Introduction
Tiere verwenden Chemosensorik vorteilhaften Bedingungen zu unterscheiden, abgesehen von ungünstigen Bedingungen. Diese Wahrnehmung kann für solche Dinge entscheidend sein , wie die beste Nahrungsquelle zu bestimmen, die Vermeidung toxischer Substanzen oder zur Bestimmung der besten Paarungspartner 1. Chemosensorik wird oft in zwei sensorische Komponenten aufgeteilt: Geruchssinn und Geschmacks-Sinne. Ein Hauptunterscheidungsmerkmal dieser Sinne ist, dass olfaction (Geruch) die umgebende gasförmige chemische Umgebung verwendet wird, zu probieren, während gustation (Geschmack) physischen Kontakt mit einem nichtflüchtigen Substrat erfordert. Beide sensorischen Modalitäten stimulieren neurologische Reaktionen , die verarbeitet werden und im Gehirn dekodiert die entsprechende anziehende oder abstoßende Verhalten 2 zu erzeugen. Diese Sinne sind daher von entscheidender Bedeutung für das Überleben der Tiere.
Die Fruchtfliege Drosophila melanogaster ist ein Modellorganismus, der in der Popularität für den Einsatz weiter zu wachsen in verstehening, wie Insekten Geruch und Geschmack wahrnehmen. Fruchtfliegen bieten enorme Vorteile gegenüber anderen Modellsystemen aufgrund der Fülle von genetischen Werkzeuge zur Verfügung, für das Aufschneiden der molekularen, zellulären und Verhaltenswege. Arbeit in den letzten 15 Jahren hat sich besonders dazu beigetragen, die spezifische zelluläre Identitäten bei der Charakterisierung, neuronale Rezeptoren und Signal beide Mechanismen, die in Geruch und Geschmack. Nun ist die Macht der Drosophila Genetik verwendet wird , um weiter erläutern , wie diese Prozesse im einzelnen Neurons und einzelne Schaltungsebene codiert sind 3-6. Daher Assays, die Ablesungen von Veränderungen an sensorischen Bahnen vital dieser Felder auf die anhaltende Fortschritt sind leicht erzielt bieten.
Während viel über bekannt ist, wie olfaktorische Signale werden im Gehirn kodiert und verarbeitet werden, viel weniger über ähnliche Mechanismen in der Geschmacks- Weg verstanden. Wir beschreiben hier ein Protokoll, das verwendet werden kann, Geschmack preferen zu ermittelnce in Drosophila. Drosophila, wie Säugetiere, bevorzugen in der Regel süß schmeckende Verbindungen als zu bitter schmeckenden Verbindungen gegenüber . Jede Kombination dieser Nahrungsquellen können in diesem Versuchsdesign verwendet werden, um festzustellen, wie bekannte genetische Veränderungen Geschmack Wahl beeinflussen. Zusätzlich können pharmakologische Interventionsstrategien in ähnlicher Weise auf ihre Wirkungen auf Tiere Geschmackspräferenz bewertet werden. Die Leichtigkeit und Flexibilität dieses Assays ist es ein nützliches Paradigma für die Natur der gustatory Wahrnehmung in Drosophila zu verstehen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Starvation
- Bereiten Sie Hunger Fläschchen fliegen durch einen Wattebausch mit 18,2 MOhm Wasser am Boden eines Standard-Fliegen Fläschchen zu sättigen. Alternativ in ähnlicher Weise einen kleinen Streifen aus Filterpapier mit 18,2 MOhm Wasser und in einem Winkel in der Phiole zu sättigen.
- Sammeln Sie Fliegen in Gruppen von ~ 100 Tiere auf einem CO 2 Pad und fügen Sie dann die Fliegen auf einem vorbereiteten Fläschchen.
Hinweis: Die besten Ergebnisse werden mit den Tieren erhalten, die weniger als 5 Tage alt sind. Jedoch kann die genaue Alter der Tiere als experimentelle Variable gesteuert werden, um Änderungen in Geschmack bevorzugt im Laufe der Zeit zu bestimmen. - Verwenden Sie einen Wattebausch oder Schaumstoffstopper zu sichern die Fläschchen verschlossen. Legen Sie Fläschchen auf ihrer Seite in einem umwelt kontrollierten Inkubator. Man hält die Temperatur bei 25 ° C und die Feuchtigkeit über 70%. Lassen Sie Fläschchen unberührt für 24 Stunden.
