عزل الخلايا أحادية النواة عن دماغ الفأر: تقنية الطرد المركزي المتدرج للكثافة لعزل الخلايا أحادية النواة المقيمة في الدماغ

تلعب الخلايا أحادية النواة في الدماغ ، التي تتكون من الخلايا الليمفاوية والخلايا الوحيدة ، أدوارا حاسمة في الحفاظ على وظائف المخ والتوازن.

لعزل هذه الخلايا أحادية النواة ، أولا ، خذ دماغ فأر تم حصاده حديثا مملوءا بالمحلول الملحي.

يسمح التروية بإزالة الدم ومكوناته من الأوعية الدموية ، مما يتيح عزل الخلايا المناعية المقيمة في الدماغ في الخطوات اللاحقة.

الآن ، اشطف الدماغ بوسائط مناسبة لإزالة خلايا الدم الحمراء الملتصقة. تابع الشطف بالفرم للحصول على قطع صغيرة من المناديل.

تجانس قطع الأنسجة للحصول على تعليق من الخلايا المفردة وشظايا الخلايا.

إلى هذا التعليق ، ثم أضف الوسائط المبردة ووسط تدرج الكثافة المناسب بأحجام مناسبة لتشكيل وسط تدرج منخفض الكثافة.

بعد ذلك ، أضف حجما معينا لوسط تدرج عالي الكثافة ؛ تشكل وسائط التدرج عالية الكثافة طبقة منفصلة في الأسفل ، مما يخلق تدرجا متقطعا للكثافة.

الطرد المركزي التعليق بسرعة عالية وظروف درجات الحرارة المنخفضة. تحتل الخلايا أحادية النواة الواجهة بين طبقتي وسائط تدرج الكثافة.

تخلص من الطبقة العليا التي تحتوي على الحطام الخلوي والمايلين - غمد الأنسجة الدهنية المحيط بمحاور الخلايا العصبية.

انقل طبقة الواجهة إلى أنبوب جديد يحتوي على وسائط مناسبة وجهاز طرد مركزي.

تضع الخلايا أحادية النواة المنقاة رواسب على شكل حبيبات ويمكن إعادة تعليقها في مخزن مؤقت لمز