Tracking-Mikrobielle Kontamination in Einzelhandelsumgebungen mit fluoreszierenden Pulver - Ein Feinkost Einzelhandel Beispiel Umwelt

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, den potenziellen Mechanismus der Kreuzkontamination durch den lebensmittelbedingten Krankheitserreger Listeria monocytogenes in einer Verkaufsstätte für Feinkost zu demonstrieren. Dies wird erreicht, indem zunächst eine modellierte Feinkostküche entworfen wird, um das Einzelhandelsumfeld nachzuahmen.

Im zweiten Schritt wird Aufschnitt mit einer fluoreszierenden Verbindung beimpft, anschließend werden Freiwillige gebeten, das beschichtete Fleisch zu schneiden, zu verpacken und im Kühlschrank zu lagern. Im letzten Schritt wird die mögliche Kreuzkontamination verfolgt, indem die fluoreszierende Verbindung unter Schwarzlicht beobachtet wird. Letztendlich kann mithilfe der Spektrometrie die Menge der fluoreszierenden Verbindung quantifiziert werden, um zu veranschaulichen, wie Kreuzkontamination in der Einzelhandelsmetzgerei auftritt.

Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber Methoden, die Mikroorganismen verwenden, liegt darin, dass die fluoreszierende Verbindung mit dieser Technik schnell mittels spektraler Photometrie quantifiziert werden kann. Obwohl diese Methode Einblicke in den Einzelhandel ermöglichen kann, lässt sie sich auch auf andere Systeme anwenden, wie beispielsweise kleine landwirtschaftliche Betriebe, Lebensmittelverarbeitungsanlagen und andere Lebensmittel-Service-Betriebe. Beginnen Sie damit, saubere Handschuhe und 70 % Ethanol auf die Arbeitsfläche zu legen, um sie während des Verfahrens zu verwenden.

Verwenden Sie dann ein sauberes Messer und ein sauberes Schneidebrett, um die Aufschnittware in drei etwa 100 Millimeter dicke Proben zu schneiden. Anschließend verwenden Sie einen leicht angefeuchteten, sauberen Schwamm, um eine Probe gleichmäßig mit frisch zubereitetem fluoreszierendem Pulver zu überziehen. Wickeln Sie danach alle Proben einzeln in Frischhaltefolie ein und beschriften Sie die mit fluoreszierendem Pulver beschichtete Probe mit „a“ sowie die beiden verbleibenden Proben mit „b“ und „c“, indem Sie Klebeband verwenden.

Danach die Proben bei vier Grad Celsius lagern und schwarze kompakte Leuchtstofflampen mit 13-Watt-Lampen um den Schneidebereich herum montieren. Eine fünfeinhalb mal fünfeinhalb Zentimeter große Aluminiumfolie als Schablone zum Abstreichen zuschneiden und 1315 Milliliter-Fläschchen mit jeweils sechs Millilitern 95 %igem Ethanol füllen. Anschließend drei Videokameras an strategisch günstigen Positionen montieren, um alle Bereiche der Modell-Feinkosttheke gleichzeitig beobachten zu können.

Um die Kontamination der Aufschnittware durch fluoreszierendes Pulver zu verfolgen, schalten Sie die Kameras ein, um die Teilnehmer während des Verfahrens aufzuzeichnen, und machen Sie ein Bild vorab des Modell-Aufschnitts unter Schwarzlicht. Bitten Sie dann jeden Teilnehmer, die folgenden Schritte durchzuführen. Zuerst entnehmen Sie die mit A gekennzeichnete Fleischprobe aus dem Kühlschrank.

Entpacken Sie als Nächstes das Fleisch, wobei Sie die Plastikfolie aufbewahren, und legen Sie die Probe auf das Trägerblech des Schneiders. Sichern Sie die Probe mit der Fleischklemme, schalten Sie den Schneider ein und stellen Sie den Einstellknopf des Schneiders auf zwei. Schneiden Sie anschließend fünf Scheiben Fleisch und geben Sie sie auf das Schreibpapier, schalten Sie dann das Gerät aus und lösen Sie die Fleischklemme.

Legen Sie die Scheiben des Fleisches in eine Plastiktüte mit der Bezeichnung A und verpacken Sie die Fleischprobe danach erneut ein, bevor Sie sie zurück in den Kühlschrank stellen, nachdem die Proben B und C wie eben demonstriert entnommen wurden, und zwar nach der Aufnahme des Abbilds der Modellküche. Um die Kontamination mit fluoreszierendem Pulver zu quantifizieren, legen Sie die sterile Aluminiumfolien-Schablone auf jeden in der Abbildung gekennzeichneten Bereich. Tupfen Sie anschließend jeden Bereich mit einem sterilen Calcium-Alginat-Cotton-Tupfer ab, der in 95 % Ethanol getränkt ist, und geben Sie einen Tupfer in jedes der Röhrchen mit 95 % Ethanol.

Vortexen Sie jedes Röhrchen gründlich und überführen Sie anschließend den Inhalt in einzelne Glas-Küvetten. Messen Sie die Absorption jeder Abstrichprobe bei 370 Nanometern und berechnen Sie mithilfe der Formel die Menge des von jedem Bereich abgestrichenen fluoreszierenden Puders. Abschließend sehen Sie sich das Video an, um die Anzahl der Berührungen der verschiedenen Oberflächen der Modell-DE zu quantifizieren.

In diesem repräsentativen Experiment wurden die Teilnehmer videoaufgezeichnet, um die durchschnittliche Häufigkeit des Handkontakts mit verschiedenen Oberflächen des Fleischwolfs während der Zubereitung der Aufschnittscheiben zu analysieren. Anschließend werteten verschiedene Beobachter das Video aus, und die Häufigkeit der Handkontakte wurde gemittelt. Die Daten zeigen, dass wie erwartet der Fleischgriff, der Fleischwickler, das Aufschnittfleisch und das Aufschnittpapier die höchsten Raten an Handkontakten aufwiesen, mit einem Durchschnitt von acht bis 14 Kontakten pro Teilnehmer.

Flächen wie der Kühlschrank, der Griff des Arbeitstisches, der Fleischgriff, die Schneidemesser und verschiedene Komponenten des Förderwagens wurden anschließend abgestrichen, und die Menge an fluoreszierendem Pulver auf den verschiedenen Bauteilen des Schneiders sowie in der Modellküche wurde quantifiziert. Wie gerade erwartungsgemäß gezeigt wurde, ergaben die Ergebnisse, dass die höchsten Kontaminationsgrade am Kühlschrank, am Griff, am Fleischgriff und an den Rückplatten vorlagen.

Während des Durchführens dieses Verfahrens ist es wichtig, daran zu denken, die Videokameras gleichzeitig einzuschalten, um sicherzustellen, dass die Aufnahmen synchronisiert sind. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der Lebensmittelsicherheit zu beantworten, beispielsweise wie Kreuzkontaminationen auftreten, und auf Basis unserer Ergebnisse können effektive Schulungsmaßnahmen entwickelt werden.