Name: Die Ableitung der zeitliche Verlauf der Glutamate Ausverkauf mit Dekonvolutionsanalyse von Astrozytäre Transporter Currents (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 42 s
Description: Erfahren Sie die Dekonvolutionsanalyse astrozytärer Transporterströme zur Bestimmung des Glutamat-Ausverkaufs im Maushippocampus. Diese Methode liefert hochaufgelöste Einblicke in die räumliche und zeitliche Dynamik synaptischer Übertragung.

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Diese Arbeit wurde durch das National Institute of Neurological Disorders and Stroke Interne Research Program (NS002986) unterstützt. AS schrieb das Manuskript und umgesetzt Dekonvolutionsanalyse. JSD entwickelte die erste Version des Dekonvolutionsanalyse und kommentiert den Text.

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<li>Diamond, J. S., Jahr, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptically+released+glutamate+does+not+overwhelm+transporters+on+hippocampal+astrocytes+during+high-frequency+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Synaptically released glutamate does not overwhelm transporters on hippocampal astrocytes during high-frequency stimulation.</a> J. Neurophysiol. 83, 2835-2843 (2000).</li>
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<li>Scimemi, A., Meabon, J., Woltjer, R. L., Sullivan, J. M., Diamond, J. S., Cook, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amyloid%CE%B21-42+slows+clearance+of+synaptically-released+glutamate+by+mislocalizing+astrocytic+GLT-1%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Amyloidβ1-42 slows clearance of synaptically-released glutamate by mislocalizing astrocytic GLT-1.</a> J. Neurosci. 33, 5312-5318 (2013).</li>
</ol>

Die Autoren erklären, keinen Interessenkonflikt.

Hier haben wir einen experimentellen Ansatz zur elektrophysiologischen Ableitungen von Astrozyten erhalten beschreiben, leiten ein analytisches Protokoll Glutamattransporter Ströme in Astrozyten isolieren und eine mathematische Methode, um den zeitlichen Verlauf der Glutamat-Clearance von Astrozyten-Transporter Ströme. Der Erfolg der Analyse beruht auf der Fähigkeit, hochwertige Patch-Clamp-Aufnahmen von Astrozyten zu erhalten und auf die Genauigkeit der Anpassungsalgorithmen verwendet, um d...

Astrozyten sind eine der am häufigsten vorkommenden Zelltypen im Gehirn mit sternförmigen Morphologie und feine Membran Vorsprünge, die in der gesamten Neuropils erweitern und erreichen benachbarten synaptische Kontakte 1,2. Die Astrozyten &#39;Zellmembran ist dicht mit Glutamat-Transporter-Moleküle 3 verpackt. Unter physiologischen Bedingungen Glutamattransporter schnell binden Glutamat an der extrazellulären Seite der Membran und überträgt es auf Zytoplasma der Zelle. Auf diese Weise erhalten die Transporter günstig die basale Konzentration von Glutamat in den extrazellulären Raum 4. Glutamat-Transporter in feine Astrozytenfortsätze benachbarten Synapsen erregenden sind ideal positioniert, um Glutamat während der synaptischen Ereignisse veröffentlicht, sobald sie weg aus dem synaptischen Spalt diffundiert binden. Damit die Transporter auch begrenzen Glutamat Spillover auf peri-und extra-synaptischen Regionen und auf benachbarten Synapsen, die Verringerung der räumlichen Ausbreitung der erregenden Signals im Gehirn 5-7. Glutamate Transport ist ein Prozess elektrogenen stöchiometrisch auf die Bewegung von 3 gekoppelt Na + und H + 1 entlang ihrer elektrochemischen Gradienten und dem Zähler-Transport von 1 K + 8. (Thiocyanat)&gt; NO - 3 - (Nitrat) ≈ ClO 4 - (Perchlorat)&gt; I -&gt; Br -&gt; Cl -&gt; F -, nicht Glutamate Transport mit (aber nicht stöchiometrisch gekoppelt) ein anionisches Leitwert durchlässig SCN verbunden um CH 3 SO 3 - (Methansulfonat) und C 6 H 11 O 7 - (Gluconat) 9-11. Beide Ströme (stöchiometrischen und nicht-stöchiometrischen) durch Erhalten Whole-Cell-Patch-Clamp-Aufnahmen von Astrozyten, visuell unter Dodt Beleuchtungs-oder Infrarot-Differential-Interferenz-Kontrast (IR-DIC) in acut identifiziert aufgezeichnet werdene Gehirnscheiben 12. Das stöchiometrische Komponente des Stroms mit Glutamat Transport über die Membran verbunden sind, können durch Verwendung von CH 3 SO 3 isoliert werden - oder C 6 H 11 O 7 - basierten intrazellulären Lösungen und kann durch Flash-Uncaging Glutamat auf Astrozyten 13,14 hervorgerufen werden, oder durch die Aktivierung Glutamat-Freisetzung aus benachbarten Synapsen, entweder elektrisch 12 oder mit einer gezielten optogenetische Kontrolle. Der zeitliche Verlauf der stöchiometrischen Komponente des Transporters Strom durch die Lebensdauer des Glutamat-Konzentration in Astrozyten Profil Membranen (zB Glutamat Clearance) geformt, die Kinetik der Glutamat-Transporter, die passive Membran Eigenschaften von Astrozyten und während der synaptischen Reize, durch die Synchronität der Freisetzung von Glutamat in den aktivierten Synapsen 13. Hier beschreiben wir ausführlich: (1) eine experimentelle ca.oach die stöchiometrische Komponente von Glutamat-Transporter Ströme von whole-cell Patch-Clamp-Aufnahmen von Astrozyten mit akuten Maus Hippocampus als Beispiel experimentelle Vorbereitung isolieren, (2) ein analytischer Ansatz zur Ableitung des zeitlichen Verlaufs von Glutamat-Clearance von diesen Aufnahmen 13, 14. Diese Methoden können verwendet werden, um aufzuzeichnen und zu analysieren Glutamattransporter Ströme von Astrozyten in einer beliebigen Region des zentralen Nervensystems werden.

