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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:22 Min. • January 30th, 2026
Nehmen Sie IgM-opsonisierte rote Blutkörperchen (SRBCs) mit IgM-Antikörpern, die an die Zelloberflächenantigene gebunden sind.
Fügen Sie serumhaltige Komplementproteine außer C5 hinzu.
Der C1-Komplex bindet an die Antikörper und wird aktiv.
Aktiviertes C1 spaltet C4 und C2 und bildet eine C3-Konvertitase, die dann C3 spaltet und C3b auf den SRBCs ablagert.
Ohne C5 zerfällt C3b zu C3bi.
Fügen Sie die SRBCs einer Makrophagenkultur hinzu.
C3bi bindet an den Makrophagenrezeptor und löst die SRBC-Phagozytose aus.
Fügen Sie eine hypotonische Lösung zur Lyse hinzu und entfernen Sie nicht internalisierte SRBCs.
Fügen Sie einen Lysepuffer hinzu, um die Zellen zu lysieren und das SRBC-Hämoglobin freizusetzen.
Führen Sie ein Erkennungsreagenz ein.
In Anwesenheit von Harnstoff katalysiert Hämoglobin die Oxidation von Diaminofluoren durch Wasserstoffperoxid, wodurch ein farbiges Produkt entsteht.
Misse die Absorption des farbigen Produkts, die proportional zu den phagozytosierten SRBCs ist.
Dieser Test modelliert die Phagozytose von antikörpermarkierten Bakterien mithilfe von opsonisierten SRBCs, um bakterielle Ziele nachzuahmen.
Für einen Opsonisierungstest wird bei Zimmertemperatur 2 mal 10 bis zum achten
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