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DOI: 10.3791/55412-v
Ke Zou1,2, Diana S. Ren2, Qi Ou-yang1,3, Hao Li2, Jiashun Zheng2
1The State Key Laboratory for Artificial Microstructures and Mesoscopic Physics, School of Physics,Peking University, 2Department of Biochemistry and Biophysics,University of California, San Francisco, 3Peking-Tsinghua Center for Life Sciences at Center for Quantitative Biology, Academy for Advanced Interdisciplinary Studies,Peking University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Dieser Artikel stellt ein Protokoll für die Herstellung von Mikrofluidik-Chips und der Aufbau von mikrofluidischen Experimenten optimiert, um die Lebensdauer und zellulären Phänotypen einzelner Hefezellen zu messen.
Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, ein spezielles mikrofluidisches Gerät herzustellen und damit die Lebensdauer und die zellulären Phänotypen einer einzelnen Hefezelle zu messen. Diese Methode kann dazu beitragen, einige der Schlüsselfragen auf dem Gebiet der Hefealterung zu beantworten, z. B. warum Mutterzellen altern und sterben und was sind die früheren molekularen Ereignisse, die den Verlust der zellulären Homöostase und schließlich die Zellalterung und den Zelltod vorantreiben? Der große Vorteil dieser Technik besteht darin, dass wir Mutterzellen, ihre Lebensdauer und die verschiedenen molekularen Marker gleichzeitig verfolgen können, so dass wir nach molekularen Ereignissen suchen können, die mit der Lebensdauer korrelieren.
Obwohl diese Methode Einblicke in die Hefealterung geben kann, kann sie auch auf andere Bereiche angewendet werden, z. B. auf die Überwachung sekundärer Reaktionen auf die Teilnahme, die eine Zellüberprüfung über viele Generationen hinweg erfordert. Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da die Herstellung von mikrofluidischen Geräten, die Zellbeladung und die Einrichtung des Mikroskops viel Übung erfordern, um erfolgreich durchzuführen. Eine vorherige Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da es schwierig ist, das mikrofluidische Gerät richtig mit Hefe zu beladen.
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