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2022年4月25日
2022年4月25日
•本方案描述了一种高通量的成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)基因编辑工作流程,用于微小RNA(miRNA)簇网络分析,可在单次实验中快速构建一系列基因修饰的细胞系,这些细胞系携带不同miRNA簇成员的特异性缺失组合,缺失片段长度可达35 kb。
Chapters in this video
0:04
Introduction
0:58
Preparation of CRISPR Gene Editing and Guide RNA Design to Generate miRNA Cluster Knockout Cell Lines
2:06
Generation of Stable Lentiviral Cell Lines Carrying the DOX-Inducible Cas9 Expression Cassette
3:20
Performing CRISPR Reactions by Cas9 Induction and Synthetic Guide RNA Transfection of Cells Using a High-Throughput Format
7:22
PCR Genotyping of CRISPR Cell Lines Using Crude Cell Lysates
8:37
Results: High-Throughput CRISPR Experimental Design to Generate Multiple miR-888 Cluster Deletion Combinations
9:51
Conclusion
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