一种用于大鼠脑组织样本的疏水性组织透明化方法

从脑组织样本开始，由于色素和脂质的存在，该样本不透明。这些成分会导致荧光标记的神经元发生光散射。

依次将组织置于甲醇浓度逐渐升高的溶液中孵育，以去除其中的水分，逐步使组织脱水。

然后，用浓甲醇处理该组织以去除残留水分，确保完全脱水。

接下来，将组织转移至含有二氯甲烷和甲醇的初始透明化溶剂中。

在温和振荡条件下孵育，使溶剂充分渗透组织深处。

二氯甲烷可去除组织中的色素和脂质，减少光散射，从而增强组织透明度。

最后，将组织转移至二苄基醚（一种疏水性溶剂）中，不振荡孵育。

溶剂作为最终的透明剂，可进一步增强组织的透明度。

该过程可改善光线穿透，从而实现对脑组织样本中标记的神经元及其连接的更清晰观察。

将样品依次在20%、40%、60%、80%和100%甲醇中孵育，每种浓度均在室温下孵育1小时。随后，在新鲜的100%甲醇中孵育过夜。次日，在室温下将样品置于新配制的66%二氯甲烷与33%甲醇混合液中，振荡孵育3小时。3小时后，将样品置于二苄基醚中，不振荡，孵育至组织透明。然后将样品保存在二苄基醚中，直至成像。