Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Assay העדפות טעם למבוגרים Published: September 8, 2016 doi: 10.3791/54403

Introduction

בעלי חיים להשתמש chemosensation להבחין תנאי יתרון מלבד תנאים נחותים. תפיסה זו יכולה להיות קריטית עבור דברים כגון קביעת מקור המזון הטוב ביותר, הימנעות חומרים רעילים או קביעת שותף הזדווגות מיטב 1. Chemosensation מחולקת לעתים קרובות לשני מרכיבים חושיים: חושי חוש ריח וחושים התעוררו אצלם. מאפיין מבדיל עיקרי של חושים אלה הוא כי חוש ריח (ריח) משמש כדי לדגום את הסביבה הכימית גזים שמסביב בעוד gustation (טעם) דורש מגע פיזי עם מצע בלתי נדיף. שני אופנים חושיים לעורר תגובות נוירולוגיות שעוברים עיבוד מפוענח במוח כדי לגרום לפעולת 2 דוחה או המושך המתאים. חושים אלה הם אפוא קריטיים להישרדות חיה.

זבוב הפירות תסיסנית הוא אורגניזם מודל אשר ממשיכה לצבור פופולריות לשימוש להביןing איך חרקים תופסים ריח וטעם. זבובי פירות להציע יתרונות עצומים על פני מערכות מודל אחר בשל שפע של כלים גנטיים זמין לנתיחה של מסלולים מולקולריים, הסלולר, והתנהגותיים. עבודה במשך 15 השנים האחרונות כבר סייע במיוחד באפיון הזהויות התאיות הספציפיות, קולטנים עצביים, ואיתות מנגנונים מעורבים בשני ריח וטעם. עכשיו, את הכוח של גנטיקה תסיסנית נמצא בשימוש כדי להבהיר עוד כמה תהליכים אלה מסומלים על המעגל נוירון בודד יחיד ברמה 3-6. לכן, מבחנים המספקים בקלות הבקיע מונה המציין שינויי מסלולים חושיים חיוניים מראש המתמשך של שדות אלה.

בעוד הרבה ידוע על איך אותות הריח מסומלים ומעובד במוח, הרבה פחות מובן על מנגנונים דומים במסלול התעורר אצלם. אנו מתארים כאן פרוטוקול אשר ניתן להשתמש בהם כדי לברר preferen טעםce תסיסנית. תסיסנית, כמו יונקים, בדרך כלל מעדיף תרכובות טעימות מתוקות בניגוד תרכובות טעימות מרות. כל שילוב של מקורות מזון אלה יכול להיות מנוצל בעיצוב ניסיוני זה כדי לקבוע כיצד שינויים גנטיים ידועים להשפיע על בחירת טעם. בנוסף, אסטרטגיות התערבות פרמקולוגית ניתן להעריך באופן דומה השפיעו על העדפת הטעם של חיות. הקלות והגמישות של assay זה עושה את זה פרדיגמה שימושי להבנת אופי בחוש הטעם תסיסנית.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. רעב

  1. הכן לטוס בקבוקונים רעבים על ידי להרוות כדור צמר גפן עם 18.2 MΩ מים בתחתית בקבוקון זבוב סטנדרטי. לחלופין, בדומה להרוות רצועה קטנה של נייר סינון עם 18.2 MΩ מים ומקום בזווית בתוך הבקבוקון.
  2. אסוף זבובים לתוך סטים של ~ 100 בעלי חיים על כרית CO 2 ולאחר מכן להוסיף את הזבובים כדי בקבוקון מוכן.
    הערה: התוצאות הטובות ביותר מושגות עם חיות כי הם פחות מ 5 ימים. עם זאת, את הגיל המדויק של החיות ניתן לשלוט כמשתנה ניסיוני לקבוע לשינויים בהעדפות הטעם לאורך זמן.
  3. השתמש פקק כדור או קצף כותנה להבטחת הבקבוקונים סגורים. מניחים צלוחיות לצידם באינקובטור נשלט לסביבה. לשמור על טמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס, ואת לחות מעל 70%. השאירו בקבוקונים כפי שהיא למשך 24 שעות.

2. Assay העדפות טעם

  1. הכן את כל tastants עבור assay באותו יוםבדיקות s.
    הערה: tastants המדויק לשמש ישתנה בהתאם שאלת ניסוי שהתבקש. להלן tastants למשל בשימוש בפרוטוקול זה. ראו סעיף 4 עבור אופטימיזציות.
    1. הכן מלאה tastant (1 מ"מ סוכרוז) על ידי שילוב 10 μl של פתרון סוכרוז 100 מ"מ, 13 μl של צבע מאכל אדום, ו 977 μl של 18.2 MΩ מים.
    2. הכן tastant ניסיוני (סוכרוז 5 מ"מ) על ידי שילוב 50 μl של 100 מ"מ תמיסת סוכרוז, 10 μl של צבע מאכל כחול, 940 μl של 18.2 MΩ מים.
  2. הפוך תאי assay באמצעות צלחת פטרי פלסטיק רגיל 100 מ"מ x 15 מ"מ ערוכים באופן הבא:
    1. מניחים שלושה 10 טיפות μl שליטה tastant הקרוב שולי הצלחת בשעה 12 ועוד 3 טיפות בשעה 6. ודא כי המרווח בין טיפות דומה.
    2. מניחים שלושה 10 טיפות μl של tastant ניסיוני הקרוב שולי הצלחת ב -3 בבוקר,3 אחרים טיפות בשעה 9. ודא כי המרווח בין טיפות דומה.
    3. חזור על שלבים 2.2.1 ו 2.2.2 עבור רבים משכפל כרצונכם.
  3. בקבוקון 1 ריק זבובים ~ 100 מורעבים על כרית CO 2 רק מספיק זמן כדי להרדים את כל החיות (כ -10 שניות). מבריש את החיות לאמצע בתא assay מוכן וכסו מכסת הצלחת.
    הערה: ארוכה יותר בתקופות של חשיפת CO 2 יש להימנע כדי לשפר את זמן התאוששות והפרעת גבול עם התנהגות האכילה. חשיפת הקרח (~ 5 דקות) ניתן להשתמש הרדמה כדי למנוע תופעות התנהגותיות CO 2 שיכולים לנבוע גם חשיפה מוגבלת.
  4. מניחים את החדר assay בקופסת קרטון אטום. הקפד לתייג את מחוץ לקופסא עם המצב ואת הגנוטיפ נבדקת.
  5. מניח את ההתקנה כולה (קאמרי assay בתוך ארגז קרטון של שלב 2.4) לתוך C חממת 25 ° עם לחות של 70% לפחות 2 שעות. חזור על שלבים 2.3 דרך 2.5 לכל משכפל.
  6. לאחר 2 שעות, במקום לתאי assay, עדיין בתוך קופסאות קרטון, ישירות לתוך המקפיא -20 ° C עד מוכן לכמת.

כימות Assay 3. טעם העדפות

  1. אפשר בתא assay יחיד להתחמם לטמפרטורת החדר (כ 5 דקות).
  2. תחת מיקרוסקופ לנתיחה, בעזרת מברשת או זוג מלקחיים, חיות קבוצה המבוססת על צבע של הבטן שלהם: אדום, כחול, סגול או ברורה (איור 1).
  3. רשמו את מספר בעלי החיים בכל קיבוץ. שקול חיות ברורות שלא השתתפו assay ולכן אינו כולל אותם בכל חישובים.
  4. חשב את מדד העדפה על פי אחת המשוואות הבאות:
    1. אם tastant עניין ניסיוני מתווסף צבע אדום, ולאחר מכן להשתמש (אדום N + 0.5N סגול) / (אדום N + N purpl כחול + Nה).
    2. אם tastant ניסיוני מתווסף צבע כחול, ולאחר מכן להתאים את המשוואה (N כחול + 0.5N סגול) / (N כחול + N אדום + N סגול).
  5. חזור על החישובים עבור כל תנאי הניסוי ו המשכפלת.

4. אופטימיזציה של Assay העדפות טעם

  1. באופן אמפירי לקבוע את הריכוז של אינדיקטורים צבעי מאכל לשמש כך צבעי מאכל אינו משפיעים על התוצאה של assay הטעם, כדלקמן:
    1. כן 4 tastants באמצעות באותו מתחם הבסיס (למשל 5 סוכרוז מ"מ) כמצוין בשלב 2.1, אך השמט את צבעי מאכל.
    2. להוסיף צבע מאכל אדום 1.3% לאחת tastants. הפוך את 3 tastants הנותרים עם צבע מאכל כחול של ריכוזים שונים בצינור אחד (למשל 0.6%, 1%, ו -1.3%).
    3. פרוטוקול מלא צעדי 2.2 דרך 3.4 עבור כל זוג tastant: מול אדום 1.3% 0.6% כחולים; 1.3% אדום לעומת 1% כחול1.3% אדומים לעומת 1.3% כחולים.
    4. חזור על שלב 4.1.1-4.1.3 עם אחוזים שונים של צבע מאכל הכחול עד ממוצעי מדד העדפת ערך של 0 (איור 2).
      הערה: כנקודת מוצא, צבע מאכל אדום 1.3% בשילוב עם צבעי מאכל כחול 1% בדרך כלל מניב תוצאות טובות. אם אין ריכוז משביע רצון של צבע מאכל הכחול ניתן להתאים צבע 1.3%, ולאחר מכן צעד 4.1.1 דרך 4.1.3 ניתן לחזור עם ריכוזים שונים של צבע אדום וריכוז מתמיד של צבע מאכל הכחול.
    5. לנתח את כל התנאים כדי להיבדק עם ריכוזי הצבעים מאכלים אותו מותאמים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

כמה תוצאות אופייניות מבחני העדפה לטעם מוצגות להלן. ברוב הניסויים שונים כלשהי עוצמת צביעת בטן יהיה לראות (איור 1). כל צביעה בבטן אם אינטנסיבי או חלש נחשבת בליעה חיובית. לכן מומלץ לחוקרים להבקיע בעלי חיים תוך עיוור תנאי הניסוי כדי להגביל כל הטיות פוטנציאליות.

כמו כן, חשוב לבחור ריכוזי צבע מאכל אשר אינו משפיע על התוצאה של assay ההעדפה. דוגמא לתוצאות שימוש ריכוזי צבעי מאכל שונים מוצגת באיור 2 בדוגמא זו, כמות צבע מאכל אדום נשמרה ב -1.3% בעוד שהכמות לצבוע מזון הכחול הייתה מגוונת:. 0.6%, 1%, ו -1.3 %. לצבוע כל התווסף סוכרוז 5 מ"מ על מנת להבטיח אחוז גבוה של המשתתפים assay. הטעם prefereassay NCE בוצע ואילך 3 משכפל מכל מצב ומדד ההעדפה מחושב על פי המשוואה ב 3.4.1. אחוז אחד צבע כחול בשילוב עם 1.3% צבע אדום נמצא להיות אופטימלי עבור ניסויים אלו כפי שמעידים הכישלונות של חי לבחור נוכחי סוכרוז בצבע אחד מעל (ערך מדד ההעדפה קרוב ל -0.5) האחר. כאשר רק 0.6% צבע הכחול היה זיווג עם 1.3% צבע אדום, חיות בבירור בוחרים דגימות סוכרוז אדום צבע (ערך העדפת המדד קרוב 1), אף על פי ריכוז סוכרוז היה זהה לשני הצבעים. באמצעות כמויות שווות של לצבוע מזון הביא קל, אם כי משמעותי מבחינה סטטיסטית, העדפת דגימות סוכרוז המכילות צבע כחול (ערך העדפה ראשי <0.5). הערכים האופטימליים המזוהים כאן נמצאו לתת תוצאות עקביות על פני טווח פי 10 של ריכוזי סוכרוז הנעים בין 1 מ"מ ל -10 מ"מ. עם זאת, הכמויות זיהו כאן צריכות להיחשב החל ערכי concentrati בפועללפיירפוקס יש לחשב באופן אמפירי לכל התנאים להיבדק לפני הפעלת דגימות ניסוי.

