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Behavior

क्रोनिक तनाव चूहों पर Xiaoyaosan के विरोधी अवसाद प्रभाव का मूल्यांकन

Published: January 7, 2019 doi: 10.3791/58276
Automatic Translation
*1, *1,2, 1, 1, 1,2
1School of Traditional Chinese Medicine, Beijing University of Chinese Medicine, 2Formula-pattern Research Center, School of Traditional Chinese Medicine, Jinan University
* These authors contributed equally

Summary

यहाँ, हम माउस अवसादग्रस्तता मॉडल स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद, पुराने अप्रत्याशित हल्के तनाव (CUMS) के साथ जुड़े व्यवहार परिवर्तन का पालन, और Xiaoyaosan के विरोधी अवसाद प्रभाव का मूल्यांकन.

Abstract

एंटी दवाओं और मनोचिकित्सा के मानकीकृत उपयोग के अलावा, पारंपरिक चीनी चिकित्सा का उपयोग प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार (MDD) के साथ रोगियों की एक समग्र सुधार करने के लिए नेतृत्व किया है । इसलिए, इस अध्ययन के प्रयोजन के लिए माउस अवसादग्रस्तता मॉडल स्थापित किया गया था, व्यवहार पुराने अप्रत्याशित हल्के तनाव (CUMS) के साथ जुड़े परिवर्तन का पालन, और फिर Xiaoyaosan के विरोधी अवसाद प्रभाव का मूल्यांकन । चूहों को बेतरतीब ढंग से चार समूहों में विभाजित किया गया: एक नियंत्रण समूह, एक मॉडल समूह, Xiaoyaosan के साथ एक उपचार समूह, और fluoxetine के साथ एक उपचार समूह. सभी चूहों को व्यक्तिगत रूप से पिंजरों में रखा गया था, और अवसाद उंहें 21 दिनों के लिए CUMS के कई डिजाइन जोड़तोड़ को उजागर द्वारा चूहों में प्रेरित किया गया, के रूप में प्रोटोकॉल में वर्णित है । नियंत्रण समूह और मॉडल समूह में चूहों आसुत पानी की ०.५ मिलीलीटर प्राप्त किया, जबकि उपचार समूहों में चूहों या तो Xiaoyaosan प्राप्त (०.२५ ग्राम/किग्रा/दिन) या fluoxetine (२.६ मिलीग्राम/kg/दिन) । अध्ययन में इस्तेमाल होने वाली दवाओं को पूरे तीन सप्ताह के दौरान रोजाना intragastrically दिया जाता था । अवसादग्रस्तता की तरह व्यवहार, कोट राज्य, शरीर के वजन, ओपन फील्ड टेस्ट स्कोर सहित मापदंडों की एक श्रृंखला का अनुमान है, और सुक्रोज वरीयता टेस्ट स्कोर दर्ज किए गए । डेटा विश्लेषण से पता चला है कि मॉडल चूहों के व्यवहार काफी नियंत्रण समूह में चूहों के व्यवहार की तुलना में बदल रहे थे, जो Xiaoyaosan और fluoxetine के उपचार द्वारा सुधार किया गया । वर्तमान निष्कर्षों Xiaoyaosan के विरोधी अवसाद प्रभाव का प्रदर्शन किया CUMS प्रेरित चूहों के व्यवहार पर और पता चला है कि Xiaoyaosan पर्चे से यौगिकों अवसाद के इलाज के लिए सार्थक हो सकता है, पर उनके लाभकारी प्रभाव पर विचार अवसाद जैसे व्यवहार ।

Introduction

MDD एक पुरानी, अत्यधिक आवर्तक मानसिक रोग है कि लगातार कम मूड के साथ प्रस्तुत करता है, अवसाद, कम आत्मसंमान, मानसिक मंदता, ब्याज की हानि, नींद संबंधी विकार, निराधार निराशावादी या आत्महत्या की प्रवृत्ति; यह मानव स्वास्थ्य और सामाजिक स्थिरीकरण के लिए बड़ा नुकसान हुआ है1. यह विकलांगता की दुनिया के प्राथमिक कारण में से एक बन गया है, और यह विश्व स्वास्थ्य संगठन2,3के अनुसार २०३० द्वारा रोग के बोझ का मुख्य प्रमुख कारणों में से एक हो सकता है । वर्तमान में, एंटी दवाओं और मनोचिकित्सा MDD इलाज करने के लिए पहली पसंद माना जाता है । फिर भी, MDD के साथ का निदान रोगियों की एक विशाल संख्या निरंतर दवा या चिकित्सा के लिए जवाब नहीं है, और वे उपचार प्रतिरोधी अवसाद4होने के रूप में सूचीबद्ध हैं ।

Xiaoyaosan एक क्लासिक चीनी यौगिक5 कि व्यापक रूप से चीन6में गीत वंश के बाद से हजारों साल के लिए मनोवैज्ञानिक रोगों के इलाज के लिए इस्तेमाल किया गया है । यह 8 चीनी जड़ी बूटियों से बना है: मूलांक Bupleuri, मूलांक Paeoniae अल्बा, मूलांक Angelicae Sinensis, Poria, Rhizoma AtractylodisMacrocephalae, मूलांक Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens , और Herba Menthae। Xiaoyaosan कई घटक शामिल हैं, कई लक्ष्य है, और कई रास्ते7का उपयोग करता है । Xiaoyaosan सामांयतः मानसिक विकारों से संबंधित विभिंन रोगों के इलाज के लिए एक सुरक्षित और प्रभावी फार्मूला दिखाया गया है, और आधुनिक अध्ययन भी इस परिसर के विरोधी अवसाद तंत्र पर ध्यान केंद्रित किया है8,9, 10. MDD के रोगजनन अभी तक स्पष्ट नहीं है, भले ही वहां monoamine परिकल्पना, न्यूरोट्रांसमीटर रिसेप्टर परिकल्पना, neuroendocrine समारोह परिवर्तन परिकल्पना, प्रतिरक्षा प्रणाली विषमता परिकल्पना सहित विविध परिकल्पना, कर रहे हैं, आदि मौजूद थे। कई अध्ययनों से पता चला है कि Xiaoyaosan के एंटी इफेक्ट की सामग्री कुर्सियां के साथ एक कनेक्शन है ऊपर परिकल्पना11,12, और अपनी चिकित्सीय कार्रवाई अवसादग्रस्तता की तरह एक सुधार के रूप में प्रकट होता है व्यवहार13.

इसके अलावा, अवसाद की व्यापकता के साथ, आधुनिक समाज के काम के बल में कटौती से सामना करना पड़ा है, जल्दी सेवानिवृत्ति, और महंगी14उपचार । महंगा उपचार सख्त चिकित्सा ध्यान, जो वृद्धि की चिकित्सा लागत और सटीक अवांछनीय परिणामों की सटीक प्रत्याशा के रूप में अच्छी तरह से साइड इफेक्ट15की एक सीमा का मतलब है की जरूरत है । चीनी जड़ी बूटी Xiaoyaosan सुलभ घटकों, अद्वितीय प्रभाव, और मामूली साइड इफेक्ट है । इसके आवेदन आधुनिक चिकित्सा उपचार के बोझ को कम करने में एक भूमिका निभा सकते हैं । इसलिए, Xiaoyaosan के आवेदन के लिए एक और अधिक सैद्धांतिक आधार प्रदान करने के लिए, एक वैकल्पिक नैदानिक चिकित्सा अवसाद के उपचार के लिए की पेशकश की जानी चाहिए, जो की घटना वर्ष दर साल बढ़ जाती है, और एक ही समय में मानव स्वास्थ्य में सुधार करना चाहिए । यह कागज एक Xiaoyaosan के उपयोग को शामिल प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए माउस के अवसादग्रस्तता मॉडल की स्थापना के अवसादग्रस्तता की तरह व्यवहार को रोकने के । Xiaoyaosan के एंटी इफेक्ट्स को सत्यापित करने के लिए ओपन फील्ड टेस्ट और सुक्रोज वरीयता परीक्षा का इस्तेमाल किया गया ।

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Protocol

इस प्रोटोकॉल चीनी चिकित्सा के बीजिंग विश्वविद्यालय की पशु नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था और देखभाल और चीन के प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग के लिए सभी दिशानिर्देशों के अनुसार था । प्रयोगात्मक प्रक्रिया के दौरान कोई आकस्मिक मृत्यु की स्थिति नहीं थी, और इस अध्ययन में euthanized होने की जरूरत नहीं पशुओं ।

1. प्रयोग के लिए दवाओं की तैयारी

नोट: चीनी जड़ी बूटियों और खरीदा तो चीनी चिकित्सा के बीजिंग विश्वविद्यालय के डॉ बी लियू द्वारा प्रमाणीकृत किया गया । Xiaoyaosan में 6:6:6:6:3:6:2:2 के अनुपात में निम्नलिखित आठ पारंपरिक चीनी औषधियां शामिल हैं: मूलांक Angelicae Sinensis, मूलांक Paeoniae अल्बा, Poria, मूलांक Bupleuri, मूलांक Glycyrrhizae, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Herba Menthae तथा Rhizoma Zingiberis Recens,.

  1. Xiaoyaosan तैयार के रूप में पहले16वर्णित है ।
    नोट: हम चीन-जापान मैत्री अस्पताल के चीनी चिकित्सा तैयारी कक्ष में इन यौगिकों निकाला, और निष्कर्षण उपज १८.८% थी ।
  2. उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण (LC-ms/ms)17द्वारा Xiaoyaosan की गुणवत्ता की जांच करें ।

2. प्रायोगिक प्रक्रिया के लिए चूहों की तैयारी

नोट: प्रायोगिक प्रक्रिया के लिए, ६० स्वस्थ पुरुष C57BL/6J 12 सप्ताह आयु वर्ग के चूहों का चयन किया गया, प्रत्येक माउस के साथ 18 और 22 जी के बीच वजन

  1. चूहों व्यक्तिगत रूप से पिंजरों में एक विशिष्ट विशिष्ट रोगज़नक़ नि: शुल्क (SPF) प्रयोगशाला पशु कक्ष (22 ± 1 ° c, 12 एच/12 एच अंधेरे/प्रकाश चक्र, सापेक्षिक आर्द्रता: 30-40%) एक सप्ताह के लिए CUMS प्रक्रिया से पहले ।
  2. बेतरतीब ढंग से एक नियंत्रण समूह, एक मॉडल समूह, एक Xiaoyaosan उपचार समूह, या अपने शरीर के वजन के अनुसार एक fluoxetine उपचार समूह में सभी चूहों को विभाजित । प्रत्येक समूह में 15 चूहे हैं ।
  3. प्रयोग की दीक्षा से पहले, एक अंकन कलम का उपयोग कर अपनी पूंछ पर प्रत्येक समूह में चूहों संख्या ।
  4. एक पांच दिन सुक्रोज वरीयता परीक्षण का उपयोग कर सभी चूहों का परीक्षण (चरण 5 को देखें) और एक खुला क्षेत्र परीक्षण (6 कदम को देखें).

3. चूहों में अवसाद की प्रेरण

नोट: अवसाद पैदा करने के लिए, मॉडल समूह और दो उपचार समूहों में चूहों 21 दिन18के लिए CUMS गया । योजना को व्यावहारिक स्थिति के अनुसार बदला जा सकता है, लेकिन सिद्धांत है कि एक ही चाले का प्रयोग लगातार नहीं किया जा सकता, उसका पालन किया जाना चाहिए.

  1. अगले 21 लगातार19दिनों के लिए निंनलिखित सात तनाव के किसी भी दो को चूहों दैनिक बेनकाब । हमारे मॉडलिंग योजना के रूप में इस प्रकार बनाया गया है:
    1. सोमवार को, खाद्य अभाव चूहों बेनकाब (24 घंटे के लिए प्रत्येक पिंजरे के फ़ीड खाली, 8:00 a.m. करने के लिए 8:00 a.m.) और पानी के अभाव (हटाने के लिए प्रत्येक पिंजरे के पीने की बोतल 24 घंटे, 8:00 के लिए सुबह 8:00 बजे) ।
    2. मंगलवार को, संयम तनाव को बेनकाब चूहों (3 घंटे के लिए एक छोटे से प्लास्टिक के टब में चूहों को नियंत्रित, 8:00 a.m. करने के लिए 11:00 a.m.) और खाली पिंजरों (11 घंटे के लिए प्रत्येक पिंजरे में गद्दी हटाने, 8:00 के लिए सुबह 19:00 बजे) ।
    3. बुधवार को, गीले और नेपकिन पिंजरों को चूहों बेनकाब (प्रत्येक पिंजरे में पानी डालना और 24 घंटे के लिए गीला रखने के लिए, 8:00 a.m. करने के लिए 8:00 a.m.) और भीड़ पिंजरों (डाल पांच चूहों के लिए एक पिंजरे में 24 घंटे, 8:00 के लिए 8:00 a.m.).
    4. गुरुवार को, संयम तनाव और बर्फ के लिए चूहों बेनकाब-ठंड20तैराकी,21 (प्रत्येक माउस बल 5 मिनट के लिए बर्फ के पानी के साथ एक स्पष्ट गिलास मछलीघर में तैरने के लिए) ।
    5. शुक्रवार को, गीले और गंदे पिंजरों और खाद्य अभाव चूहों को बेनकाब ।
    6. शनिवार को, तनाव और भीड़ पिंजरों संयम को बेनकाब चूहों ।
    7. रविवार को, खाली पिंजरों और बर्फ ठंडा तैराकी के लिए चूहों का पर्दाफाश ।
  2. रिकॉर्ड कोट राज्य और शारीरिक वजन मॉडलिंग के अंत तक साप्ताहिक (दिन 21) । सिर, गर्दन, पृष्ठीय कोट, ventral कोट, forepaws, पूंछ, और हिंद पंजे: सात अलग शरीर के अंगों से स्कोर की राशि के रूप में कोट राज्य के कुल स्कोर की गणना । एक का स्कोर एक अच्छी तरह से तैयार कोट इंगित करता है, और शूंय का स्कोर एक मैला कोट22इंगित करता है ।
  3. एक पांच दिवसीय सुक्रोज वरीयता परीक्षण निष्पादित करें (चरण 5 को देखें) और एक ओपन फील्ड टेस्ट (चरण 6 को देखें) प्रयोग के अंत में ।

4. Xiaoyaosan का प्रशासन

नोट: Xiaoyaosan (०.२५ g/kg/दिन) की खुराक को इसके संतोषजनक प्रभावकारिता के आधार पर चुना गया जैसा कि पहले9बताया गया था ।

  1. प्रयोग के दौरान, Xiaoyaosan और fluoxetine सस्पेंशन तैयार करने के लिए आसुत जल का उपयोग करें, और तुरंत उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें ।
  2. मॉडलिंग से पहले हर दिन intragastric प्रशासन द्वारा कंट्रोल ग्रुप और मॉडल ग्रुप में चूहों को आसुत पानी की ०.५ मिलीलीटर दें । इस बीच, दो उपचार समूहों में चूहों को Xiaoyaosan (०.२५ g/kg/दिन) या fluoxetine (२.६ मिलीग्राम/kg/दिन) दें ।

5. सुक्रोज वरीयता परीक्षण

नोट: कोई पानी या भोजन अभाव परीक्षण से पहले लागू किया गया था । प्रोटोकॉल पहले23रिपोर्ट के रूप में किया गया था ।

  1. पहले दो दिन पर, चूहों को व्यक्तिगत रूप से नल के पानी से भरी दो बोतलों के साथ घर ।
  2. अगले दो दिन पर, चूहों को 1% सुक्रोज हल से भर दो बोतलें दे ।
  3. अंतिम दिन पर, चूहों 24 घंटे के लिए दो बोतलें, नल के पानी के साथ एक और 1% सुक्रोज समाधान के साथ अन्य दे । पीने के व्यवहार में चूहों के एक पक्ष वरीयता को खत्म करने के लिए, 12 घंटे के बाद दो बोतलों की स्थिति स्विच.
  4. दोनों भस्म सुक्रोज समाधान और नल का पानी की मात्रा (एमएल) रिकॉर्ड । सुक्रोज वरीयता के रूप में इस प्रकार की गणना: सुक्रोज वरीयता (%) = सुक्रोज उपभोग/कुल तरल उपभोग × १००% ।

6. ओपन फील्ड टेस्ट

  1. एक चार तरफा लकड़ी के काले lusterless बॉक्स के साथ एक dimly जलाया और शांत कमरे में खुला क्षेत्र परीक्षण करते हैं । floor को नीली रेखाओं द्वारा 25 समान चौकोरों में विभाजित कर लें ।
  2. प्रत्येक माउस के उपयोग से पहले 5% शराब के साथ खुले क्षेत्र बॉक्स साफ । फिर, माउस खुले मैदान के केंद्र में धीरे से रखें ।
  3. एक उच्च परिभाषा डिजिटल कैमरा क्षेत्र के ऊपर लगभग २०० सेमी सही निलंबित, और 5 मिनट के लिए प्रत्येक माउस के व्यवहार रिकॉर्ड ।
  4. वीडियो ट्रैकिंग सिस्टम सॉफ्टवेयर द्वारा चूहों व्यवहार वीडियो का मूल्यांकन करें और केंद्र क्षेत्र में कुल चल दूरी और प्रविष्टियों की संख्या का डेटा रिकॉर्ड.
  5. सांख्यिकीय सॉफ़्टवेयर द्वारा कुल दूरी स्थानांतरित की गई और केंद्र क्षेत्र में प्रविष्टियों की संख्या के डेटा का विश्लेषण करें ।

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Representative Results

ध्यान दें कि परिणाम पहले Dr. Xiu-फेंग डिंग, एट अल द्वारा प्रकाशित किया गया है । 18

डेटा मतलब (SEM) के अर्थ ± मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त किया गया । सामान्यता परीक्षण और प्रसरण की एकरूपता के लिए परीक्षण पर आधारित सामान्य डेटा के लिए एक-तरफ़ा ANOVA या एक गैर-पैरामीट्रिक परीक्षण का उपयोग किया गया था. एलएसडी परीक्षण समूहों के बीच तुलना के लिए उपयोग किया गया था । इसके अलावा, सामान्य रेखीय मॉडल (GLM) की दोहराया माप प्रक्रिया दोहराया मापा डेटा (कोट स्कोर और शरीर के वजन) के लिए एक तरह से ANOVA विश्लेषण का संचालन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था, और प्रसरण की एक बहुभिंनरूपी विश्लेषण प्रक्रिया तुलना करने के लिए अपनाया गया था प्रत्येक समय बिंदु (एलएसडी विधि) पर समूहों के बीच ।

CUMS प्रेरित चूहों की शारीरिक स्थिति

अवसाद, मॉडल समूह में कोट राज्य के एक क्रमिक dystrophy के प्रेरण के लिए CUMS के तीन सप्ताह के लिए चूहों को उजागर करने के बाद प्रेरित किया गया था; dystrophy तनाव के दो सप्ताह के बाद मौजूद नहीं था, लेकिन यह CUMS प्रक्रिया के अंत में बिगड़ा (तीन सप्ताह), और कोट स्कोर काफी नियंत्रण समूह की तुलना में कमी आई (एफ 3, ५६) = २५.०८, पी = ०.०००) । चूहों की कोट राज्य विशेष रूप से Xiaoyaosan या fluoxetine के साथ सतत उपचार के बाद मॉडल समूह (एफ (3, ५६) = २५.०८, दोनों पी = ०.००१, आंकड़ा 1a) की तुलना में सुधार हुआ था । प्रत्येक समूह के साप्ताहिक शरीर के वजन डेटा के अनुसार, शरीर के वजन में एक महत्वपूर्ण कमी तीसरे सप्ताह (एफ (3, ५६) = १६.१४९, पी = ०.०००, आंकड़ा 1b) द्वारा प्रकट किया गया था, जबकि Xiaoyaosan या fluoxetine उपचार काफी शरीर में वृद्धि हुई वजन मॉडल समूह (एफ (3, ५६) = १६.१४९, दोनों पी = ०.००१) के साथ तुलना में ।