<table><tbody><tr><td>CGP52432</td><td>Tocris</td><td>1246</td><td></td></tr><tr><td>(R,S)-CPP</td><td>Tocris</td><td>173</td><td></td></tr><tr><td>DPCPX</td><td>Tocris</td><td>439</td><td></td></tr><tr><td>LY341495 Dinatriumsalz</td><td>Tocris</td><td>4062</td><td></td></tr><tr><td>MSOP</td><td>Tocris</td><td>803</td><td></td></tr><tr><td>NBQX Dinatriumsalz</td><td>Tocris</td><td>1044</td><td></td></tr><tr><td>D,L-TBOA</td><td>Tocis</td><td>1223</td><td></td></tr><tr><td>Picrotoxin</td><td>Sigma</td><td>P1675</td><td></td></tr><tr><td>MNI-L-Glutamat</td><td>Tocris</td><td>1490</td><td></td></tr><tr><td>Alexa 594</td><td>Life Technologies</td><td>A10438</td><td>Optionale</td></tr><tr><td>Matrixelektroden</td><td>Frederick Haer Company</td><td>MX21AES(JD3)</td><td></td></tr><tr><td>Kapillaren aus Borosilikatglas</td><td>World Precision Instruments</td><td>PG10165-4</td><td></td></tr><tr><td>Zweistufiger Mikropipettenabzieher aus Glas</td><td>Narishige</td><td>PC-10</td><td></td></tr><tr><td>Loctite 404 Sekundenkleber</td><td>Ted Pella</td><td>46551</td><td></td></tr><tr><td>Xe Lampe</td><td>Rapp OptoElectronic</td><td>FlashMic</td><td></td></tr><tr><td>Igor Pro 6</td><td>Wavemetrics</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

die ableitung der zeitliche verlauf der glutamate ausverkauf mit dekonvolutionsanalyse von astrozytäre transporter currents

Deriving the Time Course of Glutamate Clearance with a Deconvolution Analysis of Astrocytic Transporter Currents

