人类神经干细胞计数

现在，我将向您展示如何对人神经前体细胞进行计数，当您想将细胞用于免疫化学或想用核因子机器进行转染时，您可以对细胞进行计数。我使用具有边缘网格的相差血细胞仪，我们还使用一种称为 trip 和 blue 的染料。这种染料很有用，因为它可以区分活细胞和死细胞。

死亡或垂死的细胞吸收这种染料，它们呈蓝色。当您观察血液中的细胞时，细胞仪和活细胞能够排除这种染料，它们，它们，它们，它们不会呈现蓝色。这样您就可以确定细胞的活力，以制备 TRIP 和 Blue 以及培养基的溶液。

我将向这个 0.5 mil 外延管中加入 20 微升 Trap 和蓝色溶液。然后我将添加 25 微升培养基。所以现在我有 45 μL 的捕集盘蓝色和培养基溶液，这样当我加入 5 μL 细胞悬液时，我将进行 1 到 10 的稀释。

所以现在我要添加 5 μL 细胞悬液。首先，我将确保通过手指涡旋充分重悬细胞。所以现在我想确保这个解决方案混合得很好。

所以我要把床上放下几次。最后，我将大约12 μL的这种细胞悬液加载到血细胞仪中。它有两个端口，您可以使用任何一个。

因此，您所要做的就是在该端口引入溶液，液体将被毛细管作用吸走。现在我准备好数数了。下面是 10 倍的血细胞仪，这里有一个包含 16 个正方形的象限。

正如你所看到的，我们可以在这里观察到活细胞和死细胞。在这里，我们有活细胞，例如 this 和 this 和 this。我们还有一些死细胞，比如这个。

如果你注意到，死细胞呈深蓝色，而活细胞周围有某种冰雹。所以现在我要计算所有活细胞。所以我要从左到右，从上到下。

1、2、3、4、5、6、33、1 32、33、34、3 5、3 6。所以我们在这个象限中总共有 3 个 6 个单元格。因此，当我看到位于象限边界线上的单元格（例如此处的这条线）时，为了保持一致，我会对位于左边框和上边框上的单元格进行计数。

我始终如一地对血细胞仪上所有象限的这些边界上的细胞进行计数。所以现在我们要计算每微升有多少个细胞。为了做到这一点，我将取每个象限的单元格的平均值，即 38 乘以 10，这是一个由腔室尺寸决定的因素。

我们还要乘以 10，这就是我们在本例中的稀释因子。最后，我们将得到每微升的细胞数。所以在这种情况下，我们每微升有 3， 800 个细胞。

由于我们将细胞托盘悬浮在 500 微升溶液中，因此您可以计算出您总共有多少个细胞。我们都准备好了。