Name: Geschmack-Prüfung: Eine kurze und validierten Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Lernen Sie einen kurzen Geschmackstest für biomedizinische Forschung kennen, der menschliche Geschmacksantworten misst und durch Genotypanalyse validiert wird. Diese Methode liefert wertvolle Erkenntnisse zur sensorischen Verarbeitung und unterstützt die Diagnose geschmacksbezogener Erkrankungen.

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Auszeichnungen von der National Institutes of Health unterstützt diese Forschung (R01DC013588, NAC, R21DC013886, NAC und DRR und NIDCD Administrative Forschung Ergänzung zu fördern Entstehung der Kliniker-Wissenschaftler in Chemosensorische Forschung zu JED). Wir sammelten Genotyp Daten von Geräten, die teilweise mit NIH Fonds von OD018125 gekauft.

Der University of Pennsylvania institutionelle Review Board genehmigt dieses Protokolls. Wir ausgeschlossen Themen, wenn sie schwanger waren oder unter 18 Jahre alt waren.
(1) Mundhöhle Bewertung: Krankheit Bewertung und Papille aufspüren
<ol><li>Weisen Sie das Thema, den Mund zu öffnen.</li>
	<li>
Mit einer Lichtquelle wie ein Penlight oder Stirnlampe, beleuchten Sie die Mundhöhle und untersuchen Sie die sieben Unterwebsites des Gebietes (Zunge, Mund, bukkale Schleimhaut labial Schleimhaut, Zahnfleisch, harten Gaumen und Trigonum retromolare Stock) zu.
	<ol>
<li>Visualisieren der dorsalen Oberfläche der Zunge. Weisen Sie an, das Thema, die Zunge zu erheben, und untersuchen Sie der ventralen Zunge Oberfläche und Mundboden, und achten Sie auf die Prüfung nach hinten zu den Molaren zu verlängern.</li>
		<li>Mit einer Zunge Depressor, lateralize des Prüfungsteilnehmers Wange um die bukkale Schleimhaut, sowie die seitlichen Gingiva bilateral rund um den oberen und unteren Zähne zu visualisieren.</li>
		<li>Erweitern Sie die Prüfung anterior durch Anheben der Ober- und Unterlippe um die Oberflächen der Labiale Schleimhaut- und vorderen Gingiva zu visualisieren.</li>
		<li>Zu guter Letzt visualisieren des harten Gaumens und Trigonum retromolare.</li>
		<li>Hinweis: Läsionen, Abschürfungen, und Massen oder Anzeichen für eine Entzündung.</li>
		<li>Wieder Fragen Sie das Thema zu öffnen Sie den Mund und die Zunge zu verlängern.</li>
		<li>Verwenden Sie eine Lichtquelle auf um die dorsale Oberfläche der Zunge zu visualisieren.</li>
		<li>Das Vorhandensein oder Fehlen von FP, z.B., eine glatte Zunge Oberfläche zu identifizieren</li>
	</ol>
</li>
	<li>Notieren Sie die Ergebnisse der Mundhöhle Prüfung bevor mit Geschmack getestet. Wenn Ermittler dieser Geschmackstest im medizinischen Kontext durchführen, sollte unerwartete Entdeckungen weiterer Aufarbeitung veranlassen.</li>
</ol>(2) psychophysischen Geschmack getestet
Hinweis: Ressourcen und Beschreibungen für den psychophysischen Geschmack testen, die Folgen sind auch von der folgenden Webseite erhältlich: https://osf.io/hn87s/.
<ol><li>
Tastant Vorbereitung
	<ol>
<li>Bereiten Sie Lösungen wie unten beschrieben vor. Machen Sie jede Lösung mit einem volumetrischen Kolben um Präzision der Konzentrationen ± 0,0002 M. Dissolve Proben mit Reinstwasser sicherzustellen. Passen Sie die Auswahl der Verbindungen, die Forschungsziele. Die hier aufgeführten Verbindungen sind als Beispiel gedacht.<ol>
<li>Denatonium Benzoat (Bitter): bereiten Sie eine Stammlösung von 4,99 x 10-3 M Denatonium Benzoat durch 2,228 g Denatonium Benzoat in 1 L Wasser auflösen. Hinzu kommt eine Volumetrische 500 mL-Flasche 180 µL dieser Stammlösung. Fügen Sie Wasser hinzu, um das Volumen auf 500 mL, produziert eine Lösung mit einer Endkonzentration von 1,8 µM bringen.</li>
			<li>PTC (Bitter): 0,0135 g von PTC in einem 500 mL volumetrischen Kolben zu platzieren. Fügen Sie Wasser hinzu, um das Volumen auf 500 mL bringen. PTC ist schwer zu lösen, also Stir Bar in den Kolben und die Lösung auf 70 ° C auf einer heißen Platte. Verwenden Sie die rühren Leiste, um die Lösung zu mischen, bis alle gelösten (~ 15 min) aufgelöst hat. Dadurch entsteht eine Lösung mit einer Endkonzentration von 180 µM.</li>
			<li>Chinin (Bitter): 0,011 g Chinin HCl Dihydrat in einem 500 mL volumetrischen Kolben zu platzieren. Fügen Sie Wasser hinzu, um das Volumen auf 500 mL, produziert eine Lösung mit einer Endkonzentration von 56 µM bringen.</li>
			<li>Natriumchlorid (salzig): 7,5 g Natriumchlorid in einem 500 mL volumetrischen Kolben zu platzieren. Fügen Sie Wasser hinzu, um das Volumen von 500 mL, produziert eine Lösung mit einer Endkonzentration von 0,25 M bringen.</li>
			<li>Saccharose (süß): 60 g Saccharose in einem 500 mL volumetrischen Kolben zu platzieren. Fügen Sie Wasser hinzu, um das Volumen von 500 mL, produziert eine Lösung mit einer Endkonzentration von 0,35 M bringen.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Geschmackslösungen bei 4 ° c Lagern Einige häufig verwendete Geschmack Verbindungen sind lichtempfindlich und Ermittler sollten wickeln Sie sie in Folie oder anderen Materialien, ihre Aussetzung zum Licht zu reduzieren.</li>
		<li>Füllen Sie eine leckere Tasse um häufige Fehler in Vorbereitung der Lösung zu identifizieren ein, die alte Lösung und eine mit der neuen Lösung. Probieren Sie jede Lösung um sicherzustellen, dass sie identisch in Kraft sind.</li>
		<li>Einzubeziehen Sie Wasser als eine Steuerungslösung, vorgestellt in der ersten Position zu überprüfen, ob Themen verstehen das Testverfahren. Themen zu präsentieren, mit jedem tastant und das Steuerelement tastant kümmert sich zweimal, um zu vermeiden, das gleiche tastant nacheinander präsentiert. Zum Beispiel um fünf einzigartige Tastants zu testen, verfügen über zwölf Proben im Fragebogen (siehe 2.2): die fünf Geschmacks- und Wasser jeweils zweimal vorgestellt. Aliquot 5 mL Wasser in einzelnen Glasfläschchen funkeln. Beschriften Sie die Durchstechflasche Kappen mit einem dunklen blauen Aufkleber mit der Nummer 1.</li>
		<li>Wiederholen Sie diesen Vorgang für jede tastant. Etikett Durchstechflasche Kappen mit einem runden Aufkleber nach der Reihenfolge der Präsentation und einige Farbcode Beispiel unten genau geschildert; passen Sie die Durchstechflasche Etiketten mit den Etiketten auf den Geschmack-Fragebogen (siehe 2.2). Wasser (dunkelblau) Chinin (hellblau) NaCl (grün) PTC (gelb) Saccharose (Orange) Denatonium Benzoat (rot) NaCl (dunkelblau) Denatonium Benzoat (hellblau) Wasser (grün) Chinin (gelb) Saccharose (Orange) PTC (rot)</li>
		<li>Paket Proben, indem man sie in zwei Boxen, Proben 1 – 6 und 7 – 12 in Kisten mit der Aufschrift "Feld A" und "B-Box" bzw. (Abbildung 1). andere Verpackung Strategien sind möglich.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2.jpg"> Abbildung 1: Probieren Sie Kit. Themen verwenden das Kit zu Rate Geschmack Intensität und Qualität der verschiedenen farbkodierten Geschmacks-. Box A enthält Proben 1 – 6, Feld B 7 – 12. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<ol start="2"><li>
Geschmack-Fragebogen
	<ol>
<li>Bereiten Sie den Geschmack-Fragebogen mit einer Kategorienskala zur Bewertung von Geschmack Intensität und eine erzwungene Wahl zur Identifizierung der geschmackliche Qualität der einzelnen tastant (Abbildung 2).</li>
		<li>Runde Etiketten der entsprechenden Farbe und Zahl neben die entsprechende Probe im Geschmack Fragebogen zu platzieren (siehe 2.1.6).</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig2.jpg"> Abbildung 2: Probieren Sie Fragebogen Eintrag, bestehend aus einer Kategorienskala zur Bewertung der Intensität und gezwungen Wahl Antwort für tastant Qualität. Der Geschmack Fragebogen beinhaltet einen Eintrag für jeden der die farbcodierten Geschmacks-getestet. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<ol start="3"><li>
Geschmacks-Test-Verwaltung
	<ol>
<li>Bieten Sie Themen mit Feld A, B-Box, eine Flasche Wasser, leere Tasse, Stift und Papier und Stift Geschmack Fragebogen enthält Einträge für 12 Proben. Verwenden Sie die gleiche Marke von Mineralwasser während der gesamten Dauer einer bestimmten Studie. Als Alternative zu einem Papierfragebogen, port das Material in Online-Umfrage-Software und verwaltet per PC/Notebook oder Tablet. Eine Beispiel-Vorlage ist verfügbar auf https://osf.io/hn87s/.</li>
		<li>Weisen Sie Themen, dass sie gebeten werden, die Intensität und Qualität (z.B., salzig, sauer, Bitter, süß, oder ohne Geschmack) der jeweils tastant zu bewerten. Auch informieren Sie Themen, dass sie nicht alle Eigenschaften auftreten können.</li>
		<li>Das Testverfahren wie folgt erklären: Spülen Sie Ihren Mund mit Wasser und spucken sie heraus in den Cup zur Verfügung gestellt. Gießen Sie alle Probe 1 in den Mund und halten Sie ihn dort für 5 Sekunden, bevor Sie die Lösung in die Tasse spucken. Gurgeln Sie und schlucken Sie die Lösung nicht. Kreis eines der 13 vertikalen Linien entsprechen der Probe Intensität, auf einer Skala von 0 bis 12 aus "keine Intensität überhaupt" bis "sehr intensiv", und wählen Sie eine einzelne Qualität, den Geschmack zu beschreiben. Danach spülen Sie Ihren Mund mit Wasser zweimal, bevor Sie fortfahren, um das nächste Beispiel.</li>
		<li>Beobachten Sie das Thema Verkostung und Bewertung 1 (Wasser) zu probieren. Sollte die Bewertung abweichen vom "keine Intensität überhaupt" und "kein Geschmack," wiederholen die Fragebogen Anweisungen bevor Sie den Test fortfahren zulassen.</li>
		<li>Überprüfen Sie den fertige Fragebogen auf Vollständigkeit.</li>
		<li>Punkten Sie Intensität Bewertungen auf einer Skala von 0 bis 12 aus der vertikalen Linien, die die Themen kreisten. Durchschnittlich zwei Intensität-Bewertungen für die einzelnen tastant; Dieser Wert wird für die Analyse verwendet werden.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Genotyp
<ol><li>Sammeln Sie Speichel von jedem Probanden durch den Speichel DNA-Sammlung Kit.</li>
	<li>Genomischen DNA aus der Probe zu reinigen, indem Sie die folgenden Anweisungen des Herstellers.</li>
	<li>TAS2R38 Genotyp mit SNP Genotyping Assays (rs713598, rs1726866, rs10246939)40zu bestimmen.</li>
	<li>Bestimmen Sie TAS2R19 Genotyp mit SNP Genotyping Assays (rs10772420)36.</li>
</ol>(4) Genotyp-Phänotyp-Validierung
<ol><li>Überprüfen Sie die verfügbaren gepoolten Steuerungsdaten aus über 800 Themen genotypisiert TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) und TAS2R19 (rs10772420) auf der folgenden Webseite: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.</li>
	<li>Basierend auf einem Thema TAS2R38 Genotyp, vergleichen Sie seine oder ihre psychophysischen Geschmack Antwort für die bittere zusammengesetzte PTC mit den Normen für Personen des gleichen Genotyps. Antworten sollten übereinstimmen; jedoch in seltenen Fällen vorauszusagen TAS2R38 Genotyp nicht perfekt PTC sensorischen Ergebnisse35.</li>
	<li>Antworten erhebliche Divergenzen zeigen sollte das Thema Geschmack Antwort für Chinin mit den Normen für Personen des gleichen TAS2R19 Genotyps zu vergleichen. Antworten für Chinin Intensität und Genotyp sollte36entsprechen. Alle Ergebnisse der Geschmack nicht mit Genotyp entsprechen, ist es möglich, dass das Thema nicht (a) versteht der Vorgang (b) Bereitstellung von unechten Bewertungen und simuliert oder (c) Es wurde ein Daten-Sammlung-Fehler seitens der Ermittler.</li>
	<li>Identifizieren Sie Daten Punkt Ausreißer zu, und schließen sie vielleicht von Analyse (Abbildung 3). Korrespondenz der sensorischen Ergebnisse mit objektiven Genotypisierung bestätigt die Zuverlässigkeit des psychophysischen Testverfahrens.</li>
</ol>

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NAC und DRR sind Co-Erfinder auf ein Patent im Berichtsjahr (Therapie und Diagnostik für Respiratorische Infektion 61/697.652, WO2013112865).

Die Bedeutung dieser Methode ist, dass es einen multidisziplinären Ansatz mit Features von Medizin (mündliche Prüfung), experimentelle Psychologie (Geschmackstest) und Genetik (ein Überprüfungsschritt) verwendet. Geschmack-Informationen wird voraussichtlich als diagnostische und prognostische Tool zu entwickeln, weil Geschmack ein Fenster in die Funktion der Proteine an anderer Stelle im Körper stellt. Experimentelle Psychologie gesehen kann die Zugabe von einer einfachen Prüfung Themen benennen, die für das Studium der ...

Maßnahmen der menschlichen Geschmackswahrnehmung können Bestandteil der medizinischen Versorgung und ein Ziel der biomedizinischen Forschung, doch Geschmack erhielt wenig Aufmerksamkeit im Vergleich zu Gehör und Vision (Tabelle 1). Aus medizinischer Sicht wenn Ärzte Patienten bewerten ist klagte über Geschmack Verlust, in den meisten Fällen der tatsächliche Verlust der Geruch1, was zur Entlassung des Geschmacks-Verlust als eine ungewöhnliche und oft ungültig präsentiert Beschwerde geführt hat. Geschmack Verzerrungen (dysgeusie) sind häufiger und oft ergeben sich aus den Nebenwirkungen von Medikamenten oder peripheren Nerven Verletzung2,3, aber weder Form hat eine wirksame Behandlung (mit Ausnahme von Absetzen der Medikamente). Ärzte haben auch Geschmack Verlust ignoriert, weil es bisher wenig diagnostische oder prognostische Wert auf eigene gehabt hat. Jedoch obwohl die Messung des Geschmacks ein Rückstau gewesen ist, kann es jetzt Schulmedizin mit der Wiederbelebung des historischen Wertschätzung eintreten, dass Geschmack möglicherweise eine diagnostische oder prognostische Werkzeug4,5. Zum Beispiel kann Bitterkeit Wahrnehmung Immunfunktion6 oder die Bereitschaft eines Patienten zur Medikation7Vorhersagen. Dennoch haben Biomediziner Geschmack weitgehend vernachlässigt. Diese Unaufmerksamkeit kann teilweise der Tatsache Rechnung zu tragen, dass baldige Fortschritte im Verständnis dieser sensorischen Systems hat seine Wurzeln in experimenteller Psychologie8, ein Feld mit denen diese in der Medizin relativ unbekannten möglicherweise. Darüber hinaus hat erneuertes Interesse an Geschmack hineingeführt in standardisierten Geschmack Methoden9 , das auf früheren Methoden10, bauen die zwar umfassende sind langwierig und ungeeignet für klinischen Einstellungen. Zu guter Letzt kann Vertrauen in Geschmack Maßnahmen schwach sein, weil Themen über ihre eigenen Erfahrungen berichten und Validierung ihrer Beobachtungen bisher gefehlt hat. Unsere Hoffnung ist, dass eine einfache Maßnahme, die Ermittler oder Kliniker leicht verwalten können in der Popularität mit beiden Bestandteile erhalten. Hier beschreiben wir eine einfachen Geschmack-Prüfung-Protokoll, das drei Teile hat: eine Bewertung der Mundhöhle, der Geschmackstest und ein Überprüfungsschritt mit angeborenen Genotyp. Erstens, wir bieten biologischen Kontext für diese Verfahren, die einfache Methoden in der Medizin, sensorische Maßnahmen aus der experimentellen Psychologie und Validierung von Antworten mithilfe von Genotyp und Genetik zu verschmelzen.
Geschmackswahrnehmung beginnt im Mund, so dass eine effektive Geschmack Prüfung eine kurze klinische Bewertung für offensichtliche Munderkrankungen, Rötungen, Schwellungen und andere Verfärbung muss. Die Mundhöhle enthält sieben Unterwebsites: Zunge, Zahnfleisch, Boden von Mund, bukkale Schleimhaut labial Schleimhaut, harten Gaumen und das Trigonum retromolare. Frühere Studien der menschlichen Geschmack auf gesunde Teilnehmer oder solche mit genau definierten Erkrankungen konzentriert, aber Geschmack getestet Routine in medizinischen Untersuchungen wird, ist es wichtig, den Zustand der Mundhöhle als Teil des Verfahrens aufzunehmen.
Die Zunge selbst ist eine muskuläre Struktur umhüllt von Schleimhaut; Punktierung der dorsalen Oberfläche sind Papillen, die kleine erhabenen Strukturen, die geben der Zunge seine einzigartige Textur und Geschmack Rezeptor Zellen enthalten. Wir klassifizieren Papillen durch ihre Form: fungiform, fadenförmigen laubbaume und Ringwalls. Fungiform Papillen (FP) sind befindet sich Anterolaterally auf der Zunge und sind rund, mit einer Pilzform11. Ermittler haben mehrere nützliche Methoden zur Quantifizierung von FP veröffentlicht und wir verweisen Leser auf diese Quellen für Messung Protokolle12,13,14,15,16. Foliate Papillen, geformt wie die Seiten eines Buches (Folia), befinden sich ausschließlich auf den seitlichen hinteren Zunge Oberfläche11. Ringwalls Papillen, gefunden in den Sulcus Terminalis der Zunge Basis, sind große kuppelförmige Strukturen umgeben von Schleimhaut Wände (lateinisch Circum, "Surround" + "vallum", "Wand")11. Die meisten zahlreiche Papillen, die fadenförmigen, sind lang und dünn und enthalten keine geschmacksrezeptoren.
Menschen unterscheiden sich in der Anatomie der Zunge. Während die Quellen dieser anatomischen Variante unbekannt sind, wird es teilweise durch angeborene genetische Variation, mit Ermittlern Berichterstattung 31 % Konkordanz der Zunge Anatomie unter zweieiigen Zwillingen und 60 % Konkordanz bei eineiigen Zwillingen17bestimmt. Papillären Dichte unterscheidet sich auch unter Menschen, und wenn auch selten, mindestens eine genetische Krankheit (familial Dysautonomia) ergibt ein angeborenes Fehlen der Geschmack Papillen18,19,20. Also, bevor Sie durchführen, Psychophysische Tests, ist es hilfreich, bestätigen das Vorhandensein von FP als Teil der kurzen Beurteilung und beachten die relative Größe und Farbe der Zunge und der orale Erkrankung.
Der Geschmack Papillen enthalten die sensorischen Zellen, wenn Sie initiieren Geschmackserlebnis angeregt. Menschen sind in der Lage mindestens fünf Klassen des Geschmacks zu spüren: salzig, sauer, Bitter, süß und Umami. Während salzig, signal süß und Umami-Geschmack signalisieren das Vorhandensein der wertvolle Nahrungsquellen, enthält Natrium-Chlorid, Glucose und Aminosäuren, bzw., Bitterkeit und Säure die Anwesenheit von möglichen Giftstoffe und Säuren von der bakteriellen Zersetzung des Essen, bzw., und aversiven Verhaltens21zu induzieren. Salzig und sauer Geschmack werden durch die Aktivierung von Ionenkanälen gefunden in einigen Arten von Geschmackszellen ausgestrahlt, obwohl das Verständnis von Salz Transduktion weiterentwickelt wird und sie, Typ verlangen kann ich Zellen sowie22,23. Bitter, süß und Umami ergeben sich aus der Aktivierung von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren auf Typ II Geschmackszellen, jeweils abgestimmt auf einen besonderen Geschmack. Heterodimere aus Untereinheiten von drei bestimmte Rezeptoren transduzieren süß und Umami, während Bitterstoffe eine Gruppe von 25 verschiedenen bitter Rezeptoren24aktivieren. Diese bittere Rezeptoren auf mehrere Bitterstoffe eingehen können, und eine einzelne bittere Substanz stimuliert oft mehr als einem Rezeptor25. Trotz der jüngsten Erweiterung des Wissens über die molekularen Grundlagen des Geschmacks können neue Wege26 und neue Entdeckungen jenseits der traditionellen fünf Geschmacksqualitäten (z.B. Kalzium27 oder Fettsäure28 Wahrnehmung) vor uns liegen.
Es gibt mindestens zwei überraschende Aspekte der Geschmack Familien von Rezeptoren: Gene, die kodieren für diese Rezeptoren können unterscheiden sich deutlich in der DNA-Sequenz und funktionieren daher bei Menschen und vielen Geweben des Körpers dieser Gene21,29 Ausdruck , 30 , 31. diese extraoral Websites beinhalten das Gehirn, Schilddrüse, oberen und unteren Atemwege und Magen-Darm-Trakt, unter vielen anderen21,29,30,31. Während die geschmacksrezeptoren an diesen Standorten nicht Geschmackswahrnehmung im herkömmlichen Sinne beteiligt sind, spüren sie wahrscheinlich die chemische Umgebung29,32. Zum Beispiel das Flimmerepithel der oberen Atemwege drückt den bitteren Rezeptor T2R38 (bittere Geschmack Rezeptor 38), die reagiert auf chemische Verbindungen, die von Bakterien produziert und beeinflusst die angeborene Immunantwort32, wie zunehmende Mucociliary Clearance und Ebenen von antimikrobiellen Peptiden und Stickoxid. Dieser Befund ist medizinische Implikationen für chronische Rhinosinusitis, eine Erkrankung des chronischen bakteriellen Infektionen und Entzündungen der oberen Atemwege und Nasennebenhöhlen.
Von besonderer Bedeutung für den Geschmack Prüfung, die wir hier beschreiben ist, dass der T2R38-bitteren Geschmack-Rezeptor kodiert durch das gen TAS2R38 , Exponate, genetische Variabilität und daher Variable Geschmack Empfindlichkeit. Wahrnehmbare Unterschiede für die bittere zusammengesetzte Phenylthiocarbamid (PTC) wurden erstmals durch den Chemiker Arthur Fox33beschrieben; später wurde diese Verbindung als Agonist T2R38 Rezeptor34identifiziert. Individuelle Unterschiede ergeben sich aus der DNA-Sequenz des Gens TAS2R38 , die drei Einzel-Nukleotid-Polymorphismen, jedes nachgeben Aminosäure Substitutionen (A49P, A262V und I296V; A: Alanin, P: Proline, V: Valin, Isoleucin I:). Zwei gemeinsame Haplotypen führen, PAV und AVI, PAV/PAV Personen, die empfindlich auf PTC ("Prüfer"), AVI/AVI Personen, die relativ unempfindlich ("nicht-Tasters") und heterozygote AVI/PAV Personen, variabler in ihrer Empfindlichkeit 35. gibt es weitere Beispiele für genetische Variation Auswirkungen auf bitteren Wahrnehmung, z.B., Geschmack-Rezeptor T2R19, durch das TAS2R19 -Gen kodiert Exponate ebenso genetische Variabilität und unterschiedlichen Geschmack Sensibilität für die bittere Substanz Chinin-36. Ebenso betrifft Variation in TAS2R31 die wahrgenommene Bitterkeit eines High-Potenz Süßstoffe37,38,39.
Hier beschreiben wir eine schnelle Methode zur Charakterisierung des Patienten Sinn für Geschmack, das auf High Yield-Protokolle in der klinischen Medizin, experimentelle Psychologie und Genetik.

<table><tbody><tr><td>Einweg-Diagnose-Taschenlampe</td><td>Primacare</td><td>DL-9223</td><td></td></tr><tr><td>UltraLite Pro Stirnlampe</td><td>Integra LifeSciences</td><td>AX2100BIF</td><td></td></tr><tr><td>Millipore Q-Gard 2 Wasseraufbereitungssystem</td><td>EMB Millipore</td><td>QGARD00D2</td><td></td></tr><tr><td>Denatoniumbenzoat&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>Phenylthiocarbamid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>Chininhydrochlorid-Dihydrat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Q1125</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S1679</td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>Glasszintillationsfläschchen</td><td>Thomas Scientific</td><td>1230L59</td><td>Wie Wheaton Katalog-Nr. 986580</td></tr><tr><td>Oragene Discover OGR-500 DNA-Entnahmekit</td><td>DNA Genotek</td><td>OGR-500</td><td></td></tr><tr><td>prepIT L2P Protokoll Reagenzien</td><td>DNA</td><td>Genotek PT-L2P-5</td><td></td></tr><tr><td>rs713598 TaqMan SNP-Genotypisierungsassay</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___8876467_10</td><td></td></tr><tr><td>rs1726866 TaqMan SNP-Genotypisierungsassay</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506827_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10246939 TaqMan SNP-Genotypisierungsassay</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506826_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10772420 TaqMan SNP-Genotypisierungsassay</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___1317426_10</td><td></td></tr></tbody></table>

geschmack-prüfung: eine kurze und validierten test

Taste Exam: A Brief and Validated Test

Die aufstrebenden Bedeutung des Geschmacks in der Medizin und biomedizinische Forschung und neue Erkenntnisse über seine genetischen Grundlagen hat uns Ergänzung klassische Geschmack Testverfahren auf zweierlei Weise motiviert. Zuerst erklären wir wie eine kurze Einschätzung des Mundes, einschließlich der Zunge, um sicherzustellen, dass Geschmack Papillen vorhanden sind und der jeweiligen Erkrankung festzustellen. Zweitens greifen wir auf Genetik, Geschmack Testdaten durch Vergleich Berichte von wahrgenommenen Bitterkeit Intensität und angeborene Rezeptor Genotypen zu validieren. Discordance zwischen objektiven Maßnahmen der Genotyp und subjektive Erfahrungsberichte Geschmacks erkennen Sammlung Datenfehler, abgelenkt Themen oder diejenigen, die nicht verstanden haben oder Anweisungen befolgt. Unsere Erwartung ist, dass schnelle und valide Geschmackstests Forscher und Kliniker Geschmack bewerten regelmäßig überzeugen können Geschmack getestet so weit verbreitet wie Tests zur Verhandlung und Vision. Schließlich, weil vielen Geweben des Körpers geschmacksrezeptoren Ausdrücken, Geschmack Antworten können einen Proxy für Gewebe Empfindlichkeit an anderer Stelle im Körper und dienen dabei als schnelle, Point-of-Care Test Guide Diagnose und ein Recherche-Tool, Geschmack-Rezeptor zu bewerten Funktion des Proteins.

Ergibt sich aus den Geschmackstest haben gebündelt wurden, für alle Fächer ausgewertet (n = 840) und nach der Trennung vom Genotyp präsentiert werden. Den vollständigen Datensatz ist abrufbar unter https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ und für jede tastant bewertet und für TAS2R38 und TAS2R19 Genotypen überprüft werden können. Ergebnisse bestätigen die Existenz von Wahrnehmungs Geschmack unterschieden für PTC unter Themen gruppiert nach TAS2R38 -Rezeptor ...

Dieses Protokoll menschlichen Geschmack Antworten und umfasst eine kurze anatomische Einschätzung und eine kurze Geschmackstest eine Validierungsmethode über das Thema berichteten Gefühl und Geschmack-Rezeptor-Genotyp.

Geschmack-Prüfung: Eine kurze und validierten Test

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im medizinischen und sensorischen Bereich über den Geschmackssinn jeder Person zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist ihre Kürze und Eignung für die biomedizinische Forschung. Die Auswirkungen dieser Technik erstrecken sich auf die Diagnose und Behandlung der chronischen Rhinosinusitis, da Geschmacksrezeptoren Teil des angeborenen Immunsystems sind.Ich werde das Verfahren an unserem Labormitglied David demonstrieren und Lauren wird die Geschmackslösungen herstellen. Beginnen Sie damit, die Versuchsperson anzuweisen, den Mund zu öffnen. Beleuchten Sie die Mundhöhle mit einer Lampe und untersuchen Sie die sieben Unterstellen des Bereichs.Hier ist die dorsale Zunge gut sichtbar. Mit einem Zungenspatel wird die Zunge niedergedrückt, der hintere Rachen wird sichtbar. Als nächstes ermöglicht die Lateralisierung der Zunge die Freilegung des linken retromolaren Trigons und der linken bukkalen Schleimhaut.Hier sind die vordere Gingiva und die Labialschleimhaut sichtbar. Wenn die Zunge des Probanden angehoben wird, wird die ventrale Zungenoberfläche sichtbar. Und dies ermöglicht die Untersuchung des Mundbodens des Probanden.Anschließend wird die Zunge wieder lateralisiert, um das rechte retromolare Trigon und die rechte bukkale Schleimhaut zu untersuchen. Und schließlich werden der harte und der weiche Gaumen visualisiert. Notieren Sie Läsionen, Schürfwunden und Massen oder Anzeichen von Entzündungen.Verwenden Sie eine Lichtquelle, um die dorsale Oberfläche der Zunge sichtbar zu machen und das Vorhandensein oder Fehlen von pilzförmigen Papillen oder glatter Oberfläche der Zunge zu identifizieren. Schreiben Sie abschließend die Ergebnisse der Untersuchung der Mundhöhle auf, bevor Sie mit der Geschmacksuntersuchung fortfahren. Beginnen Sie mit der Zubereitung der Geschmackslösungen mit jeweils einem Messkolben, um die Genauigkeit der Konzentrationen zu gewährleisten.Lösen Sie die Proben mit Reinstwasser. Wickeln Sie lichtempfindliche Lösungen mit Folie ein, um die Lichteinwirkung zu reduzieren. Anschließend lagern Sie die Geschmackslösungen bei vier Grad Celsius.Um häufige Fehler bei der Lösungszubereitung zu identifizieren, füllen Sie einen Verkostungsbecher mit der alten und einen mit der neuen Lösung. Probieren Sie jede Lösung, um sicherzustellen, dass sie in der Stärke identisch sind. Beschriften Sie anschließend die Kappen der Fläschchen mit einem kreisförmigen Aufkleber in der Reihenfolge der Präsentation und einem Farbcode.Um die Etiketten der Durchstechflaschen mit den Etiketten auf dem Geschmacksfragebogen abzugleichen. Verpacken Sie Proben, indem Sie sie in die jeweiligen Transportboxen legen. Bereiten Sie als Nächstes den Geschmacksfragebogen vor, indem Sie eine Kategorieskala zur Bewertung der Geschmacksintensität und eine erzwungene Auswahl zur Identifizierung der Geschmacksqualität jedes Geschmacks verwenden.Platzieren Sie abschließend kreisförmige Etiketten in der entsprechenden Farbe und Nummer neben der entsprechenden Probe im Geschmacksfragebogen. Geben Sie dem Probanden die Probenbox, eine Flasche Wasser, einen leeren Becher, einen Stift und einen Geschmacksfragebogen mit Einträgen für 12 Proben. Erklären Sie das Testverfahren und informieren Sie den Probanden, dass er gebeten wird, sowohl die Intensität als auch die Qualität jedes Geschmacks zu bewerten.Lassen Sie sie wissen, dass sie vielleicht nicht alle Qualitäten erfahren. Beginnen Sie den Test, indem Sie den Probanden bitten, den Mund zweimal mit Wasser auszuspülen und in den bereitgestellten Becher auszuspucken. Lassen Sie sie die gesamte Probe eins in den Mund gießen und halten Sie sie dort fünf Sekunden lang, bevor Sie die Lösung in den Becher spucken.Sagen Sie ihnen, dass sie nicht gurgeln oder die Lösung schlucken sollen. Weisen Sie dann den Probanden an, eine der 13 vertikalen Linien entsprechend der Intensität der Probe einzukreisen. Auf einer Skala von 0 bis 12.Von gar keiner Intensität bis hin zu extrem intensiv. Und wählen Sie eine einzige Qualität, um den Geschmack zu beschreiben. Bitten Sie als Nächstes den Probanden, seinen Mund zweimal mit Wasser auszuspülen, bevor Sie mit der nächsten Probe fortfahren.Beobachten Sie das Thema Verkostung und bewerten Sie eine Probe von Wasser. Sollte die Bewertung von überhaupt keiner Intensität und keinem Geschmack abweichen, wiederholen Sie die Anweisungen des Fragebogens, bevor Sie den Test fortsetzen lassen. Nachdem alle Proben verkostet wurden, überprüfen Sie den fertigen Fragebogen auf Vollständigkeit.Bewerten Sie schließlich die Intensitätsbewertungen auf einer Skala von 0 bis 12 anhand der vertikalen Linien, die der Proband eingekreist hat. Und mitteln Sie die beiden Intensitätsbewertungen für jeden Geschmack für eine spätere Analyse. Die Ergebnisse des Geschmackstests bestätigen das Vorhandensein von Wahrnehmungsgeschmacksunterschieden für den Bitterstoff Phenylthiocarbamid oder PTC bei Probanden, die nach dem TAS2R38 Rezeptor-Genotyp gruppiert sind.Die Bewertungen der PTC-Intensität unterscheiden sich bei drei Genotypen erheblich. Die Motivation hinter dieser Studie war es, zu versuchen, eine schnelle Point-of-Service-Untersuchung zu bewerten oder zu entwickeln, die wir in der Klinik durchführen könnten, um die Funktion dieses Rezeptors zu beurteilen, von dem wir glauben, dass er eine Rolle bei der Entwicklung der chronischen Sinusitis spielt. Die Idee dahinter ist, dass wir diesen Geschmackstest nutzen könnten, um vorherzusagen, welche unserer Patienten ein hohes Risiko für die Entwicklung einer Sinusitis haben und, was noch wichtiger ist, welche Patienten gute chirurgische Kandidaten für unsere Nasennebenhöhlenoperation sind oder welche bei unserer Nasennebenhöhlenoperation schlecht abschneiden werden.Deshalb versuchen wir, diesen Geschmackstest zu nutzen, um die Sinus-Nasen-Erkrankung des Patienten zu prognostizieren. Nachdem wir alle Geschmackstests durchlaufen hatten, bestätigten wir dies durch Genotypisierung der Patienten. Und wie Sie in Abbildung drei sehen können, folgt der Genotyp des Patienten größtenteils dem Muster seines Phänotyps.Das heißt, je bitterer sie schmeckten, desto dominanter waren sie für diesen Rezeptor. Es gibt jedoch einige Ausreißer. Dies zeigt, dass es funktionelle Homozygoten gibt, PAV/PAVs, die sagten, dass sie PTC nicht schmeckten, und auf der anderen Seite gab es einige nicht-funktionelle AVI/AVI-Individuen, die PTC mit Bitterkeit schmeckten.Das bedeutet also, dass wir bei jedem Geschmackstest, den wir entwickeln, wenn es Patienten gibt, die unsere Erwartungen nicht erfüllen, den Geschmackstest wahrscheinlich bestätigen wollen, indem wir sie auf T2R38 genotypisieren. Sobald Sie die Prüfung und den Geschmackstest gemeistert haben, können Sie sie in weniger als 30 Minuten durchführen. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie verstehen, wie man eine mündliche Prüfung durchführt, Anzeichen von Krankheiten notiert und einen kurzen Geschmackstest durchführt.

