Dreidimensionale quantitative Phasenbildgebung zur Charakterisierung von Lymphozyten-Subtypen
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:37 Min. • July 8th, 2025
Laden Sie eine Lymphozyten-Subtyp-Suspension in eine Bildgebungskammer.
Positionieren Sie die Kammer auf dem 3D-Mikroskoptisch für quantitative Phasenbildgebung.
Passen Sie die Mikroskopparameter und die Fokusebene für eine optimale Bildgebung an.
Bei der Lymphozytenbildgebung teilt sich der Laserstrahl in Referenz- und Probenstrahlen auf.
Das digitale Mikrospiegelgerät, das über ein Mikrospiegelarray im Weg des Probenstrahls verfügt, ermöglicht es, den Strahl um 360 Grad um die optische Achse zu drehen.
Jeder Strahl, der den Lymphozyten durchläuft, durchläuft eine Phasenverschiebung, die auf Variationen des Brechungsindex innerhalb der Zelle basiert.
Die resultierenden Proben- und Referenzstrahlen rekombinieren sich zu einem 2D-Hologramm.
Eine Sequenz von Hologrammen, die Phasen- und Amplitudeninformationen aus verschiedenen Winkeln enthalten, wird durch die Strahldrehung um den Lymphozyten erfasst.
Erfassen Sie mehrere Hintergrundhologramme mit unterschiedlichen Beleuchtungswinkeln, mit Ausnahme von Lymphozyten.
Mit Hilfe des Beugungstomographie-Algorithmus rekonstruieren Sie die Hologramme in ein 3D-Brechungsindex-Tomogramm, das morphologische und biochemische Informationen von
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos