوق من الورق المقوى من الخطوة 2.4) إلى 25 درجة مئوية مع حاضنة لا يقل عن 70٪ من الرطوبة لمدة 2 ساعة. كرر الخطوات من 2.3 خلال 2.5 لجميع مكررات.
  6. بعد 2 ساعة، ضع غرف الفحص، لا يزال الواردة في صناديق من الورق المقوى، مباشرة في الثلاجة -20 درجة مئوية لتصبح جاهزة للالكميات.

3. طعم تفضيل الفحص الكمي

  1. السماح لغرفة الفحص واحدة في عملية الاحماء لدرجة حرارة الغرفة (حوالي 5 دقائق).
  2. تحت المجهر تشريح، وذلك باستخدام فرشاة أو زوج من الملقط، حيوانات المجموعة على أساس لون البطن: الأحمر والأزرق والأرجواني أو واضح (الشكل 1).
  3. تسجيل عدد من الحيوانات في كل مجموعة. النظر في الحيوانات واضحة للم تشارك في الفحص وبالتالي لا تدرجها في أي حسابات.
  4. حساب مؤشر الأفضلية وفقا لواحدة من المعادلات التالية:
    1. إذا تم إضافة منبهة للذوق التجريبية التي تهم صبغ أحمر، ثم استخدم (N أحمر + 0.5N الأرجواني) / (N أحمر + N أزرق + N purplه).
    2. إذا تم إضافة منبهة للذوق التجريبية للصبغة زرقاء، ثم ضبط المعادلة (N الأزرق + 0.5N الأرجواني) / (N الأزرق + N أحمر + N الأرجواني).
  5. تكرار العمليات الحسابية لجميع الظروف التجريبية ومكررات.

4. تحسين الذوق الأفضلية الفحص

  1. تحديد تجريبيا تركيز المؤشرات تلوين الطعام ليتم استخدامها حتى تلوين الطعام لا يؤثر على نتائج الفحص طعم، على النحو التالي:
    1. إعداد 4 tastants باستخدام نفس المجمع قاعدة (على سبيل المثال 5 مم السكروز) كما هو مبين في الخطوة 2.1، ولكن حذفت تلوين الطعام.
    2. إضافة 1.3٪ أحمر تلوين الطعام إلى واحدة من tastants. جعل 3 tastants المتبقية مع تلوين الطعام الأزرق من تركيزات مختلفة في كل أنبوب (على سبيل المثال 0.6٪، 1٪، و 1.3٪).
    3. بروتوكول الكامل الخطوات 2.2 خلال 3.4 لكل زوج منبهة للذوق: 1.3٪ مقابل 0.6٪ أحمر أزرق؛ 1.3٪ مقابل 1٪ أحمر أزرق و1.3٪ مقابل 1.3٪ أحمر أزرق.
    4. كرر الخطوة 4.1.1-4.1.3 مع نسب مختلفة من تلوين الطعام الأزرق حتى متوسطات مؤشر تفضيل قيمة 0 (الشكل 2).
      ملاحظة: وكنقطة انطلاق، 1.3٪ تلوين الطعام الأحمر إلى جانب 1٪ أزرق تلوين الطعام عادة تؤدي إلى نتائج جيدة. إذا لم يكن هناك تركيز مرضية من تلوين الطعام الأزرق يمكن أن يقابل 1.3٪ صبغة، ثم خطوة 4.1.1 خلال 4.1.3 يمكن أن تتكرر مع تركيزات مختلفة من اللون الأحمر وتركيز ثابت من تلوين الطعام الأزرق.
    5. تحليل جميع الشروط التي سيتم اختبارها بنفس التراكيز تلوين الطعام الأمثل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

وأظهرت بعض النتائج نموذجية من المقايسات تفضيل طعم أدناه. في معظم التجارب سوف ينظر بعض الاختلاف في شدة التلوين البطن (الشكل 1). يعتبر أي التلوين في البطن سواء مكثفة أو ضعيفة على ابتلاع إيجابي. ولذلك فمن المستحسن للباحثين ليسجل الحيوانات في حين الطرف عن حالة تجريبية وذلك للحد من أي تحيز محتملة.

