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Krebsforschung
0 Aufrufe • 3:44 Min. • April 30th, 2023
- Wenn leukämische Zellen mit mesenchymalen Stromazellen co-kultiviert werden, interagieren sie mit Stromazellen und bilden drei Subpopulationen. Frei schwebende suspendierte Zellen, phasenhelle Zellen, die an der Oberfläche der mesenchymalen Monoschicht haften, und phasenschwache Zellen unter der mesenchymalen Monoschicht. Um jede Subpopulation zu trennen, nehmen Sie eine Gewebekulturplatte mit einer mesenchymalen Stromazell-Monoschicht.
Leukämische Zellen, die in tumorspezifischen Nährmedien vorliegen, werden auf die Monoschicht gesät und die Platte für die gewünschte Dauer inkubiert. Sammeln Sie anschließend Tumorzellen in Suspension, indem Sie die frei schwebenden Zellen in ein separates Röhrchen pipettieren. Geben Sie nun das frische Medium auf die Platte und pipettieren Sie kräftig, um die phasenhellen Tumorzellen von der mesenchymalen Monoschichtoberfläche zu lösen.
Sammeln Sie diese Zellen, indem Sie sie in ein separates Röhrchen pipettieren. Geben Sie Trypsin in die Platte, um die anhaftenden mesenchymalen Zellen zu entfernen. Fügen Sie fötales Rinderserum oder FBS hinzu, um die Wirkung von Trypsin zu stoppen und die Zellaggregate aufzubrechen. Sammeln Sie nun die Phase-Di
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