Experimentelle Ansätze zur Untersuchung Mitochondriale Lokalisation und Funktion eines Kernzellzyklus-Kinase, Cdk1

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25. Februar 2016

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Hier skizzieren wir, wie man die mitochondriale Lokalisation einer (Zellzyklus-)Kinase untersucht und wie man ihre submitochondriale Position sowie potenzielle mitochondriale Substrate/Ziele bestimmt. Die erzwungene Expression von Proteinen in die Mitochondrien stellt ein nützliches Werkzeug dar, um die funktionellen Konsequenzen der mitochondrialen Lokalisierung eines Proteins von Interesse zu untersuchen.

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Cdk1-Kinase

Chapters in this video

0:05

Titel

1:01

Natriumcarbonat-Extraktion intakter Mitochondrien

3:07

Trennung der inneren und äußeren Mitochondrienmembranen

4:22

Konstruktion von Mitochondrien-zielgerichteten GFP/RFP-markierten CyclinB1/Cdk1-Vektoren und Mitochondrienlokalisation

7:23

Bestimmung der Zellzyklusphasenlängen mittels EdU-Inkorporations-Assay

10:58

Ergebnisse: Mitochondriale Analyse von CyclinB1 und Cdk1

12:25

Schlussfolgerung

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