Die höchste Dichte von Glutamat-Transporter im Gehirn in Astrozyten gefunden. Glutamattransporter Paar die Bewegung von Glutamat durch die Membran mit dem Co-Transport von 3 Na + und H + 1 und der Gegenelektrode Transport von 1 K +. Das stöchiometrische Strom, der durch den Transport Prozess erzeugt wird, kann mit whole-cell Patch-Clamp-Aufnahmen von Astrozyten überwacht werden. Der zeitliche Verlauf der aufgezeichneten Strom wird durch den zeitlichen Verlauf der Glutamatkonzentration Profil auf die Astrozyten ausgesetzt sind, die Kinetik der Glutamat-Transporter, und die passive elektrotonischen Eigenschaften von Astrozyten Membranen geformt. Hier beschreiben wir die experimentellen und analytischen Methoden, die verwendet werden, um Glutamattransporter Ströme in Astrozyten erfassen und isolieren den zeitlichen Verlauf der Glutamat-Clearance von allen anderen Faktoren, die die Wellenform der Astrozyten-Transporter Ströme formen kann. Die hier beschriebenen Methoden können verwendet werden, um die Lebensdauer o abzuschätzenf Flash-uncaged und Glutamat in Astrozyten Membranen in jeder Region des zentralen Nervensystems bei Gesundheit und Krankheit synaptisch-released.

Der Erfolg der analytischen hier beschriebene Ansatz hängt entscheidend von hoher Qualität zu erhalten elektrophysiologischen Ableitungen von Transporter Ströme von Astrozyten in jeder Region des zentralen Nervensystems. In akuten Maus Hippocampus kann Astrozyten leicht unter Dodt Beleuchtung oder IR-DIC werden wegen ihrer kleinen Zellkörper (Ø = 10 um) und prominente Kern (Abbildung 1) identifiziert. Ihre markante sternförmige Morphologie mit Epifluoreszenz, konfokale oder Zwei-Photonen-Laser-Scanning-...

Wir beschreiben eine analytische Methode, um die Lebensdauer von Glutamat an astrozytären Membranen schätzen von elektrophysiologischen Ableitungen von Glutamat-Transporter Ströme in Astrozyten.

Die Ableitung der zeitliche Verlauf der Glutamate Ausverkauf mit Dekonvolutionsanalyse von Astrozytäre Transporter Currents

The highest density of glutamate transporters in the brain is found in astrocytes. Glutamate transporters couple the movement of glutamate across the ...