2. Geschmackspräferenz Assay
- Bereiten Sie alle tastants für den Test am selben Tag eins-Tests.
Hinweis: Die genauen tastants verwendet werden, je nach Versuchs Frage variieren gefragt. Im Folgenden sind beispiels tastants in diesem Protokoll verwendet. Siehe Abschnitt 4 für Optimierungen.- Bereiten Kontrolle Geschmacksträger (1 mM Saccharose) von 10 & mgr; l von 100 mM Saccharose-Lösung kombiniert, 13 ul rote Lebensmittelfarbe, und 977 & mgr; l von 18,2 M & Omega; Wasser.
- Bereiten Sie experimentellen Geschmacksträger (5 mM Saccharose) von 50 & mgr; l von 100 mM Saccharose-Lösung kombiniert, 10 ul blauen Lebensmittelfarbe, und 940 & mgr; l von 18,2 M & Omega; Wasser.
- Machen Assaykammern unter Verwendung eines Standard 100 mm x 15 mm Kunststoff-Petrischale in der folgenden Weise hergestellt:
- Platzieren Sie drei 10 ul Tropfen Steuergeschmacksträger am nächsten zu dem Rand der Platte um 12 Uhr und weitere 3 Tropfen bei 6 Uhr. Sicherzustellen, dass der Abstand zwischen den Tropfen ähnelt.
- Platzieren drei 10 ul Tropfen experimentellen Geschmacksträger am nächsten zu der Kante der Platte bei 3 Uhr und einandere 3 fällt um 9 Uhr. Sicherzustellen, dass der Abstand zwischen den Tropfen ähnelt.
- Wiederholen Sie die Schritte 2.2.1 und 2.2.2 für so viele Wiederholungen wie gewünscht.
- Leer 1 Flasche ~ 100 verhungert Fliegen auf einen CO 2 Pad gerade lang genug , um alle Tiere zu betäuben (ca. 10 sec). Bürsten Sie die Tiere in die Mitte eines vorbereiteten Testkammer und Deckel mit dem Schalendeckel.
Hinweis: Längere CO 2 Exposition sollte vermieden werden , um Erholungszeit und Begrenzung Interferenzen mit dem Fressverhalten zu verbessern. Die Exposition gegenüber Eis (~ 5 min) für anesthetizing verwendet werden , um CO 2 Verhaltenseffekte zu vermeiden , die von selbst eine begrenzte Exposition entstehen können. - Legen Sie die Testkammer in einem undurchsichtigen Karton. Achten Sie darauf, die außerhalb der Box mit der Bedingung und Genotyp getestet zu beschriften.
- Platzieren Sie die gesamte Einrichtung (Testkammer enthalten innerhalb Karton aus Schritt 2.4) in einen 25 ° C-Inkubator mit mindestens 70% Feuchtigkeit für 2 Stunden. Wiederholen Sie die Schritte 2.3 bis 2.5 für alle Wiederholungen.
- Nach 2 Stunden, legen Sie die Testkammern, noch in Kartons enthalten sind, direkt in einem -20 ° C Gefrierschrank bis sie bereit zur Quantifizierung.
3. Geschmackspräferenz Assay Quantifizierung
- Lassen Sie einen einzigen Test Kammer auf Raumtemperatur erwärmen (ca. 5 min).
- Unter einem Präpariermikroskop, einer Bürste oder einem Paar Pinzette, Gruppe Tiere auf der Grundlage der Farbe ihres Bauches: rot, blau, violett oder klar (Abbildung 1).
- Notieren Sie die Anzahl der Tiere in jeder Gruppe. Betrachten wir klare Tiere wurden nicht in den Test teilgenommen und deshalb sind sie nicht in allen Berechnungen.
- Berechne den Vorzugsindex nach einer der folgenden Gleichungen:
- Wenn die experimentelle Geschmacksträger von Interesse für den roten Farbstoff zugesetzt wird, dann verwenden (N rot + 0,5 N lila) / (N rot + blau N + N purple).
- Wenn die experimentelle Geschmacksträger auf den blauen Farbstoff hinzugefügt wird, und stellen Sie dann die Gleichung (N blau + 0,5 N lila) / (N + N blau rot + N violett).
- Wiederholen Sie die Berechnungen für alle experimentellen Bedingungen und Replikate.