ومن المهم أيضا اختيار تركيز الأصباغ الغذائية التي لا تؤثر على نتائج فحص تفضيل. ويرد مثال من عواقب استخدام تركيزات مختلفة تلوين الطعام في الشكل 2 في هذا المثال، تم الحفاظ على كمية من صبغة الطعام الأحمر عند 1.3٪، في حين قد تختلف كمية من صبغة الطعام الزرقاء: 0.6٪، 1٪، و 1.3 ٪. تم إضافة كل صبغ إلى 5 ملي السكروز لضمان نسبة عالية من المشاركين في الاختبار. والهال الذوقوبعد ذلك يقوم فحص الامتحانات التنافسية الوطنية على 3 مكررات من كل شرط ومؤشر تفضيل تحسب وفقا للمعادلة في 3.4.1. تم العثور على واحد في المئة صبغة زرقاء إلى جانب صبغ أحمر 1.3٪ ليكون الأمثل لهذه التجارب كما يدل على ذلك الفشل من الحيوانات لاختيار الوقت الحاضر السكروز في لون واحد على الآخر (تفضيل قيمة مؤشر يقارب من 0.5). عندما كان الاقتران فقط 0.6٪ صبغة زرقاء مع صبغة حمراء 1.3٪، واختار الحيوانات بشكل واضح (قيمة المؤشر تفضيل قرب إلى 1) صبغ أحمر عينات السكروز، على الرغم من أن تركيز السكروز كان مطابقا لكل من الألوان. باستخدام كميات متساوية من صبغة الطعام أدى إلى طفيفة، على الرغم ذات دلالة إحصائية، وتفضيل عينات السكروز التي تحتوي على صبغة زرقاء (قيمة المؤشر تفضيل <0.5). تم العثور على القيم المثلى التي تم تحديدها هنا لإعطاء نتائج متسقة على نطاق و10 أضعاف تركيزات السكروز تتراوح بين 1 ملم إلى 10 ملم. ومع ذلك، ينبغي النظر في الكميات المحددة هنا تبدأ القيم وconcentrati الفعليالإضافات يجب أن تحسب تجريبيا لجميع الظروف لفحصها قبل تشغيل العينات التجريبية.

ويستند اختيار منها معادلة لاستخدامه في حساب مؤشر تفضيل على الإعداد للتجربة وجذب مقابل أهداف النفور من التجربة. كما هو مبين في المثال في الشكل (3)، تظاهر الذباب تفضيل لتركيزات عالية من السكروز مقابل تركيز أقل وهذا التفضيل يمكن عكس مع إضافة حامض. تم استخدام معادلة (N الأزرق + 0.5N الأرجواني) / (N الأزرق + N أحمر + N الأرجواني) من 3.4.2 لحساب مؤشر تفضيل لمدة 3 مكررات لكل حالة تجريبية منذ أن وضعت مجمع المصالح في صبغة زرقاء . ومؤشر تفضيل بالقرب 1 يشير إلى أنه عندما عرضت الاختيار بين 1 ملم السكروز (باللون الأحمر) و 5 ملي السكروز (باللون الأزرق)، والذباب تقريبا اختار دائما concentr العالي أوجه. على العكس من ذلك، أعطيت المجموعة الثانية من الذباب نفس الخيارات إلا أن حامض الخليك 10٪ وجنبا إلى جنب مع خيار السكروز ملي 5 (باللون الأزرق). الذباب ما يقرب من تجنبها تماما هذا الوضع كما رأينا مع مؤشر تفضيل بالقرب 0، بما يتفق مع الردود معروفة لتركيزات عالية من حمض 7.