הבחירה של אשר משוואה להשתמש לחישוב מדד ההעדפה מבוססת על ההגדרה של הניסוי ואת האטרקציה מול מטרות סלידה של הניסוי. כפי שניתן לראות בדוגמה באיור 3, זבובים הפגינו העדפה ריכוזים גבוהים של סוכרוז לעומת ריכוזים נמוכים והעדפה זה יכול להיות הפוך עם תוספת של חומצה. המשוואה (N כחול + 0.5N סגול) / (N כחול + N אדום + N סגול) מ 3.4.2 ששימש לחישוב מדד העדפה 3 משכפל של כל תנאי הניסוי מאז במתחם עניין הוצב צבע כחול . מדד העדפה ליד 1 מצביע על כך שכאשר הציע את הבחירה בין 1 סוכרוז מ"מ (באדום) ו -5 סוכרוז מ"מ (בכחול), הזבובים כמעט תמיד בחרו concentr גבוה ation. לעומת זאת, סיווג שני של זבובים ניתן אותן האפשרויות מלבד כי חומצה אצטית 10% אוחדו עם 5 אופצית סוכרוז מ"מ (בכחול). זבובים כמעט לחלוטין להימנע מהמצב הזה כפי שראה עם מדד ההעדפה ליד 0, עולה בקנה אחד עם תגובות ידועות לריכוזים גבוהים של חומצה 7.

איור 1
איור 1: תוצאות assay טעם והעדפה. כמה דוגמאות בווריאציה של צביעת בטן מוצגות. אדום כהה בליעה (א). אדום אור מעובדים (B). כחול כהה בליעה (C). תכלת בליעה (D). בטן סגולה נחשבת כאשר הצבע כולו מופיע סגולה (E), או כאשר אזורים שונים של מנות צג בטן של (ראש חץ) אדום החלק נפרד של כחול (חץ) (F).//www.jove.com/files/ftp_upload/54403/54403fig1large.jpg "target =" _ blank "> לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2
איור 2: פיקוח על תופעות צבע מזון. התוספת של צבע מאכל אל tastants לא צריכה שום השפעה על העדפת הטעם של החיות. שינוי הריכוז של צבע כחול תוך שמירה על ריכוז קבוע של צבע אדום חושפת שילוב אופטימלי של 1.3% מאדום לכחול 1.0%. זה מצוין על ידי ערך מדד העדפה ליד 0.5. ערכים הם ממוצע ± סטיית תקן. * p <0.05, *** p <0.001 מ מבחן t דו-צדדי. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 3
איור 3:. את assay העדפת טעם המשמש משיכה ודחייה תסיסנית נמשכים באופן טבעי לריכוזים סוכרוז גבוהים כפי שראה לפי ערך מדד העדפה ליד 1 כאשר ניתנו להם האפשרות לבחור בין 5 המ"מ סוכרוז (בכחול) ו -1 המ"מ סוכרוז (באדום) . הוספת תרכובת מרתיעה כגון חומצה לאפשרות סוכרוז 5 מ"מ הופך את הבחירה הזו עבור סוכרוז גבוהה כמדד העדפה טיפות לקרוב 0. ערכים הם ממוצע ± סטיית התקן. *** p <0.0001 מן מבחן t דו-צדדי. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

תארנו פרוטוקול פשוט אך יעיל לקביעת העדפה לטעם תסיסנית. גרסאות של assay זה משמשים באופן שגרתי ניסויים כדי לקבוע את תרומתם של קולטנים התעורר אצלם (GRS) כדי לתפוס את איכויות שונות (מר, מתוק, חמוץ, מלוח, umami) של תרכובות טעם. הגנום תסיסנית מכיל כ 60 גנים המקודדים 68 קולטנים gustatory מזוהה על ידי שחבור חלופי 8,9. עם זאת, חלבונים אחרים כגון קולטני גלוטמט ionotropic וערוצי TRP גם הוכחו לשחק תפקיד בטעם 10-13. לכן, יש מגוון נרחב בכח המפלה של טעם חרקים. בנוסף, שלא כמו קולטנים ריח, קולטני הטעם באים לידי ביטוי בתאים הממוקמים בכל רחבי לטוס. ניתן למצוא Sensilla המכיל שילובים של נוירונים להביע קולטני טעם שונה על השפית, רגליים, כנפי ovipositer 14. ככזה,תסיסנית להסתמך על אפלית טעם עבור שורה של התנהגויות מעבר רכישת תזונה כולל חיזור הטלה.

