Isolierung und Kultivierung embryonaler Neuronen von Küken auf einem Multi-Elektroden-Array

Nehmen Sie ein befruchtetes Hühnerei, das einen Embryo im Frühstadium enthält.

Sterilisieren Sie die Schale und öffnen Sie sie vorsichtig.

Entferne den Embryo. Präparieren Sie den Kopf und geben Sie ihn in eine Kulturplatte, die einen Puffer enthält. Entferne den Augapfel.

Machen Sie einen Schnitt und entfernen Sie die Hautschichten, wobei das Vorder- und Mittelhirn freigelegt werden.

Entfernen Sie die innere Membranschicht und die Blutgefäße. Präparieren Sie das Vorderhirn und überführen Sie es in eine Kulturplatte mit einem Puffer.

Schneiden Sie das Gewebe in kleinere Fragmente und geben Sie diese in ein konisches Rohr. Sobald sich die Fragmente abgesetzt haben, entfernen Sie den Puffer.

Fügen Sie eine proteolytische Enzymlösung hinzu. Inkubieren, um die extrazelluläre Matrix des Gewebes zu verdauen und Neuronen zu lockern.

Entfernen Sie enzymreiche Medien, waschen Sie sie mit neurobasalen Medien und entfernen Sie alle verbleibenden Enzyme.

Neurobasale Medien hinzufügen. Dissoziieren Sie das Gewebe mechanisch, um eine neuronale Suspension zu erhalten.

Säen Sie diese Neuronen auf ein Mehrelektroden-Array-System, das mit einer extrazellulären Matrix beschichtet ist. Neurobasale Med