Charakterisierung von gentechnisch veränderten mesenchymalen Stammzellen für neurotherapeutische Anwendungen
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:23 Min. • August 7th, 2025
Beginnen Sie mit transgenen mesenchymalen Stammzellen der Maus – multipotenten Zellen, die aus dem Knochenmark gewonnen werden.
Die Zellen sind so verändert, dass sie GFP und therapeutische neurotrophe Faktoren exprimieren, die das Wachstum und Überleben der Neuronen unterstützen.
Waschen Sie die Zellen mit Puffer und fixieren Sie sie, um die zelluläre Integrität zu erhalten.
Erneut mit Puffer waschen und dann eine Lösung hinzufügen, um die Zell- und Kernmembranen zu permeabilisieren und unspezifische Bindungsstellen zu blockieren.
Einführung von Primärantikörpern, die auf ein Zellproliferationsmarkerprotein abzielen, das ausschließlich im Zellkern von sich teilenden Zellen exprimiert wird.
Mit Puffer waschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.
Fügen Sie Fluorophor-konjugierte Sekundärantikörper hinzu, die auf die Primärantikörper abzielen, und einen DNA-bindenden Farbstoff, um die Zellkerne gegenzufärben.
Mit Puffer waschen, um ungebundene Reagenzien zu entfernen.
Legen Sie die Platte in das High-Content-Screening-System ein und nehmen Sie Bilder auf, um Fluoreszenzsignale zu erkennen.
Die Expression des Zellproliferationsmarkers deutet auf eine aktive Zellteilung hin, was auf die Eig
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