4. Optimierung der Geschmackspräferenz Assay
- Empirisch bestimmen verwendet werden, um die Konzentration von Lebensmittelfarbe Indikatoren so Lebensmittelfarbe nicht das Ergebnis des Geschmackstest wirkt sich wie folgt:
- Bereiten Sie 4 tastants die gleiche Basis - Verbindung (zB 5 mM Saccharose) , wie in Schritt angegeben 2.1, aber lassen Sie die Lebensmittelfarbe.
- In 1,3% rote Lebensmittelfarbe auf eine der tastants. Nehmen Sie die restlichen 3 tastants mit blauen Lebensmittelfarbe von unterschiedlichen Konzentrationen in jedem Röhrchen (zB 0,6%, 1% und 1,3%).
- Vollständige Protokollschritte 2.2 bis 3.4 für jedes Paar Geschmacksträger: 1,3% rot vs. 0,6% blau; 1,3% rot vs. 1% blau und1,3% rot vs. 1,3% blau.
- Wiederholen Sie Schritt 4.1.1-4.1.3 mit unterschiedlichen Prozentsätzen der blauen Lebensmittelfarbe , bis die Präferenz - Index Mittelwerte ein Wert von 0 (Abbildung 2).
Hinweis: Als Ausgangspunkt, um 1,3% rote Lebensmittelfarbe in Verbindung mit 1% blau Lebensmittelfarbe der Regel gute Ergebnisse liefert. Wenn keine befriedigende Konzentration an blauen Lebensmittelfarbe kann auf 1,3% Farbstoff angepaßt werden, wird im Schritt 4.1.1 bis 4.1.3 mit variierenden Konzentrationen von roten Färbung und eine konstante Konzentration an blauen Lebensmittelfarbe wiederholt werden. - Analyse alle Bedingungen mit den gleichen optimierten Lebensmittelfarbe Konzentrationen getestet werden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Einige typische Ergebnisse von Geschmackspräferenz Assays sind unten dargestellt. In den meisten Experimenten wird eine gewisse Variation in der Intensität der abdominalen Färbung zu sehen (Abbildung 1). Jede Färbung im Bauch, ob intensiv oder schwach ist, eine positive Aufnahme in Betracht gezogen. Es ist daher ratsam, für Forscher Tiere während blind für die experimentellen Bedingungen zu erzielen, um mögliche Verzerrungen zu begrenzen.
Es ist auch wichtig Konzentrationen von Lebensmittelfarben zu wählen, die nicht das Ergebnis des Vorzugs Assay beeinflussen. Ein Beispiel für die Auswirkungen der verschiedenen Lebensmittelfarbe Konzentrationen verwendet , ist in Figur 2 gezeigt In diesem Beispiel wurde die Menge des roten Lebensmittelfarbstoff bei 1,3% , während die Menge des blauen Lebensmittelfarbstoff gehalten variiert wurde. 0,6%, 1% und 1,3 %. Jeder Farbstoff wurde zu 5 mM Saccharose, einen hohen Prozentsatz der Teilnehmer in dem Test zu gewährleisten. Der Geschmack prefereNOA-Assay wurde dann aus jedem Zustand von 3 Replikaten durchgeführt, und die Präferenz Index in 3.4.1 der Gleichung berechnet nach. Ein Prozent blauer Farbstoff gekoppelt mit 1,3% rotem Farbstoff wurde gefunden für diese Experimente optimal zu sein, wie durch den Ausfall von Tieren nachgewiesen Saccharose in einer Farbe über die andere (Präferenz-Index-Wert nahe 0,5) wählen. Wenn nur 0,6% blauer Farbstoff mit 1,3% rotem Farbstoff gekoppelt wurde, Tiere wählten deutlich den roten Farbstoff Saccharose-Proben (Präferenz-Index-Wert in der Nähe von 1), auch wenn die Saccharosekonzentration für beide Farben identisch war. Verwendung von gleichen Mengen von Nahrungsmittelfärbung ergab eine leichte, aber statistisch signifikante Präferenz für Sucrose enthaltenden Proben blauen Farbstoff (Vorzugsindexwert <0,5). Die optimalen Werte hier identifiziert wurden gefunden konsistente Ergebnisse über einen 10-fachen Bereich von Saccharose-Konzentrationen von 1 mM bis 10 mM bis hin zu geben. Trotzdem sind die hier identifizierten Mengen sollten Werte und tatsächliche concentrati betrachtet werden beginnendons sollte empirisch vor dem Ausführen von experimentellen Proben getestet für alle Bedingungen berechnet werden.
Die Wahl, welche Gleichung zur Berechnung des Präferenz Index zu verwenden ist auf den Aufbau des Experiments basiert und die Anziehung gegenüber Abneigung Ziele des Experiments. Wie in 3 in dem Beispiel in gezeigt ist , zeigten Fliegen eine Präferenz für hohe Konzentrationen an Saccharose im Vergleich zu niedrigeren Konzentrationen und diese Präferenz kann durch die Zugabe von Säure umgekehrt werden. Die Gleichung (N blau + 0,5 N lila) / (N + N blau rot + N lila) von 3.4.2 wurde verwendet , um die Präferenz - Index für 3 Wiederholungen jeder Versuchsbedingung zu berechnen , da die Verbindung von Interesse in den blauen Farbstoff gelegt wurde . Eine Präferenz-Index in der Nähe von 1 bedeutet, dass, wenn die Wahl zwischen 1 mM Saccharose (in rot) und 5 mM Saccharose (in blau) angeboten, die Fliegen wählte fast immer die höhere concentr ation. Im Gegensatz dazu wurde eine zweite Gruppierung von Fliegen die gleichen Optionen, außer dass 10% Essigsäure gegeben wurde mit dem 5 mM Saccharose Option kombiniert (in blau). Flies nahezu vollständig diese Situation vermieden , da mit der Präferenz Index nahe 0, im Einklang mit bekannten Reaktionen auf hohe Konzentrationen an Säure 7 zu sehen.
Abbildung 1: Geschmackspräferenz Assay - Ergebnisse. Einige Beispiele in der Variation der abdominalen Färbung gezeigt. Dunkelrot eingenommen (A). Hellrot eingenommen (B). Dunkelblau eingenommen (C). Hellblau eingenommen (D). Lila abdomens werden als wenn die gesamte Färbung lila (E) angezeigt wird , oder wenn unterschiedliche Bereiche des Abdomens zeigen Abschnitte von roten (Pfeilspitze) und getrennten Abschnitten des blauen (Pfeil) (F).//www.jove.com/files/ftp_upload/54403/54403fig1large.jpg "target =" _ blank "> Bitte hier klicken, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 2: Controlling für Lebensmittel Färbungseffekte. Die Zugabe von Lebensmittelfarbe auf die tastants sollte keine Wirkung auf den Geschmack Präferenz der Tiere. Variieren der Konzentration des blauen Farbstoffes, wobei eine konstante Konzentration der roten Farbstoffes Aufrechterhaltung ergab eine optimale Kombination von 1,3% bis 1,0% rot blau. Dies wird durch einen Präferenz-Index-Wert in der Nähe von 0,5 angegeben. Werte sind der Mittelwert ± Standardabweichung. * p <0,05, *** p <0,001 von zweiseitigen Student-t-Test. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 3:. Der Test Geschmacksvorliebe für Anziehung verwendet und Abneigung Drosophila sind natürlich hohe Sucrosekonzentrationen angezogen , wie durch einen Präferenz - Index - Wert in der Nähe von 1 zu sehen ist, wenn die Wahl zwischen 5 mM Saccharose gegeben (in blau) und 1 mM Saccharose (in rot) . Hinzufügen einer aversiven Verbindung, wie Säure auf die 5 mM Saccharose Option kehrt diese Wahl für hohe Saccharose als die Präferenz-Index fällt nahe 0. Die Werte sind der Mittelwert ± Standardabweichung. *** p <0,0001 von zweiseitigen Student-t-Test. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Wir haben für die Bestimmung Geschmackspräferenz in Drosophila eine einfache aber effektive Protokoll beschrieben. Versionen dieses Tests werden routinemäßig in Experimenten verwendet, die Beiträge von Geschmacks- Rezeptoren (GRS) zur Wahrnehmung der verschiedenen Qualitäten (bitter, süß, sauer, salzig und umami) Geschmacksverbindungen zu bestimmen. Das Drosophila - Genom enthält etwa 60 Gene , die 8,9 68 identifiziert Geschmacks- Rezeptoren durch alternatives Spleißen kodieren. Allerdings haben andere Proteine wie ionotrope Glutamatrezeptoren und TRP - Kanäle auch eine Rolle zu spielen in Geschmack 10-13 gezeigt. Daher gibt es umfangreiche Vielfalt in der Unterscheidungskraft des Geschmacks in Insekten. Darüber hinaus, im Gegensatz zu Rezeptoren für Geruch, Geschmack Rezeptoren sind in Zellen befinden ganzen Fliege zum Ausdruck gebracht. Sensilla Kombinationen von Neuronen, die verschiedene Geschmacksrezeptoren enthalten , können auf den labellum, Beine, Flügel und ovipositor 14 zu finden. So wie,Drosophila setzen auf Geschmack Diskriminierung für eine Vielzahl von Verhaltensweisen über Ernährung Erwerb einschließlich Balz und Eiablage.
Dieser Geschmack Analysetechnik kann viele verschiedene experimentelle Fragestellungen zu adressieren angewendet werden. Da zum Beispiel Geschmack, Balz und Eiablage Verhaltensweisen wichtige Überlegungen für viele Tiere sind, können dieses Protokoll zu anderen wichtigen Insekten wie Zecken und Mücken skalierbar sein. Ein solcher Fortschritt könnte für Krankheit Vektormanagement und Pestizid Entwicklung als nützlich erweisen. Darüber hinaus könnte dieser Test für die Verwendung in Vorwärts genetischen Screens skaliert werden , die Drosophila eine so starke Untersuchungswerkzeug für Jahrzehnte gemacht haben. Das vollständige molekulare Verständnis von Geschmack Wege ist nicht bekannt. Identifizieren von Störungen in neuen Genen, die Geschmacksvorlieben in diesem Test vermitteln könnte helfen, wichtige Lücken im Geschmack Schaltung Wissen zu füllen. Außerdem ist, wie die Bedeutung der präklinischen Modellen der Krankheit continues leicht durch Zugabe von therapeutischen Verbindungen zu den tastants in diesem Protokoll durchgeführt werden, zu erhöhen, können pharmakologische Bildschirme gustatory Signalmechanismen beeinflussen. Daher hier beschriebene robuste Test ist ein potentiell wertvolles Werkzeug für viele verschiedene Linien der Forschung.
Es gibt mehrere Vorteile bei der Verwendung dieses Protokoll für die Analyse der Geschmackspräferenz. Frühe Versionen dieses Fütterungs Paradigma nur eine einzige Farbe für die Erkennung von aufgenommenen tastants genutzt und beliebte aktuellen Anwendungen nutzen Mikrotiterplatten für Geschmacksträger Lieferung 15-18. Die Petrischale Testkammer in diesem Protokoll verwendet eine etwas gemeinsam in Laboratorien gefunden Produkt derzeit nicht Geschmack Tests vorbereitet auszuführen. Die Wahrscheinlichkeit, dass eine Testkammer bereits auf der Hand, hilft daher, ohne Zeit oder Geld Investitionen in neue Ausrüstungen Erprobung neuer Hypothesen erleichtern. Auch die Kombination blauen und roten Farbstoffe zu verwenden, ist wertvoll, um sicherzustellen, dass alledie in dem Experiment gezählt Tiere nahmen tatsächlich in dem Experiment. Selbst nach 24 Stunden von Hunger, einige gesunde Tiere mit klaren abdomens die Fütterungsperiode folgenden gesehen werden kann. diese Tiere von der Präferenz Indexberechnung eliminiert ist notwendig, um eine genaue Messung der Bevölkerung zu gewährleisten. Darüber hinaus wird nach Hungern werden einige Tiere immer sterben, bevor sie in der Lage sind in dem Test teilzunehmen. Während einige tote Tiere desiccate kann und leicht vor dem Zählen entfernt werden kann, andere tote Tiere kann schwieriger sein, zu identifizieren. Die Aufnahme von Farbstoff in beiden Auswahl von Lebensmitteln gewährleistet daher, dass nur gesunde Tiere, die eine Nahrungsquelle verbraucht werden für das Experiment betrachtet. Dies reduziert die Variabilität der Ergebnisse, die in einzelnen Farbversionen dieses Assays zu sehen ist. Darüber hinaus ermöglicht die Verwendung von zwei Farben auch Tiere, die auf beiden Substraten ernähren durch die gemischte purpurne Färbung in ihrer abdomens identifiziert werden. Diese Tiere einre wichtig, weil sie zeigen, dass einige Personen, die gesamte Gruppe haben schwächer Vorlieben als. Es sei darauf hingewiesen, dass wir auch Erfolg für Erwachsenen Geschmack Test blau und gelb Lebensmittel-Farbstoffe mit gehabt haben, wo die Tiere auf beiden Substraten zeigen grüne abdomens Fütterung. In diesem Zusammenhang haben wir festgestellt, dass die gelben Bäuchen etwas weniger offensichtlich sind als rote Bäuche zu punkten, aber dennoch können einige Forscher diese Option bevorzugen. Wie bei den in diesem Protokoll verwendeten Farben, muss ein ausgewogenes Verhältnis von Lebensmittelfarbstoffen empirisch ermittelt werden, die Farbstoffe, um sicherzustellen, keine Auswirkungen auf Tiere Präferenz haben.