טכניקת ניתוח טעם אפשר לחזור על תהליך כדי לענות על שאלות ניסויים שונות רבות. לדוגמא, מאז טעם, חיזור, והתנהגויות נחת ביצה הם שיקולים חשובים לבעלי חיים רבים, פרוטוקול זה עשוי להיות מדרגים לחרקים חשובים אחרים כגון קרציות ויתושים. קידום כזה יכול להיות שימושי עבור ניהול וקטור מחלה ופיתוח חומרי הדברה. בנוסף, assay זה יכול להיות scaled עד לשימוש מסכי גנטי קדימה שהפכו תסיסנית כלי מחקר רב עוצמה כזה במשך עשרות שנים. ההבנה המולקולרית המלאה של מסלולי טעם אינה ידועה. זיהוי שיבושי גנים חדשים אשר מתווכים העדפות טעם assay זה יכול לסייע מילוי פערים חשובים בידע מעגל טעם. יתר על כן, את החשיבות של במודלים פרה של קון המחלהtinues להגדיל, מסכים תרופתיים המשפיעים מנגנוני איתות gustatory יכול להתבצע בקלות על ידי הוספת תרכובות טיפוליות אל tastants בפרוטוקול זה. לכן, assay החזק המתואר כאן הוא כלי רב ערך פוטנציאלי עבור קווים שונים רבים של מחקר.

ישנם מספר יתרונות לשימוש בפרוטוקול זה לניתוח של העדפה וטעם. גרסאות מוקדמות של הפרדיגמה האכלה זה מנוצל צבע אחד ורק לצורך איתור tastants בליעה ויישומים הנוכחי פופולרי לעשות שימוש צלחות microtitre למסירה tastant 15-18. תא assay צלחת פטרי להשתמש בפרוטוקול זה הוא מוצר מצאו מעט נפוץ במעבדות לא מוכן כרגע לבצע מבחני טעם. הסבירות שיש קאמרי assay כבר על יד, אם כן, מסייעת להקל על בדיקות של שערות חדשות ללא זמן או השקעת כסף בציוד חדש. כמו כן, השילוב של באמצעות צבעים כחולים ואדום הוא בעל ערך כדי להבטיח שכלהחיות נספרות הניסוי למעשה שהשתתפו בניסוי. גם אחרי 24 שעות של רעב, חלק מבעלי חיים בריאים עם בטן ברורה לאחר תקופת ההאכלה ניתן לראות. ביטול החיות האלה מחישוב העדפת המדד שנדרש כדי להבטיח מדידה מדויקת של האוכלוסייה. בנוסף, לאחר רעב כמה חיות תמיד ימותו לפני שהם מסוגלים להשתתף assay. בעוד כמה חיות מתות יכולות לייבש וניתן להסירו בקלות לפני הספירה, חיות מתות אחרות עשויות להיות קשות יותר לזהות. הכללת לצבוע בשני בחירות מזון ולכן, מבטיחה כי בעלי חיים בריאים בלבד אשר נצרך מקור מזון נחשבים לצורך הניסוי. זו מקטינה באופן משמעותי את השתנות התוצאות אשר ניתן לראות גרסאות צבע יחיד של assay זה. בנוסף, השימוש בשני צבעים גם מאפשר חיות הניזונים הוא המצעים להיות מזוהות על ידי הצבע הסגול המעורב הבטן שלהם. חיות אלה ישמחדש חשוב כי הם מראים כי יכולים להיות כמה אנשים העדפות חלשות יותר לקבוצה כולה. יצוין כי יש לנו גם הצלחה באמצעות צבעי מאכל כחולים וצהובים עבור assay הטעם המבוגר שבו מאכילי חיות משני המצעים להפגין בטן ירוקה. בהקשר זה, מצאנו כי הבטן הצהובה הן קצת פחות ברורה להבקיע מאשר בטן אדומה, אבל בכל זאת כמה חוקרים עשויים להעדיף אפשרות זו. כמו עם הצבעים בשימוש בפרוטוקול זה, איזון ראוי של צבעי מאכל צריך לקבוע באופן אמפירי כדי להבטיח את הצבעים אין השפעה על ההעדפה של בעלי החיים.