सुक्रोज वरीयता परीक्षण

तनाव जोखिम से पहले, सभी समूहों में चूहों एक समान सुक्रोज वरीयता (आधारभूत शर्त, चित्रा 2a) था । हालांकि, सुक्रोज वरीयता में एक महत्वपूर्ण ड्रॉप मॉडल समूह (एफ (3, ५६) = ४१.३७९, पी = ०.०००, चित्रा 2 बी) में तनाव प्रक्रिया के तीन सप्ताह के बाद मनाया गया था । Xiaoyaosan और fluoxetine उपचार प्रभावी रूप से इन परिवर्तनों को उलट दिया और काफी सुक्रोज वरीयता मॉडल समूह (एफ (3, ५६) = ४१.३७९, दोनों पी = ०.०००) के साथ तुलना में वृद्धि हुई ।

ओपन फील्ड टेस्ट

तनाव जोखिम से पहले, सभी चूहों एक समान व्यवहार राज्य का प्रदर्शन (आधारभूत शर्तें. चित्रा 2c और 2d) । हालांकि, तीन सप्ताह के लिए तनाव जोखिम के बाद, कुल दूरी पांच मिनट में स्थानांतरित काफी समूहों के बीच अलग । मॉडल समूह में चूहों द्वारा ले जाई गई कुल दूरी काफी कम थी (एफ (3, ५६) = ४.२१६, पी = ०.००३, चित्रा 2f) नियंत्रण समूह की तुलना में । इसके अलावा, केंद्रीय क्षेत्र में प्रविष्टियों की संख्या भी समूहों के बीच काफी अलग था । मॉडल समूह के मध्य ज़ोन में प्रविष्टियों की संख्या में काफी कमी आई (F (3, ५६) = २.८०९, p = ०.०१३, चित्रा 2e) नियंत्रण समूह के साथ तुलना में । Fluoxetine उपचार गतिवान प्रवृत्ति में इन परिवर्तनों को रोका और काफी कुल दूरी और मध्य क्षेत्र में प्रविष्टियों की संख्या में सुधार (एफ 3, ५६) = ४.२१६, पी = ०.०२९; एफ (3, ५६) = २.८०९, पी = ०.००४) । एक ऐसी ही घटना भी Xiaoyaosan उपचार समूह में मनाया गया था (एफ (3, ५६) = ४.२१६, पी = ०.०१४; एफ (3, ५६) = २.८०९, पी = ०.०२९) ।

Figure 1
चित्रा 1 : चूहों शारीरिक राज्य में CUMS प्रेरित परिवर्तन पर Xiaoyaosan के प्रभाव । चूहों कोट राज्य (क) और शरीर के वजन (ख) साप्ताहिक तनाव की अवधि के दौरान मापा गया । डेटा मतलब ± SEM के रूप में व्यक्त किए गए, n = प्रति समूह 15 । ** p < ०.००१ बनाम नियंत्रण; ΔΔ p < ०.००१ मॉडल बनाम । यह आंकड़ा डिंग, एट अल से संशोधित किया गया है । 18 कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2 : Xiaoyaosan के CUMS पर प्रभाव-प्रेरित अवसादग्रस्तता-व्यवहार की तरह । व्यवहार परीक्षणों की एक बैटरी का आयोजन किया गया था, और निम्नलिखित मापदंडों मापा गया: सुक्रोज वरीयता (ए, बी), केंद्र क्षेत्र में प्रविष्टियों की संख्या (सी, ई), और कुल दूरी (हरकत गतिविधि) स्थानांतरित (डी, एफ). डेटा मतलब ± SEM के रूप में व्यक्त किए गए, n = प्रति समूह 15 । * p < ०.०५, * *p < ०.०१, और * * *p < ०.००१ बनाम नियंत्रण; Δ पी < ०.०५, ΔΔपी < ०.०१, और ΔΔΔपी < ०.००१ बनाम मॉडल । यह आंकड़ा डिंग, एट अल से संशोधित किया गया है । 18 कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