Während dieser Geschmackspräferenz Test bei der Bestimmung gut ist, wie eine Bevölkerung von Fliegen zu verschiedenen tastants reagiert, bietet er keine Informationen über einzelne Tier Reaktionen oder tatsächliche Nahrungsaufnahme. Andere Tests , die für die Untersuchung Geschmack in Drosophila - Systemen verwendet werden , bieten eine bessere Auflösung dieser Parameter 19 </ Sup>. Insbesondere ist der Rüssel Erweiterung Test sehr nützlich für die tatsächliche Verhaltensreaktion einzelner Fliegen Tropfen flüssigen Lebensmittelüberwachung. Ebenso ist eine kapillare Zuführung Paradigma (CAFE) bietet eine robuste Mittel, um die Menge der aufgenommenen Verbindungen in einzelne Fliegen Beurteilung mit dem zusätzlichen Vorteil, dass der Test der Lage ist, auf einfache Weise über lange Zeiträume hinweg überwacht werden. Eine weitere Einschränkung der Bevölkerung basiert Geschmack Test hier nicht liegen in der etwas subjektiven Charakter des Scoring. Wie in Figur 1 veranschaulicht gibt es immer eine gewisse Variation in der Menge an Nahrung verbraucht , und / oder durch jedes Tier ausgeschieden. Deshalb ist die Intensität der Bauch Farbe variiert. Es ist eine gute Übung für die Forscher, die Tiere während blind für die Bedingungen der Platte zu erzielen. Um dies zu erreichen, ist es empfehlenswert, Geschmacksträger Identitäten auf den Platten zu vermeiden, schreiben, sondern beschriften Sie die Kisten die Platten in so angeordnet sind, dass die Platten in so unvoreingenommen eine ma gezählt werdennner wie möglich. Es ist auch ratsam, Ergebnisse zu bestätigen, indem Sie die Geschmacksträger von Interesse abwechselnden Farben in getrennten Versuchen drehen. Diese zusätzliche Analyse sollte robust Genauigkeit der Ergebnisse sicherzustellen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Blue 1 and Red 40, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers | Fisher | 03-395-455 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Glacial Acetic Acid | Fisher | BP2401-500 | |
| Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope | W. Nuhsbaum, Inc. | 10446294 | |
| Petri dish (100 mm x 15 mm) | BD Falcon | 351029 | Reuseable if thoroughly washed and dried |
| Quick-Snap Microtubes | Alkali Scientific Inc. | C3017 | |
| Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Reds 40 and 3, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Sucrose | IBI Scientific | IB37160 |
References
- Herrero, P. Fruit fly behavior in response to chemosensory signals. Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).
- Vosshall, L. B., Stocker, R. F. Molecular architecture of smell and taste in Drosophila. Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).
- Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain. Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).
- Hong, E. J., Wilson, R. I. Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition. Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).
- Kain, P., Dahanukar, A. Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain. Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).
- Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila. Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).
- Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster. Nat Commun. 4, 2042 (2013).
- Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R.
- Scott, K., et al. A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila. Cell. 104 (5), 661-673 (2001).
- Kim, S. H., et al. Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).
- Koh, T. W., et al. The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors. Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).
- Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila. Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).
- Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel. Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).
- Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C.
- Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour. EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).
- Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster. Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).
- Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila. Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).
- French, A. S., et al. Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila. J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).
- Deshpande, S. A., et al. Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology. Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).