בעוד assay העדפה לטעם זה טוב לקבוע כיצד אוכלוסייה של זבובים מגיבה tastants השונה, הוא אינו מספק מידע כלשהו על תגובות חיות אחת או צריכת מזון בפועל. מבחני אחרים המשמשים בדרך כלל ללימוד טעם במערכות תסיסנית מציעים רזולוציה טובה יותר של פרמטרים אלה 19 </ Sup>. באופן ספציפי, assay רחבת החוטם היא מאוד שימושית עבור ניטור התגובה ההתנהגותית בפועל של זבובים יחידים טיפות של מזון נוזלי. כמו כן פרדיגמה האכלת נימים (CAFE) מציעה אמצעי חזק הערכה כמות התרכובות לבלוע זבובים יחידים, עם יתרון נוסף כי assay הוא מסוגל להיות במעקב בקלות על פני תקופות זמן ארוכות. מגבלה נוספת של assay טעם האוכלוסייה המבוססת כאן עושה שקר האופי קצת סובייקטיבי של הניקוד. כמו באיור 1 תמיד יש מידה מסוימת של שונות בסך של המזון הנצרך ו / או מופרש על ידי כל חיה. לכן עוצמת צבע הבטן משתנית. זה תרגול טוב עבור חוקרים להבקיע חיות תוך עיוור לתנאי הצלחת. כדי להשיג זאת, מומלץ להימנע כתיבת זהויות tastant על הבריסטולים, אבל במקום לתייג את תיבות הצלחות ממוקמות כך הצלחות ניתן לספור בלתי משוחד תואר שניnner ככל האפשר. זה גם נבון לאשר את התוצאות על-ידי סיבוב tastant המעניינות בצבעים חלופיים ב ניסויים נפרדים. ניתוח נוסף זה אמור להבטיח דיוק חזק של התוצאות.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Blue 1 and Red 40, Propylparaben) McCormick N/A
Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers Fisher 03-395-455
Dumont #5 Forceps Fine Science Tools 11251-20
Glacial Acetic Acid Fisher BP2401-500
Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope W. Nuhsbaum, Inc. 10446294
Petri dish (100 mm x 15 mm) BD Falcon 351029 Reuseable if thoroughly washed and dried
Quick-Snap Microtubes Alkali Scientific Inc. C3017
Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Reds 40 and 3, Propylparaben) McCormick N/A
Sucrose IBI Scientific IB37160

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Herrero, P. Fruit fly behavior in response to chemosensory signals. Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).
  2. Vosshall, L. B., Stocker, R. F. Molecular architecture of smell and taste in Drosophila. Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).
  3. Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain. Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).
  4. Hong, E. J., Wilson, R. I. Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition. Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).
  5. Kain, P., Dahanukar, A. Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain. Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).
  6. Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila. Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).
  7. Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster. Nat Commun. 4, 2042 (2013).
  8. Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. Candidate taste receptors in Drosophila. Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).
  9. Scott, K., et al. A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila. Cell. 104 (5), 661-673 (2001).
  10. Kim, S. H., et al. Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).
  11. Koh, T. W., et al. The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors. Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).
  12. Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila. Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).
  13. Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel. Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).
  14. Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. Peripheral coding of taste. Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).
  15. Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour. EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).
  16. Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster. Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).
  17. Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila. Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).
  18. French, A. S., et al. Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila. J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).
  19. Deshpande, S. A., et al. Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology. Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).

Tags

Neuroscience גיליון 115 טעם התעורר אצלם, הפרדיגמה האכלה רעב משיכה סלידה נוירוביולוגיה ביולוגיה התפתחותית
Assay העדפות טעם למבוגרים<em&gt; תסיסנית</em
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bantel, A. P., Tessier, C. R. TasteMore

Bantel, A. P., Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (115), e54403, doi:10.3791/54403 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter