JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 7:02 Min. • April 30th, 2023
Die Blut-Hirn-Schranke (BHS) ist eine selektive Barriere aus Endothelzellen und Gehirnzellen wie Astrozyten, die den Transport von Substanzen zwischen dem Blut und dem Gehirn reguliert.
Um ein BHS-Modell zu entwickeln, drehen Sie einen Membraneinsatz auf einen Kulturplattendeckel
.Säen Sie Astrozyten über die Membran aus. Legen Sie die Kulturplatte über den Einsatz und inkubieren Sie.
Dadurch werden die Astrozyten zwischen der Membran und der Well-Oberfläche eingeschlossen.
Drehen Sie die Platte zurück, um die Astrozyten auf den Boden zu bringen und ein geeignetes Medium in die Vertiefung zu geben.
Fügen Sie dem Insert Endothelzellen hinzu, die optimale Tight-Junction-Proteine exprimieren, die die für die Barrierebildung notwendigen Zell-zu-Zell-Kontakte verbessern.
Inkubieren, damit die Endothelzellen an der Membran haften können.
Entfernen Sie das verbrauchte Medium und übertragen Sie den Einsatz in ein anderes gut enthaltendes, wachstumsfaktorfreies Astrozytenmedium.
Anschließend wird dem Einsatz ein wachstumsfaktorfreies Endothelzellmedium zugesetzt und inkubiert.
Das Fehlen von Wachstumsfaktoren hemmt die Zellteilung, wodurch die Zell-zu-Zell-Kontakte erhalten und die Barriere
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos