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Schnelle und effiziente Erzeugung von Neuronen aus menschlichen pluripotenten Stammzellen in eine...
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JoVE Journal Biology
Rapid and Efficient Generation of Neurons from Human Pluripotent Stem Cells in a Multititre Plate Format

Schnelle und effiziente Erzeugung von Neuronen aus menschlichen pluripotenten Stammzellen in einem Multititre Platte Format

Full Text
44,087 Views
07:27 min
March 5, 2013

DOI: 10.3791/4335-v

Miao Zhang1, Hans R. Schöler1,2, Boris Greber1

1Max Planck Institute for Molecular Biomedicine, 2Medical Faculty,University of Münster

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Protokolle für die neuronale Differenzierung von pluripotenten menschlichen Stammzellen (hPSCs) sind oft zeitaufwendig und erfordern erhebliche Zellkultur Fähigkeiten. Hier haben wir ein kleines Molekül-basierte Differenzierung Verfahren zu einem multititre Plattenformat angepasst, die eine einfache, schnelle und effiziente Erzeugung von menschlichen Nervenzellen in einer kontrollierten Art und Weise.

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments ist es, humane pluripotente Stammzellen oder H-PSCs unter Verwendung eines Multi-Titer-Plattenformats in Neuronen zu differenzieren. Dies wird durch die Ernte und Beschichtung einer einzelligen Suspension von H-PSCs in den V-Boden 96 erreicht. Well-Platten, um über Nacht Embryokörper oder EBS zu bilden.

Als nächstes werden die EBS in U-förmige ultra-niedrige Attachment-Platten überführt, die ein Differenzierungsmedium enthalten, um die Neuroektodermbildung zu induzieren. Anschließend werden die EBS auf mit Matrigel beschichtete Schalen plattiert, um das Wachstum von Neuronen zu fördern. Es können Ergebnisse erzielt werden, die das Vorhandensein typischer neuronaler Marker um den achten Tag herum durch Immunfluoreszenz zeigen.

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Stem Cell Biology Ausgabe 73 Neuroscience Biomedical Engineering Medicine Bioengineering Physiologie Genetik Molekulare Biomedizin humanen pluripotenten Stammzellen HPSC neuronale Differenzierung Neuroektoderms Embryoidkörpern chemisch definierten Bedingungen Stammzellen Neuronen Signalwege mittleres Durchsatz PCR multititre Zellkultur

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