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Immunologie
0 Aufrufe • 3:01 Min. • July 8th, 2025
Basierend auf ihren Zelloberflächenrezeptoren werden zirkulierende menschliche B-Zellen in CD19-positive naive B-Zellen, CD19- und CD27-positive Gedächtnis-B-Zellen und CD19-, CD27- und CD38-positive Plasmablasten-Plasmazellen eingeteilt.
Um diese Zellpopulationen zu sortieren, nehmen Sie eine gereinigte B-Zell-Suspension. Inkubieren Sie mit humanen Immunglobulin-G-Antikörpern. Die Antikörper blockieren die Fc-Rezeptoren der B-Zellen und verhindern so eine unspezifische Antikörperbindung.
Fügen Sie fluoreszenzmarkierte Antikörper hinzu, die auf CD19, CD27 und CD38 abzielen.
Die Anti-CD19-Antikörper binden an die CD19-Rezeptoren, die ubiquitär auf B-Zellen exprimiert werden.
Die Anti-CD27-Antikörper binden an die CD27-Rezeptoren, die auf Gedächtnis-B-Zellen und Plasmablasten-Plasmazellen exprimiert werden.
Die Anti-CD38-Antikörper binden an die CD38-Rezeptoren, die auf Plasmablasten-Plasmazellen exprimiert werden.
Fügen Sie einen fluoreszierenden DNA-bindenden Farbstoff als Marker für tote Zellen hinzu.
Tote Zellen weisen einen Verlust der Membranintegrität auf, was den zellulären Eintritt des Farbstoffs und die Bindung an die doppelsträngige DNA ermöglicht; lebende Zellen bleiben u
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