Analyse von Amyloid-Strukturen in einem Gewebeschnitt mit Hilfe der Fluoreszenzlebensdauer-Bildgebungsmikroskopie

Nimm einen Gewebeschnitt mit Amyloid-Aggregaten, die abnormale Proteinablagerungen darstellen.

Das Gewebe ist mit dem Fluoreszenzfarbstoff Heptamer-Formylthiophenessigsäure oder hFTAA gefärbt, der spezifisch an Beta-Faltblattstrukturen von Amyloidfibrillen bindet.

Nehmen Sie den Objektträger mit einem konfokalen Mikroskop auf, das mit einer Fluoreszenzlebensdauer-Bildgebungsmikroskopie ausgestattet ist, die die Fluoreszenzlebensdauer der Farbstoffmoleküle misst.

Optimieren Sie die Mikroskopeinstellungen für eine effektive Anregung der Farbstoffmoleküle.

Wenn Laserlicht das Gewebe beleuchtet, regt hFTAA an und fluoresziert.

Eine stärkere Farbstoffbindung in kompakten Strukturen führt zu längeren Lebensdauern, während eine schwächere Farbstoffbindung in weniger kompakten Strukturen zu kürzeren Lebensdauern führt.

Später generiert die Software ein farbcodiertes Bild des Aggregats.

Farben wie Rot und Gelb erscheinen in der Peripherie, was auf eine kürzere Fluoreszenzlebensdauer hinweist, die weniger kompakte, instabile Amyloidstrukturen widerspiegelt.

Während Farben wie Blau und Grün im Kern längere Fluoreszenzlebensdauern repräsentieren und kompaktere und stabilere Amyloidstrukturen wide