شكل 1
الشكل 1: طعم تفضيل نتائج الفحص. وترد بعض الأمثلة في الاختلاف من التلوين في البطن. بلعها الأحمر الداكن (A). بلعها الضوء الأحمر (B). بلعها الأزرق الداكن (C). بلعها الضوء الأزرق (D). تعتبر بطون الأرجواني عندما يظهر تلوين كامل الأرجواني (E)، أو عندما مناطق مختلفة من أجزاء البطن تظهر حمراء (السهم) وأجزاء منفصلة من اللون الأزرق (السهم) (F).//www.jove.com/files/ftp_upload/54403/54403fig1large.jpg "الهدف =" _ فارغة "> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الشكل 2: مراقبة للآثار تلوين الطعام. إضافة تلوين الطعام إلى tastants لا ينبغي أن يكون له أي تأثير على تفضيل طعم الحيوانات. تفاوت تركيز صبغة زرقاء مع الحفاظ على تركيز ثابت من صبغة حمراء كشف مزيجا رائعا من 1.3٪ إلى 1.0٪ حمراء اللون الأزرق. ويدل على ذلك قيمة مؤشر تفضيل بالقرب 0.5. القيم هي متوسط ​​± الانحراف المعياري. * ف <0.05، *** ع <اختبار t الطالب على الوجهين 0.001 من ل. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (3)
الرقم 3: الفحص طعم تفضيل استخدامها لجذب والنفور ذبابة الفاكهة تنجذب بشكل طبيعي إلى تركيز السكروز عالية كما يراها قيمة مؤشر تفضيل بالقرب 1 عندما يخير بين 5 ملم السكروز (باللون الأزرق) و 1 ملي السكروز (باللون الأحمر) . إضافة مركب مكره مثل حمض إلى الخيار السكروز 5 ملي يعكس هذا الاختيار لالسكروز يصل هبوط المؤشر الأفضلية لقرب 0. القيم هي متوسط ​​± الانحراف المعياري. *** ع <0.0001 من اختبار (ت) طالب ذو وجهين ل. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وصفناها بروتوكول بسيطة لكنها فعالة لتحديد طعم الأفضلية في ذبابة الفاكهة. وتستخدم إصدارات هذا الفحص بشكل روتيني في التجارب لتحديد مساهمات من المستقبلات الذوقية (الموارد الوراثية) إلى إدراك نوعيات مختلفة (المر والحلو والحامض والمالح، وأومامي) من المركبات الذوق. جينوم ذبابة الفاكهة يحتوي على حوالي 60 الجينات التي تشفر 68 مستقبلات الذوقية التي تم تحديدها عن طريق الربط البديل 8،9. ومع ذلك، كما تم أظهرت البروتينات الأخرى مثل مستقبلات الغلوتامات ionotropic وقنوات الحزب للعب دور في طعم 10-13. لذلك، هناك تنوع واسع في قوة التمييزية الذوق في الحشرات. وبالإضافة إلى ذلك، خلافا لمستقبلات الشم، ويتم التعبير عن مستقبلات الذوق في الخلايا الموجودة في جميع أنحاء الطاير. الشعيرات التي تحتوي على مزيج من الخلايا العصبية التعبير عن مستقبلات الطعم مختلف ويمكن الاطلاع على labellum والساقين، وأجنحة وovipositer 14. كما،ذبابة الفاكهة تعتمد على تمييز طعم لمجموعة من السلوكيات وراء اكتساب التغذية بما في ذلك الخطوبة ووضع البيض.

ويمكن تطبيق هذه التقنية تحليل طعم لمعالجة العديد من الأسئلة التجريبية المختلفة. على سبيل المثال، منذ طعم، والتودد، والبيض السلوكيات وضع اعتبارات مهمة لكثير من الحيوانات، قد يكون هذا البروتوكول قابلة للحشرات أخرى مهمة مثل القراد والبعوض. يمكن أن يثبت هذا التطور مفيدا لإدارة ناقلات الأمراض وتطوير المبيدات الحشرية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن تحجيم هذا الاختبار حتى للاستخدام في شاشات الوراثية إلى الأمام التي جعلت ذبابة الفاكهة مثل أداة تحقيق قوية منذ عقود. ومن غير المعروف فهم الجزيئي كاملة من مسارات الذوق. يمكن تحديد اضطرابات في الجينات الجديدة التي توسط تفضيلات الذوق في هذا الاختبار يساعد في سد ثغرات هامة في المعرفة دائرة الذوق. وعلاوة على ذلك، وعلى أهمية النماذج قبل السريرية للمرض يخدعيتابع في زيادة، شاشات الدوائية التي تؤثر على آليات الإشارات الذوقية يمكن بسهولة أن يؤديها من خلال إضافة المركبات العلاجية إلى tastants في هذا البروتوكول. ولذلك، فإن فحص قوي الموصوفة هنا هو أداة قيمة محتملة للعديد من خطوط مختلفة من البحوث.

وهناك العديد من المزايا لاستخدام هذا البروتوكول لتحليل تفضيل طعم. الإصدارات في وقت مبكر من هذا النموذج التغذية تستخدم فقط لون واحد للكشف عن tastants تناولها والتطبيقات الحالية شعبية الاستفادة من أطباق التلازن للتسليم منبهة للذوق 15-18. بتري غرفة طبق الفحص المستخدمة في هذا البروتوكول هو نتاج مشترك إلى حد ما وجدت في المختبرات ليست مستعدة حاليا لإجراء فحوصات الذوق. احتمال وجود غرفة الفحص بالفعل في متناول اليد، وبالتالي يساعد على تسهيل اختبار فرضيات جديدة دون وقت أو استثمار الأموال في معدات جديدة. أيضا، فإن الجمع بين استخدام الأصباغ الزرقاء والحمراء هو قيمة للتأكد من أن كلالحيوانات عدها في التجربة شارك فعليا في التجربة. حتى بعد 24 ساعة من الجوع، ويمكن اعتبار بعض الحيوانات السليمة مع البطن واضحة بعد فترة الرضاعة. القضاء على هذه الحيوانات من حساب المؤشر تفضيل الضروري لضمان قياس دقيق للسكان. وبالإضافة إلى ذلك، بعد المجاعة بعض الحيوانات سوف يموت دائما قبل أن تكون قادرة على المشاركة في الفحص. في حين أن بعض الحيوانات النافقة قد يجفف ويمكن بسهولة إزالة قبل العد، قد تكون الحيوانات النافقة أخرى أكثر صعوبة في التعرف عليها. إدراج الصبغة في كل من الخيارات الغذائية وبالتالي يضمن أن الحيوانات فقط السليمة التي تستهلك مصدر الغذاء تعتبر للتجربة. هذا يقلل بدرجة كبيرة من التباين في النتائج التي يمكن أن ينظر إليها في الإصدارات لون واحد من هذا الاختبار. وبالإضافة إلى ذلك، واستخدام لونين كما يسمح الحيوانات التي تتغذى على كل من ركائز الكشف عن هويته من قبل تلوين الأرجواني مختلطة في بطونهم. هذه الحيوانات لإعادة مهمة لأنها تثبت أن بعض الأفراد قد يكون تفضيلات أضعف من المجموعة بأكملها. وتجدر الإشارة إلى أن لدينا أيضا نجاح استخدام الأزرق والأصفر الأصباغ الغذائية لهذا الاختبار طعم الكبار حيث الحيوانات التي تتغذى على كل من ركائز يحمل البطن الخضراء. في هذا السياق، وجدنا أن بطون الصفراء هي إلى حد ما أقل وضوحا ليسجل من البطن الحمراء، ولكن مع ذلك بعض الباحثين قد تفضل هذا الخيار. كما هو الحال مع الألوان المستخدمة في هذا البروتوكول، ويحتاج إلى التوازن الصحيح من الأصباغ الغذائية لتكون تصميما تجريبيا لضمان الأصباغ لا يكون لها تأثير على تفضيل الحيوانات.

