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DOI: 10.3791/53785-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
唾液腺功能减退,头颈部放疗的主要不良反应会降低患者的生活质量。在动物模型中证明新疗法的疗效是临床过渡前的先决条件。该方案描述了大鼠下颌下腺的导管后给药和局部照射。
该程序的总体目标是在下颌下腺进行导管后治疗,以评估其对抗唾液腺功能障碍的疗效。这种方法可以帮助回答唾液腺疾病领域的关键问题,例如哪些疗法可以预防或恢复唾液腺功能免受辐射。该技术的主要优点是唾液腺可以局部治疗,从而降低非目标组织副作用的风险。
一般来说,刚接触这种方法的人会很挣扎,因为看不到导管开口,并且必须盲目地将套管纵到导管中。在手术开始之前,用头皮剪下一根 10 厘米长的 PE 10 聚乙烯管,然后用每只手的食指和拇指抓住管子的两端,在温和的火焰上方加热管子的中间部分,小心地拉动两侧,将软化的管子拉伸到其长度的两倍。接下来,用头皮以 45 度角切开中间的管子,以获得两个尖头的套管。
将其中一个套管的非锥形端拉伸到 29cc 胰岛素注射器的 0.5 号针头上。然后取出套管,将 220 微升生理盐水溶液吸入注射器中。轻敲注射器轴以去除任何气泡,然后将套管重新连接到针头上。
按下柱塞以排出套管中的空气,并确保溶液通过管道自由流动,并将注射器中的盐水体积调节至 200 微升。现在通过脚趾捏和触觉反射确认大鼠的适当镇静水平,并在暴露的角膜上涂抹眼部润滑剂。将 amimal 放在专门设计的约束平台上,并将上切牙与横杆啮合。
将橡皮筋绕在下切牙上以拉下巴。将其锚定到平台。接下来,将无菌缝合线穿过舌头并将其抬起以抬高口腔底部。
然后使用止血钳夹住缝合线,并将止血钳穿过横杆。接下来,使用定制的脸颊扩张器来扩张脸颊,并使用解剖显微镜来定位口腔底部的舌下。使用精细的镊子抓住预制 PE 10 管的锥形端,轻轻地将套管尖端拧入舌下上的导管口。
然后将套管穿入导管 3 到 5 毫米,确保套管顺利穿过导管。在滴入生理盐水之前,将萎缩液皮下注射到动物颈部的皱褶中。注射后 10 分钟,用一滴氰基丙烯酸酯将套管固定到导管口。
胶水干燥后,以每分钟 50 微升的速度缓慢压下注射器柱塞,直到 200 微升盐水溶液滴入腺体。如果您在滴注过程中遇到背压,请停止然后拔出管子,然后用新的套管重新通管。然后用止血钳夹住管路,小心地取出注射器。
将管子留在导管中 30 到 60 分钟,直到动物恢复意识。然后取下固定舌头的缝合线,在加热灯下将动物转移到单独的笼子中,直到它完全恢复。对下颌下腺局部进行分次照射。
柱状放置一个 3 厘米的放射野狭缝,该狭缝包括从可移动体的下缘到仰卧位麻醉大鼠胸骨顶部的区域。在该区域放置 1 厘米的组织等效推注后。使用直线加速器上的 6 兆伏光子束将辐射源和推注顶部之间的距离调整到 100 厘米。
用 2.5 戈瑞射线照射动物适当的暴露时间。正如刚才所证明的那样,在辐射暴露期结束时,在动物的恢复过程中加热动物。在初始实验中,通过用苏木精或tryplan blue溶液注入腺体并评估安乐死动物的腺体染色来确认套管的正确放置。
研究下颌下腺,因为它们可以用柱状辐射选择性地照射到颈部,避免了可能影响动物健康和实验结果的严重口腔脱靶效应。对这种分次放疗方案对放疗后 8 周唾液流量影响的分析表明,每天暴露于 2.5 灰度增量会急剧减少唾液流量。与未受辐照动物相比,受辐照动物的唾液输出量减少了 10 倍。
一旦掌握了这项技术,如果执行得当,可以在几分钟内完成。在尝试此程序时,重要的是要记住确保套管不受限制地进入唾液腺的排泄管。开发后,这项技术为唾液腺疾病领域的研究人员探索放射和自身免疫性唾液腺疾病的治疗方法铺平了道路。
看完这个视频,你应该对如何在大鼠的下颌下腺进行导管后置入术和局部照射腺体以评估辐射毒性改善的治疗效果有一个很好的了解。不要忘记,使用基因和蛋白质疗法可能非常危险,在执行此程序时应采取预防措施,例如避免针刺和尽量减少皮肤接触生物制剂。
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