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Tissue Engineering von Tumor-Stroma-Mikromilieu mit Anwendung auf die Invasion von Krebszellen
Tissue Engineering von Tumor-Stroma-Mikromilieu mit Anwendung auf die Invasion von Krebszellen
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JoVE Journal Bioengineering
Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

Tissue Engineering von Tumor-Stroma-Mikromilieu mit Anwendung auf die Invasion von Krebszellen

Full Text
10,197 Views
05:48 min
March 18, 2014

DOI: 10.3791/51321-v

Yi-Zhen Ng1,2, Andrew P. South1

1Division of Cancer Research, Ninewells Hospital and Medical School,University of Dundee, 2Institute of Medical Biology,A*Star, Singapore

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for generating a native matrix from fibroblasts to study tumor cell invasion. The methodology allows for the assessment of the impact of different stromal cell types on tumor cell biology.

Key Study Components

Area of Science

  • Tissue Engineering
  • Cell Biology
  • Oncology

Background

  • Fibroblast-derived matrices provide a natural environment for cell growth.
  • Understanding tumor cell invasion is crucial for cancer research.
  • 3D cultures can mimic in vivo conditions more accurately than 2D cultures.
  • Native matrices avoid the complications of synthetic substrates.

Purpose of Study

  • To generate a fibroblast-derived native matrix.
  • To evaluate the effects of this matrix on tumor cell behavior.
  • To improve understanding of tumor-stroma interactions.

Methods Used

  • Fibroblasts are cultured in sorbic acid enriched media.
  • The native matrix is detached from the plastic surface.
  • Tumor cells are seeded onto the matrix.
  • 3D cultures are analyzed histologically for tumor invasion.

Main Results

  • The native matrix supports tumor cell proliferation.
  • Histological analysis reveals insights into tumor invasion patterns.
  • Different stromal cell types influence tumor cell behavior.
  • This method provides a more physiologically relevant model for research.

Conclusions

  • The fibroblast-derived matrix is a valuable tool for cancer research.
  • It enhances the understanding of tumor microenvironments.
  • This approach could lead to better therapeutic strategies.

Frequently Asked Questions

What is the significance of using a native matrix?
Using a native matrix allows for a more accurate representation of the tumor microenvironment, which is crucial for studying tumor biology.
How are fibroblasts cultured for this study?
Fibroblasts are cultured in sorbic acid enriched media to promote native matrix formation.
What types of analyses are performed on the 3D cultures?
Histological analyses are conducted to assess tumor cell invasion within the native matrix.
Can this method be applied to other cell types?
Yes, the methodology can be adapted to study various cell types and their interactions.
What are the advantages of using 3D cultures?
3D cultures better mimic in vivo conditions, providing more relevant data for biological studies.
How does this research contribute to cancer therapy?
By understanding tumor-stroma interactions, this research could inform the development of targeted therapies.

Gewebezüchtungen Fibroblasten-nativen Matrix ist eine aufstrebende Werkzeug, um eine Stroma-Substrat, das epitheliale Zellproliferation und Differenzierung unterstützt generieren. Hier wird ein Protokoll gemäß dieser Methode die Auswirkung verschiedener stromalen Zelltypen auf Tumor Zellbiologie Beurteilung vorgelegt.

Das übergeordnete Ziel des folgenden Verfahrens ist es, eine native Matrix aus Fibroblasten zu generieren, um die Invasion von Tumorzellen zu beurteilen. Dies wird zunächst erreicht, indem Fibroblasten auf Kunststoff in einem mit Sorbinsäure angereicherten Medium gezüchtet werden, um die native Matrix zu erzeugen. Im zweiten Schritt wird die native Matrix von der plastischen Wachstumsoberfläche abgelöst und freigesetzt, und dann wird diese Matrix mit Tumorzellen besiedelt und nach einer festgelegten Zeit an die Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche gehoben.

Diese 3D-Kulturen werden für die histologische Analyse der Tumorzellinvasion geerntet. Letztendlich können die Auswirkungen der nativen Fibroblastenmatrix auf die Invasion von Tumorzellen durch immunhistologische Analysen bewertet werden. Der Vorteil dieser Technik zur Erzeugung typischer 3D-Kulturen besteht also darin, dass wir die von den Fibroblasten selbst produzierte native Matrix in Abwesenheit von synthetischen oder fremden Substraten, wie z. B. Kollagen vom Typ 1, beurteilen können. Beginnen Sie mit der Aussaat von 200.000 Fibroblasten pro Vertiefung in sechs Vertiefungsplatten in Faserstrahlmedien, ergänzt mit frisch zubereiteter IC-Säure.

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