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Herstellung von komplexen Kultursubstrate verwenden Robotic Mikrokontaktdrucken (R-mCP) und Seque...
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JoVE Journal Bioengineering
Fabricating Complex Culture Substrates Using Robotic Microcontact Printing (R-µCP) and Sequential Nucleophilic Substitution

Herstellung von komplexen Kultursubstrate verwenden Robotic Mikrokontaktdrucken (R-mCP) und Sequential Nucleophile Substitution

Full Text
10,893 Views
08:23 min
October 31, 2014

DOI: 10.3791/52186-v

Gavin T. Knight*1, Tyler Klann*1, Jason D. McNulty1,2, Randolph S. Ashton1

1Department of Biomedical Engineering,University of Wisconsin, Madison, 2Department of Mechanical Engineering,University of Wisconsin, Madison

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Zellkultursubstrate, funktionalisiert mit mikroskaligen Mustern biologischer Liganden, haben einen immensen Nutzen im Bereich des Tissue Engineering. Hier demonstrieren wir die vielseitige und automatisierte Herstellung von Gewebekultursubstraten mit mehreren, mikrostrukturierten Poly(ethylenglykol)-Bürsten und präsentieren orthogonale Chemien, die eine räumlich präzise und ortsspezifische Immobilisierung von biologischen Liganden ermöglichen.

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments ist die Erzeugung von Gewebekultursubstraten mit mehreren Mikromuster-PEG-Bürsten, die orthogonale Chemien präsentieren, die eine räumlich präzise und ortsspezifische Immobilisierung biologischer Liganden ermöglichen. Dies wird durch die Abscheidung von Arrays aus Acan Thiol, einem TRP-Initiator, durch einen robotergestützten Mikrokontaktdruck auf goldbeschichteten Substraten erreicht. Als zweiter Schritt SI wird ein TRP auf den Mikromustersubstraten durchgeführt, wodurch PEG-Bürsten mit terminalen Bromgruppen erzeugt werden.

Als nächstes werden die terminalen Bromgruppen mit einer oder zwei chemisch reaktiven Gruppen funktionalisiert, um die IM-Mobilisierung von entsprechend präparierten biologischen Liganden zu ermöglichen. Dann wird der gesamte Prozess wiederholt, um mit einer zweiten chemischen Gruppe zu funktionalisieren. Die Ergebnisse zeigen Microarrays von zwei orthogonal funktionalisierten PEG-Bürsten, die sich mit einer Genauigkeit von 10 Mikrometern überlagern.

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