经颅直流电刺激 (tDCS) 在小鼠中的作用

阿尔瓦尔高德程序是应用颅内直流刺激小鼠。这可以通过从直流发生器产生低强电流，并通过电极直接发送到动物来达到目的。tDCS已被调查为一种非药物治疗替代人类主要精神疾病，如抑郁症，精神分裂症，阿尔茨海默病，AHDH和自闭症。

此外，tDCS 是一种独特的技术，因为它成本低、易用性和非侵入性型材。然而，tDCS的生物效应并不完全了解，对于刺激参数，如大脑区域的当前强度、持续时间和瓷砖，没有共识。因此，使用最低订单对于彻底研究这种机制至关重要，通过获取和分析行为细胞和分子数据，可以更好地了解tDCS的临床疗效。

目前有两个电极设置的tDCS，称为阴极刺激。在阳极刺激中，电流直接传递到动物的头部，通过动物的身体，并进入位于动物胸部的阴极。在阴极刺激中，电流通过动物的胸向进入，一次次进入其头部并进入阴极。

在这两种情况下，电流发生器控制电流强度和刺激持续时间。同时产生接触质量和推断反馈。有许多不同的设置用于主动定位。

因此，应考虑所有三维轴。在该协议中，头部电极被植入根状的胸腔中一毫米，植入头骨的一侧到中线，身体电极被定位到动物的胸前。由于短期模拟，建议使用快速动作和短期麻醉，如蒸发异氟。

此过程由两个关键步骤组成。电极放置和颅直电流刺激。手术器械在440摄氏度的预维护下进行消毒。

棉签在121摄氏度下以每平方英寸20磅的速度自动下，20分钟。将热平台控制器温度降至 37 摄氏度。称量动物，并计算麻醉诱导的适当剂量。

使用氯胺酮和锡胺的混合物，剂量为每公斤氯胺酮100毫克，每公斤氯胺酮8毫克。针号 31G。动物应在2至3分钟内入睡。

使用电动剃须刀或剃须刀剃光手术现场。将动物放在预热加热板上的立体技术装置上。握住动物的头，将尖耳杆插入动物的耳朵，将其固定到类固醇平台上。

验证没有横向头部移动，通过缓慢移动动物的头部来几乎没有垂直移动。轻轻将麻醉面罩滑过鼠标的鼻子，通过拧紧螺钉固定到位。在动物的眼部涂抹眼药膏，防止手术期间角膜干燥。

使用棉签准备手术现场与三个交替磨砂的波维酮碘，或2%氯和西丁和70%乙酸。使用一对钳子通过轻轻挤压动物脚趾来验证麻醉，并验证动物皮多-戒断一般捏反射的规律。在动物的耳线后部约三毫米的切口，并停止在眼线。

切口部位的长度必须大约为一厘米，才能接受植入物。用骨刮刀轻轻刮擦颅骨，以改善胶水和水泥的粘附性。这必须轻手进行，意图创造微划痕。

小心地将手术钩定位到松弛的皮肤上，以保持一个开放的手术场，并释放障碍物，如皮毛。使用无菌棉签轻轻干燥动物的头皮。使用解剖显微镜可视化动物颅骨的顶部。

将针头连接到类固醇支架上，并找到呼吸器。将针头放在动物头部正上方，轻轻触摸啤酒。使用啤酒作为参考来调整感兴趣区域的坐标。

将植入物固定到立体税支架上。将植入物放在动物的头上，然后慢慢降低到感兴趣的区域。使用针头将一滴大约35微升的超级胶水扩散到植入空间。

缓慢地向下移动支架，直到它触及头骨。确保植入物空间与表面完全接触。根据制造商的说明准备手术水泥。

精确定位后，在颅骨上涂抹三层薄薄的、均匀的水泥，并涂抹在植入物的下部。使用应用程序画笔应用每滴丢弃。层必须形成U形结构，以进一步结构支撑植入物。

保持植入物的螺钉螺纹清洁水泥，以便保持平稳、畅通无阻的连接。让每层干燥约四分钟。干燥后，小心地取出支架，直到支架与植入物完全分离。

处理植入物时，请格外小心，因为植入物可能会意外从动物的头骨上被破坏。用盐水浸泡棉签水合动物的皮肤和切口部位。切开植入物底部的皮肤。

使用一对钳子将组织放在一起，并关闭切口与一滴组织手术胶水每点2厘米的组织。在切口部位和底层组织中渗透 1 至 2% 利多卡因。同时用500微升的乳酸环环器水合动物。

将鼠标放入预热的 37 摄氏度清洁的单屋笼中。在笼子里建一小盘湿食物颗粒，以便于以下时间获得食物。登记动物手术后的体重。

动物必须用酮保芬管理。手术后和接下来的两天，每公斤同时5毫克。确保 tDCS 刺激器已充满电。

将阳极和阴极电缆连接到 tDCS 刺激器，并在仿真站点附近提供。将引脚型电极连接到类固醇支架上。将热平台设置为 37 摄氏度。

将吸入麻醉系统上的氧气流量计打开至每分钟 1 升。将鼠标放入麻醉诱导室。将异氟化蒸发器打开至3%，让动物在四分钟内接受异氟作用。

当动物在感应室时，使用无菌注射器向身体电极填充0.9%盐水溶液。将动物从感应室中取下，并将其胸部放在身体电极上。轻轻将麻醉面罩滑过鼠标的鼻子并固定到位。

将异氟素输出降低至1.5%，用盐水填充植入物和引脚型电极。小心地将它们连接在一起。根据您的协议调整刺激时间和当前强度。

稍后验证 tDCS 系统上的触点质量。开始刺激。观察电流向上 20 秒以选择的值。

并保持自己在既定时间。然后，在部分结束时再次向下斜坡。激活小腿按钮进行控制。

观察电流向上 20 秒以选择的值。然后在刺激期的其余部分向下一个，最后一个渐变到所选值，在结束时，连续向下。一个刺激部分完成，小心地将动物转移到预热的37摄氏度的笼子里10分钟。

该协议使用tDCS刺激小鼠的大脑皮层一毫米前，以布雷格玛。此图显示了tDCS刺激方案后的统计化和基因表达。每天使用 0.35 毫安的电流强度 10 分钟。

tCDS植入物从第一天到第五天呈现自我可行，接触质量无显著差异。模型大脑中有各种各样的tCDS刺激方案。协议必须根据实验本身的特殊性来选择。

刺激区域、电流强度、会话持续时间和电极定位。在这个特殊的协议中，我们的目的是通过我们已知的tDCS调节运动皮层，电流为350微米，10分钟。观看此视频后，您将能够在鼠标中执行 tDCS。

当某人做手术时，每个动物最多可能需要四分钟。在手术过程中利用小鼠和手术后对动物进行护理时，必须考虑到动物护理指南，以便动物在研究期间保持健康。我们还建议在植入放置后等待五到七天进行实验，因为动物对创伤的生理反应可能会干扰生物结果。