في حين أن هذا الفحص طعم تفضيل هو جيد في تحديد الكيفية التي يبلغ عدد سكانها الذباب يستجيب لtastants مختلفة، فإنه لا يقدم أي معلومات عن استجابات الحيوان واحدة أو تناول الطعام الفعلي. المقايسات الأخرى التي تستخدم عادة لدراسة الذوق في أنظمة ذبابة الفاكهة تقدم أفضل قرار من هذه المعلمات 19 </ سوب>. على وجه التحديد، وفحص تمديد خرطوم مفيد جدا لرصد الاستجابة السلوكية الفعلية للذباب واحدة لقطرات من المواد الغذائية السائلة. وبالمثل نموذج التغذية الشعرية (CAFE) يوفر وسيلة قوية لتقييم كمية من المركبات تناولها في الذباب واحدة، مع ميزة إضافية أن الاختبار هو قادرة على رصدها بسهولة على مدى فترات طويلة من الزمن. الحد آخر من فحص طعم أساس السكان هنا لا تكمن في طبيعة ذاتية إلى حد ما من التهديف. كما هو موضح في الشكل رقم 1 هناك دائما قدرا من التباين في كمية الطعام المستهلكة و / أو التي تفرز كل حيوان. وبالتالي فإن كثافة اللون في البطن تختلف. ومن الممارسات الجيدة للباحثين ليسجل الحيوانات بينما الطرف عن الظروف من لوحة. ولتحقيق ذلك، فمن المستحسن تجنب كتابة الهويات منبهة للذوق على لوحات ولكن بدلا من تسمية صناديق توضع لوحات في ذلك أن لوحات يمكن عدها في مثل متحيز أماهnner ممكن. ومن الحكمة أيضا لتأكيد النتائج من خلال تناوب منبهة للذوق تهم الألوان بديلة في تجارب منفصلة. هذا التحليل الإضافي يجب أن تضمن دقة قوية من النتائج.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Blue 1 and Red 40, Propylparaben) McCormick N/A
Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers Fisher 03-395-455
Dumont #5 Forceps Fine Science Tools 11251-20
Glacial Acetic Acid Fisher BP2401-500
Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope W. Nuhsbaum, Inc. 10446294
Petri dish (100 mm x 15 mm) BD Falcon 351029 Reuseable if thoroughly washed and dried
Quick-Snap Microtubes Alkali Scientific Inc. C3017
Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Reds 40 and 3, Propylparaben) McCormick N/A
Sucrose IBI Scientific IB37160

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Herrero, P. Fruit fly behavior in response to chemosensory signals. Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).
  2. Vosshall, L. B., Stocker, R. F. Molecular architecture of smell and taste in Drosophila. Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).
  3. Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain. Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).
  4. Hong, E. J., Wilson, R. I. Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition. Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).
  5. Kain, P., Dahanukar, A. Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain. Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).
  6. Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila. Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).
  7. Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster. Nat Commun. 4, 2042 (2013).
  8. Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. Candidate taste receptors in Drosophila. Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).
  9. Scott, K., et al. A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila. Cell. 104 (5), 661-673 (2001).
  10. Kim, S. H., et al. Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).
  11. Koh, T. W., et al. The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors. Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).
  12. Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila. Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).
  13. Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel. Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).
  14. Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. Peripheral coding of taste. Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).
  15. Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour. EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).
  16. Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster. Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).
  17. Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila. Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).
  18. French, A. S., et al. Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila. J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).
  19. Deshpande, S. A., et al. Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology. Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).

Tags

علم الأعصاب، العدد 115، الذوق، ذوقي،
طعم الفحص تفضيل الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</em
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bantel, A. P., Tessier, C. R. TasteMore

Bantel, A. P., Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (115), e54403, doi:10.3791/54403 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter