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DOI: 10.3791/53645-v
William L. Slone*1, Blake S. Moses*1, Rebecca Evans1, Debbie Piktel1, Karen H. Martin1,2, William Petros1, Michael Craig1, Laura F. Gibson1,3
1Alexander B. Osborn Hematopoietic Malignancy and Transplantation Program of the Mary Babb Randolph Cancer Center, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 2Department of Neurobiology and Anatomy, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 3Department of Microbiology, Immunology and Cell Biology, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Der vorliegende Bericht fasst ein Protokoll zusammen, das verwendet werden kann, um den Einfluss der Mikroumgebungsnische des Knochenmarks auf leukämische Zellen zu modellieren, wobei der Schwerpunkt auf der Anreicherung der chemoresistentesten Subpopulation liegt.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, resistente akute lymphatische Leukämie (ALL) in vitro besser zu modellieren. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen bei der Behandlung von refraktärer ALL zu beantworten, wie die Mikroumgebung des Knochenmarks die chemotherapeutische Resistenz von ALL-Zellen beeinflusst. Die Hauptvorteile dieser Technik bestehen darin, dass sie erheblich billiger und weniger zeitaufwändig ist als die Verwendung herkömmlicher Tiermodelle zur Untersuchung der Arzneimittelempfehlung bei refraktären ALL-Zellen.
Beginnen Sie mit der Aussaat von fünf bis 20 mal 10 bis sechs Leukämiezellen in 10 Millilitern tumorspezifischem Kulturmedium auf eine 100-Millimeter-Platte mit 80 bis 90 % konfluenten Knochenmarkstromazellen oder Osteoblasten. Kippen Sie jeden vierten Tag die Platte zur Seite und saugen Sie alle bis auf einen Milliliter des Mediums ab, wobei Sie darauf achten, die anhaftende Zellschicht nicht zu stören. Geben Sie dann vorsichtig neun Milliliter frisches leukämisches Zellkulturmedium tropfenweise in die Ecke der Platte an der Seite, um eine minimale Störung der adhärenten Zellen zu gewährleisten.
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