Das übergeordnete Ziel des Experiments besteht darin, den zeitlichen Verlauf der Glutamataufnahme an astrogliären Membranen nach dessen Freisetzung aus erregenden Synapsen zu bestimmen. Der erste Schritt dieses Vorgangs ist die Aufzeichnung synaptisch ausgelöster Glutamattransportvorgänge aus Astrozyten in akuten Hirnschnitten in Abwesenheit und Gegenwart einer unter-sättigenden Konzentration des Breitband-Glutamattransporter-Antagonisten TBOA. Der zweite Schritt besteht darin, die Aufzeichnungen zu analysieren, um die synaptisch aktivierten Glutamattransporterströme von allen anderen Komponenten der evozierten Antwort zu isolieren.Anschließend wird der Zeitverlauf der Filterung geschätzt, indem die in Gegenwart von TBOA aufgezeichneten Transportstromstärken durch Entfaltung des Filters aus den unter kontrollierten Bedingungen erfassten Transportvorgängen analysiert werden. So erhält man den Zeitverlauf der Glutamat-Entfernung von den astrogliären Membranen. Die Ergebnisse zeigen, dass Astrozyten im Maushippocampus nur wenige Millisekunden benötigen, um synaptisch freigesetztes Glutamat aus dem extrazellulären Raum zu entfernen.Dieser Ansatz stellt ein empfindliches Werkzeug zur Detektion von Veränderungen der astrogialen Aufnahmekapazität in verschiedenen Hirnregionen während physiologischer und pathologischer Zustände dar. Der Hauptvorteil dieses Ansatzes gegenüber anderen Methoden, die beispielsweise auf der Displacementsanalyse schnell dissoziierender Glutamatrezeptorantagonisten an fluoreszierenden Glutamatindikatoren oder auf Computersimulationen von Diffusionsreaktionen beruhen, liegt darin, dass er eine hohe zeitliche Auflösung bietet und einen direkten experimentellen Nachweis des Glutamat-Abbaus durch Astrozyten ermöglicht. Diese Methode erlaubt es uns, die räumlichen und zeitlichen Dynamiken der synaptischen Transmission im Gehirn zu verstehen.Es kann uns helfen, pathophysiologische Veränderungen in Glutamat, Diffusion und Aufnahme zu interpretieren, die bei bestimmten neurologischen Erkrankungen wie Alzheimer auftreten können. Beginnen Sie dieses Verfahren, indem Sie mit einem Skalpell fünf Schnitte an einem präparierten Maushirn anbringen. Entfernen Sie zuerst die Riechkolben und die frontale Hirnrinde.Zweitens entfernen Sie das Kleinhirn. Danach entfernen Sie die linken und rechten Schläfenlappen. Anschließend trennen Sie die beiden Gehirnhälften durch einen mittelsagittalen Schnitt.Als Nächstes kleben Sie die Seitenfläche jedes Gehirnschnitts auf die kalte Basisplatte des Vibroms. Die dorsale Seite des Gehirns sollte dabei zur Klinge des Vibroms weisen, während die ventrale Seite des Gehirns mit dem Agarblock in Kontakt steht, der sich abseits der Vibromklinge befindet. Danach befestigen Sie die Vibrom-Basisplatte am Präparationskammer.Stellen Sie die Schnittdicke auf 250 Mikrometer ein und passen Sie die Breite der Klinge vor dem Schneiden an. Sobald die Klinge durch den Cortex und das Hippocampus hindurchgegangen ist, schneiden Sie den Cortex Hippocampus mit einem Skalpell vom Mittelhirn ab. Anschließend bringen Sie einen Schnitt in die Tauchkammer bei 34 Grad Celsius, nachdem Sie die Schnitte 30 Minuten lang bei 34 Grad Celsius gehalten haben.Lassen Sie sie vor der Verwendung für die Elektrophysiologie-Aufzeichnungen in diesem Verfahren 30 Minuten lang auf Raumtemperatur abkühlen, überführen Sie eine Schnittpräparation in die Ableitungskammer. Untersuchen Sie die Schnittpräparation visuell unter Punktbeleuchtung oder I-R-D-I-C. Astrozyten können anhand ihres kleinen Zellkörpers und ihres ausgeprägten Zellkerns zur synaptischen Stimulation identifiziert werden.Platzieren Sie eine bipolare Edelstahlelektrode etwa 100 Mikrometer entfernt von dem Astrozyten, den Sie abdichten möchten. Dichten Sie den Astrozyten ab und gelangen Sie durch Anlegen eines sehr leichten Saugdrucks in die Ganzzell-Konfiguration. Wechseln Sie dann alle 10 bis 20 Sekunden zwischen einzelnen und gepaarten Reizen, um die facilitierten Anteile der synaptisch aktivierten Transportereignisse zu isolieren.Erstellen Sie zunächst einen Mittelwert aus mindestens 20 Aufnahmen, die unter kontrollierten Bedingungen und in Gegenwart von 10 Mikromolar des breitspektrigen Glutamat-Transporter-Antagonisten TBOA mit gepaarten Reizungen erhalten wurden. Mitteln Sie anschließend eine identische Anzahl von Aufnahmen, die mit Einzelreizungen unter Kontrollbedingungen und in 10 Mikromolar TBOA aufgezeichnet wurden. Subtrahieren Sie die mittlere Spur, die mit Einzelreizungen erhalten wurde, von der mittleren Spur, die mit gepaarten Reizungen erhalten wurde. Dieser Schritt ermöglicht es, den STO-geometrischen und den anhaltenden Kaliumstrom, der durch den zweiten Reiz hervorgerufen wird, zu isolieren.Im nächsten Schritt wird die durchschnittliche Spur, die mit Einzelstimulationen bei einem Zeitintervall erhalten wurde, das dem PUL-Intervall entspricht, das zur Applikation gepaarter Pulse verwendet wurde, von der zuvor erhaltenen durchschnittlichen Antwort auf den zweiten Reiz subtrahiert, nachdem die zeitlich verschobene, durchschnittliche Antwort der Einzelstimulationen abgezogen wurde. Dieser Schritt isoliert einen potenzierten Anteil des Transportstroms, der durch den zweiten Reiz hervorgerufen wird. In den meisten Fällen entfernt dieser Schritt den anhaltenden Kaliumstrom vollständig.Wenn dies der Fall ist, ist die Isolierung des FSTC abgeschlossen, und Sie können mit der Dekonvolutionsanalyse fortfahren und den Zeitverlauf des Glutamat-Abbaus aus Astrozyten ermitteln. In einigen Fällen ist jedoch noch ein kleiner anhaltender Kaliumstrom vorhanden, und es ist eine weitere Analyse erforderlich. Messen Sie die Amplitude des verbleibenden anhaltenden Kaliumstroms nach der Durchführung.Die zuvor beschriebene Analyse skaliert die Amplitude der monoexponentiellen Funktion an die Amplitude des verbleibenden anhaltenden Kaliumstroms, indem die Amplitude des gemessenen anhaltenden Kaliumstroms in dieser Gleichung als a festgelegt wird. Die Anstiegszeitkonstante stellt jedoch den Mittelwert des Anstiegs dar, der in separaten Experimenten geschätzt wurde, in denen ein anhaltender Kaliumstrom isoliert wurde. Pharmakologisch wird eine hohe, sättigende Konzentration von TBOA verwendet, anschließend wird die resultierende monoexponentielle Funktion von der FSTC und dem anhaltenden Kaliumstrom subtrahiert.Um die Isolierung des FSTC abzuschließen. Um das durch Licht aktivierbare Transportereignis zu isolieren. Mitteln Sie mindestens 20 Aufzeichnungen, die unter Kontrollbedingungen und in 10 Mikromolar TBOA bei geöffnetem Lichtpfad erhalten wurden, sowie die gleiche Anzahl an Aufzeichnungen, die unter Kontrollbedingungen und in 10 Mikromolar TBOA bei geschlossenem Lichtpfad aufgezeichnet wurden; subtrahieren Sie anschließend die mittlere Spur, die bei blockiertem Lichtpfad erhalten wurde, von der mittleren Spur, die bei offenem Lichtpfad erhalten wurde.Dieser Schritt ermöglicht es, den Stimulationsartefakt zu entfernen und die FTCs zu isolieren. In diesem Schritt werden der Transportstrom, entweder FSTC oder FTC, unter Kontrollbedingungen sowie in 10 Mikromolar TBOA angepasst und mit einer multiexponentiellen Funktion gefittet. Erstellen Sie eine sofort ansteigende Funktion, die gemäß dieser Funktion monoexponentiell abklingt und die Abklingphase des Transportstroms, der in 10 Mikromolar TBOA aufgezeichnet wurde, am besten beschreibt. Ziehen Sie anschließend die monoexponentielle Funktion vom Fit des in 10 Mikromolar TBOA aufgezeichneten Transportstroms ab, um den Filter zu erhalten. Danach wenden Sie den Filter auf den Fit des Transportstroms unter Kontrollbedingungen an.Um eine quantitative Abschätzung des gesamten zeitlichen Verlaufs der Glutamatbeseitigung zu erhalten, berechnen Sie die OID der Wellenform, während Sie dieses Verfahren durchführen. Es ist wichtig sicherzustellen, dass die Transportereignisse unter experimentellen Bedingungen aufgezeichnet werden, bei denen der Filter im linearen Bereich arbeitet und nur lineare Verzerrungen des Transports verursacht. Die Stromwellenform hieraus kann überprüft werden, indem Manipulationen vorgenommen werden, die die Größe des Transportstroms verändern.Ändern Sie nicht seinen Stempelkurs. Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man astrozytäre Ableitungen nutzt, um Informationen über Glutamat, Diffusion und Aufnahme im Gehirn zu gewinnen.

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Forschung

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Neurowissenschaften

Wir beschreiben, wie man in der Nähe Membran und globalen intrazellulären Calcium-Dynamik in kultivierten Astrozyten mit Totalreflexion und Epifluoreszenzmikroskopie messen.

Messen in der Nähe Plasmamembran und Global intrazellulären Calcium-Dynamics in Astrozyten

Die Herstellung von akuten Hirnschnitten aus isolierten hippocampi, sowie die gleichzeitige elektrophysiologischen Ableitungen von Astrozyten und Neuronen...

Dual-Elektrophysiologische Recordings synaptisch-evozierte astrogliale und neuronale Antworten in Acute Hippocampusschnitte

Dieses Video zeigt die Bewertung der Glutamatfreisetzung und -clearance an einzelnen kortikostriatalen Synapsen in einem Schnitt des Mausgehirns. Die elektrische Stimulation erleichtert die Freisetzung von Glutamat an der Synapse. Das freigesetzte Glutamat verändert die Fluoreszenz des Sensorproteins, die mit der Zeit abfällt, was auf die Freisetzungs- und Clearance-Effizienz hinweist.

Analyse der Glutamatfreisetzung und -clearance an einer einzelnen Neuronensynapse in einem Maushirnschnitt

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Induktion von Plastizität Astrozytäre Rezeptoren durch Manipulation der neuronalen Feuerraten

Hier beschreiben wir die Setup - Software Navigation, und die Datenanalyse für eine räumlich und zeitlich genaue Methode der tonischen und phasische extrazellulären Glutamat Veränderungen in vivo Messung unter Verwendung von enzymgekoppelten Mikroelektrodenarrays (MEA).

Enzym-basierte Biosensoren Mit Tonic und Phasic Glutamate in der Alzheimer-Maus-Modellen zu messen

Zwei biotinylierungsbasierte Verfahren zur Bestimmung der Zelloberflächenexpression und der endozytischen Rate von Proteinen, die an der Plasmamembran exprimiert werden, sind in diesem Bericht dargestellt.

Bestimmung der Zelloberflächenexpression und der endozytischen Rate von Proteinen in primären Astrozytenkulturen unter Verwendung von Biotinylierung

Wir präsentieren ein Protokoll zur Bewertung des Gleichgewichts zwischen Glutamatfreisetzung und Clearance bei einzelnen kortikostriatalen glutamatergen Synapsen in akuten Scheiben von erwachsenen Mäusen. Dieses Protokoll verwendet den Fluoreszenzsensor iGluu zur Glutamaterkennung, eine sCMOS-Kamera zur Signalerfassung und ein Gerät zur fokalen Laserbeleuchtung.

Einzelne Synapsenindikatoren für Glutamatfreisetzung und Aufnahme in akuten Gehirnscheiben von normalen und Huntington-Mäusen

Hier beschreiben wir eine In-vitro-Live-Imaging-Methode zur Visualisierung des intrazellulären Transports von Organellen und des Handels mit Plasmamembranproteinen in murinen Astrozyten. Dieses Protokoll stellt auch eine Bildanalysemethodik zur Bestimmung von Frachttransportrouten und Kinetik dar.

Visualisierung und Analyse des intrazellulären Transports von Organellen und anderen Ladungen in Astrozyten

Dieses Protokoll bietet eine integrierte Methode, die virale Abgabe, Optrodenimplantation, photothrombotische Induktion, gleichzeitige Aufzeichnung der Astrozyten- und neuronalen Aktivität sowie optogenetische Stimulation von Astrozyten umfasst. Diese integrierte Methode zielt darauf ab, eine parallele Untersuchung der Astrozyten-Neuron-Beziehung über die akuten bis chronischen Stadien des ischämischen Schlaganfalls zu ermöglichen.

Eine integrierte Methode zur photothrombotischen Schlaganfallmodellierung und zur in-vivo-Optrodenerfassung neuronaler und astrozytischer Aktivität bei sich wirkenden Mäusen

Dieser Artikel beschreibt im Detail, ein Protokoll zur in utero elektroporieren die Hirnrinde und im Hippocampus bei E14.5 bei Mäusen. Wir zeigen auch, dass dies eine wertvolle Methode, um Dendriten und Dornen in diesen beiden Hirnregionen zu untersuchen ist.

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Erfahren Sie die Dekonvolutionsanalyse astrozytärer Transporterströme zur Bestimmung des Glutamat-Ausverkaufs im Maushippocampus. Diese Methode liefert hochaufgelöste Einblicke in die räumliche und zeitliche Dynamik synaptischer Übertragung.

Die Ableitung der zeitliche Verlauf der Glutamate Ausverkauf mit Dekonvolutionsanalyse von Astrozytäre Transporter Currents

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