Kolorimetrischer Assay zur Quantifizierung von nicht-strukturellen Kohlenhydraten in pflanzlichen Geweben

Verdauliche Kohlenhydrate sind die nichtstrukturellen Bestandteile des Pflanzengewebes und fungieren als Reserveenergiequelle für das Pflanzenwachstum und den Stoffwechsel.

Um die nicht-strukturellen Kohlenhydrate zu quantifizieren, nehmen Sie eine abgemessene Menge Pflanzengewebe in einem Röhrchen. Geben Sie verdünnte Schwefelsäure in das Röhrchen und erhitzen Sie die Probe. Beim Erhitzen hydrolysiert Schwefelsäure die Polysaccharide der verdaulichen Kohlenhydrate in ihre jeweiligen Monosaccharid-Untereinheiten.

Kühlen Sie die Probe ab. Zentrifugieren Sie das Röhrchen, um das unverdaute Pflanzenmaterial zu pelletieren und einen Überstand zu erhalten, der die Monosaccharide enthält.

Aspirieren Sie den Überstand in ein frisches Röhrchen und behandeln Sie die Monosaccharide mit Phenollösung, gefolgt von der Zugabe von Schwefelsäure. Wirbeln Sie das Röhrchen vor, um den Inhalt zu mischen und zu inkubieren.

Während der Inkubation dehydriert Schwefelsäure die Monosaccharide, um Furfuralderivate herzustellen. Diese Furfuralderivate reagieren mit dem Phenol zu einer Gelbgoldlösung.

Spektroskopisch bestimmen Sie die Extinktion der Gelbgoldlösung bei 490 Nanometern, die dem Kohlenhydratgeha