इस अध्ययन में इस्तेमाल किया CUMS मॉडल अवसाद24के तनाव प्रवणता मॉडल को स्थापित करने के लिए एक आम तरीका है । CUMS के अधिकांश अभिव्यक्तियां एंटी ड्रग्स, जो संकेत दिया है कि इस मॉडल विधि एक मजबूत पूर्वानुमान वैधता25है द्वारा बहाल किया जा सकता है । इस विधि के द्वारा, पशुओं पुरानी अप्रत्याशित तनावपूर्ण उत्तेजनाओं प्राप्त है और प्रमुख अवसाद के मुख्य लक्षण विकसित, कम जगह वरीयता कंडीशनिंग, anhedonia, और बिगड़ा हुआ भावना सहित26व्यवहार की तरह । यहां, इस प्रोटोकॉल में, Xiaoyaosan या fluoxetine के निरंतर उपयोग के प्रयोग में प्राप्त परिणामों के अनुसार CUMS प्रेरित मॉडल चूहों के अवसादग्रस्तता की तरह व्यवहार में सुधार कर सकते हैं; fluoxetine Xiaoyaosan के हस्तक्षेप प्रभाव साबित करने के लिए एक सकारात्मक नियंत्रण दवा के रूप में है ।

कोट स्कोर के मूल्यांकन, खुले मैदान परीक्षण, मजबूर तैराकी परीक्षण, या नवीनता दबा खिला परीक्षण के विपरीत, एक उपाय है कि मनुष्य में अवसाद के साथ जुड़ा हुआ नहीं है, लेकिन सबसे प्रचलित, विश्वसनीय, और निराशाजनक मॉडल के लिए अच्छी तरह से मांय विधि है माउस के27। वर्तमान अध्ययन में, मॉडल समूह में कोट राज्य के एक क्रमिक dystrophy प्रेरित किया गया था और तनाव के दो सप्ताह के बाद मौजूद नहीं था, लेकिन CUMS प्रक्रिया के अंत में बिगड़ा (तीन सप्ताह), जबकि शरीर के वजन के बाद समूहों के बीच काफी अलग नहीं था तनाव जोखिम के एक सप्ताह । हालांकि, प्रत्येक समूह में शरीर के वजन का अंतर दो सप्ताह के लिए मॉडलिंग के बाद उभरने लगे, इस प्रकार तीन सप्ताह के अंत तक एक बाद की कमी के लिए अग्रणी । परिणाम संकेत मिलता है कि CUMS प्रेरित चूहों की शारीरिक स्थिति में इन परिवर्तनों को दोनों Xiaoyaosan और fluoxetine उपचार द्वारा उलट जा सकता है, सुझाव है कि Xiaoyaosan उदास चूहों के शारीरिक राज्यों में सुधार हो सकता है.

आगे cums मॉडल को मांय और इस प्रोटोकॉल, एक सुक्रोज वरीयता परीक्षण और एक खुला क्षेत्र परीक्षण में इस्तेमाल किया यौगिक के प्रभाव को सत्यापित करने के लिए cums प्रेरित चूहों में संभव अवसादग्रस्तता व्यवहार का आकलन किया गया । सुक्रोज वरीयता में anhedonia की कमी को कुतर में पटाने वाले राज्य के मूल्यांकन के लिए इस्तेमाल किया गया, जबकि खुले मैदान का परीक्षण, एक पशु मनोवैज्ञानिक परीक्षण के रूप में, सामान्यतः हरकत फ़ंक्शन और28कुतर के भावनात्मकता का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है. परिणाम से पता चला है कि तनाव जोखिम के 3 सप्ताह चूहों के सुक्रोज वरीयता पर एक स्पष्ट प्रभाव था, और anhedonia दोनों Xiaoyaosan और fluoxetine उपचार द्वारा उलट गया था । खुला क्षेत्र परीक्षण सामांयतः हरकत समारोह और प्रयोगशाला जानवरों में भावुकता का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है29। इस अध्ययन में, यह अवसादग्रस्तता व्यवहार का विश्लेषण करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । ओपन फील्ड टेस्ट के परिणामों से पता चला कि मॉडल समूह में चूहों द्वारा ले जाई गई कुल दूरी नियंत्रण समूह की तुलना में काफी कम थी. इसके अलावा, केंद्रीय क्षेत्र में चूहों के मॉडल समूह द्वारा प्रविष्टियों की संख्या चूहों के उपचार समूह की तुलना में काफी कम था, जो सुझाव दिया है कि CUMS प्रेरित चूहों अवसादग्रस्तता की तरह व्यवहार प्रदर्शित. अध्ययन से यह भी पता चला है कि Xiaoyaosan और fluoxetine खुले क्षेत्र परीक्षण में प्रस्तुत परिवर्तनों को उन्नत कर सकते हैं ।

इसी तरह पिछले अध्ययनों में चर्चा परिणामों के साथ समझौते में, इस पत्र से पता चला है कि CUMS सुक्रोज खपत और हरकत गतिविधि में कमी का कारण बनता है । Xiaoyaosan के निरंतर उपयोग की रोकथाम और चूहों में CUMS प्रेरित अवसाद के उपचार के लिए प्रभावी था । कई अध्ययनों से अवसाद की जांच की है, एक पशु मॉडल की एक उंनत समझ30अवसाद के तंत्र को स्पष्ट करने के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है । इस प्रोटोकॉल में वर्णित CUMS विधि प्रभावी रूप से चूहों की अवसाद राज्य प्रदर्शित कर सकते हैं । जीर्ण हल्के तनाव के विपरीत (सीएमएस) या पुरानी स्थिरीकरण तनाव (सीआईएस) विधि31,३२, CUMS के प्रमुख बिंदु अप्रत्याशित तनाव और मॉडल मूल्यांकन के तर्कसंगत आवेदन के चयन में निहित है । आगे विधि और इस प्रोटोकॉल में दिखाया परिणाम की पुष्टि करने के लिए, भविष्य के काम और अधिक तनाव और cums विधि के लिए मूल्यांकन विधियों के चयन और Xiaoyaosan की लंबी अवधि के प्रभाव का पता लगाने के लिए शामिल करना चाहिए cums के 28-48 दिनों के लिए ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

इस शोध को राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन ऑफ चाइना (no. 81630104; सं. ८१४७३५९७), और केंद्रीय विश्वविद्यालयों के लिए मौलिक अनुसंधान निधि (no. २०१८-JYBZZ-XS005) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था । प्रोटोकॉल और परिणाम इस पत्र में प्रदर्शन सामान्यीकृत Glial Fibrillary अम्लीय प्रोटीन अभिव्यक्ति के Hippocampi में क्रोनिक पर दबाव डाला चूहों पर Xiaoyaosan के प्रभाव की तरह के लेख में शामिल होने से स्रोत डॉ. Xiu-फेंग डिंग, एट अल ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Chinese Herbs Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company - The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d.
Fluoxetine PATHEON FRANCE 5545A The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d.
C57BL/6j mice Beijing Vital River of the Charles River Company SCXK 2011-0004 60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company.
Mouse cage Styling Biotechnology 34853016 318×202×135 mm
Distilled Water - - The water was used througout the experiment.
Sucrose Sigma - The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution.
ACS-2EAS Electronic Balance Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd. - It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages.
Wooden Black Lusterless Box - - (40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines.
WV-CP470 Camera Panasonic, Japan - A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test.
Etho Vision 3.0 Software Noldus, Wageningen, Holland - A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice.
SPSS Statistics 21.0 Software IBM - SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups.
Graphpad Prism 6.0 Software Graphpad Software,Inc.USA - Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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व्यवहार समस्या १४३ Xiaoyaosan प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार जीर्ण अप्रत्याशित हल्के तनाव अवसाद व्यवहार ओपन फील्ड टेस्ट सुक्रोज वरीयता परीक्षण
क्रोनिक तनाव चूहों पर Xiaoyaosan के विरोधी अवसाद प्रभाव का मूल्यांकन
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Yan, Z. Y., Li, X. J., Ding, X. F.,… More

Yan, Z. Y., Li, X. J., Ding, X. F., Liu, Y. Y., Chen, J. x. Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice. J. Vis. Exp. (143), e58276, doi:10.3791/58276 (2019).

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