JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:16 Min. • June 17th, 2025
Nehmen Sie einen immungefärbten Schnitt aus dem Gehirn einer Maus mit fluoreszenzmarkierten Astrozyten. Das Zytoplasma des Astrozyten fluoresziert rot, während der Zellkern blau fluoresziert.
Legen Sie den Objektträger auf den Tisch eines konfokalen Mikroskops unter eine geeignete Objektivlinse.
Passen Sie mit der Erfassungssoftware den Fokus an und wählen Sie die Fluorophore aus, die das Zytoplasma und den Zellkern des Astrozyten markieren.
Starten Sie die Live-Bildgebung und optimieren Sie die Bildgebungsparameter, um das Rauschen im aufgenommenen Bild zu reduzieren.
Wählen Sie unter Erfassungsparameter einen Scanmodus mit niedriger Geschwindigkeit aus, um ein zweidimensionales Bild mit höherer Qualität aufzunehmen.
Identifizieren Sie die oberste Position des Astrozyten als Ausgangspunkt für den Z-Stapel und die unterste Position als Endpunkt.
Definieren Sie die Anzahl der Segmente, die die gesamte Zellentiefe abdecken.
Führen Sie die Schichten zusammen, um ein dreidimensionales Bild des Astrozyten zu erzeugen.
Um mit der konfokalen Mikroskopie zu beginnen, legen Sie einen Objektträger auf den Mikroskoptisch und wählen Sie das 63x-Objektiv aus. Nachdem Sie die Erfassungssoftware geöffne
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