使用荧光假神经递质可视化神经传递

0 次观看1:29 分钟 • March 4th, 2025

从富含多巴胺能神经元的脑切片开始。

将切片在含有荧光假性神经递质(FFNs)的 aCSF 中孵育。

FFNs 是对 pH 敏感的标记物,可模拟多巴胺,在中性环境中的荧光强度高于酸性环境。

这些荧光探针可选择性地进入多巴胺能神经元,并被装载到酸性突触小泡中,在低pH环境下其荧光信号减弱。

将此切片转移至成像室,固定后持续用 aCSF 灌注以去除未结合的 FFNs。

对切片进行成像,以确认FFN以荧光点状结构的形式积累。

接下来,放置刺激电极以施加电刺激。

电脉冲促使钙离子进入神经元,引发突触小泡与神经元膜融合,并将荧光探针释放到细胞外突触间隙中。

在突触间隙的中性 pH 环境中,FFN 荧光强度增强。

再次对切片进行成像,观察细胞外空间中的弥散性荧光,以确认FFN从突触小泡中释放。