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Die Kenntnis der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen Geschmacks Transduktion hat kürzlich bedeutende Fortschritte genossen, vor allem aufgrund der Verwendung von Tiermodellen. Doch die große Vielfalt in Geschmack Sensitivität und Spezifität bei Säugetieren Optionsscheinen Studien in menschlichem Gewebe. Wir beschreiben eine Biopsie-Technik auf lebende Geschmack Zellen aus der Papillen auf die menschliche Zunge zu sammeln.

Technik zu pilzförmigen (Taste) Papillen aus menschlichen Zunge sammeln

Dieses Video beschreibt den Geschmackspräferenz-Assay, eine Verhaltensmethode, die verwendet wird, um die Anziehungskraft oder Vermeidung von farbigen Lösungen, die anders schmecken, zu messen, indem die Bauchfärbung der Fliege nach der Einnahme der bevorzugten Substanz bewertet wird. Das vorgestellte Protokoll demonstriert das Verfahren, mit dem die Präferenz von Fliegen für Lösungen mit unterschiedlichen Saccharosekonzentrationen gemessen wird.

Geschmackspräferenz-Assay: Eine Methode zur Messung des Fressverhaltens bei Drosophila

Oral Chemorezeption von Fettsäuren und die Verbindung mit Diät und fetthaltige Lebensmittel Präferenzen können die Identifizierung von Mechanismen, mit der Entwicklung von Übergewicht und warum Veränderungen in der Ernährung kann es schwierig für viele Menschen beteiligt sein können.

Mess Oral-Fettsäure-Schwellenwerte, Fett Wahrnehmung, Fatty Essen gefallen, und Papillen Dichte in Humans

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um pilzförmige Papillen Dichte von digitalen Fotos zu messen. Diese Methode baut Priorisierung und objektives Merkmal Metriken in den ursprünglichen Beschreibungs Arbeit an pilzförmigen Papillen von Miller &amp; Reedy (1990).

Denver Papillen Protokoll für objektive Analyse der pilzförmige Papillen

Süßer Geschmack hat eine starke hedonische Anziehungskraft bei Menschen jeden Alters, besonders bei Kindern. Hier wird eine zuverlässige und valide Methode beschrieben, die verwendet werden kann, um den am meisten bevorzugten Süßegrad zu bestimmen, was sie zu einem wertvollen psychophysischen Werkzeug für Wissenschaftler macht.

Psycho-physischen Tracking-Methode zur Geschmackspräferenzen bei Kindern messen und Erwachsene

Geschmack ist ein wichtiger sensorischer Prozess, der die Anziehungskraft auf nützliche Substanzen und die Vermeidung von giftigen Substanzen erleichtert.  Dieses Protokoll beschreibt einen einfachen Ingestion-Assay zur Bestimmung der gustatorischen Präferenz von Drosophila für eine gegebene chemische Verbindung.

Geschmackspräferenz Assay für Erwachsene<em&gt; Drosophila</em

Wir präsentieren drei neue Methoden, um die gustende Kodierung zu untersuchen . Mit einem einfachen Tier, der Motte Manduca sexta ( Manduca ) , beschreiben wir ein Dissektionsprotokoll, die Verwendung von extrazellulären Tetroden zur Aufzeichnung der Aktivität von mehreren Gustatorrezeptor-Neuronen und ein System zur Bereitstellung und Überwachung von präzise zeitgesteuerten Impulsen.

Neue Methoden zum Studieren der Gustatory Coding

Wir präsentieren ein Protokoll für einen Fütterungstest mit zwei Wahlmöglichkeiten für Fliegen. Dieser Fütterungstest ist schnell und einfach zu betreiben und eignet sich nicht nur für kleine Laborforschung, sondern auch für Verhaltensbildschirme mit hohem Durchsatz bei Fliegen.

Ein schneller Food-Preference-Test in Drosophila

Diese Arbeit beschreibt Methoden zur Gewebevorbereitung, Färbung und Analyse von ganzen Fungiform-, Zirkumvallat- und Gaumengeschmacksknospen, die konsistent ganze und intakte Geschmacksknospen (einschließlich der Nervenfasern, die sie innervieren) ergeben und die Beziehungen zwischen Strukturen innerhalb der Geschmacksknospen und der umgebenden Papille aufrechterhalten.

Färbung, Visualisierung und Analyse von Fungiform-, Circumvallate- und Gaumengeschmacksknospen

Psychophysische Werkzeuge messen die Funktionalität des Geschmackssystems sowohl für Forschungs- als auch für Gesundheitsbewertungszwecke. Diese Arbeit beschreibt eine Methode zur Messung von Geschmacksnachweisschwellen, die die niedrigste Konzentration von Saccharose, Natriumchlorid oder Mononatriumglutamat bestimmen können, die von Personen ab 6 Jahren geschmeckt werden kann.

Psychophysische Tracking-Methode zur Beurteilung von Geschmackserkennungsschwellen bei Kindern, Jugendlichen und Erwachsenen: Der Taste Detection Threshold (TDT) Test

Diese Arbeit veranschaulicht ein Standardverfahren und eine Schwellenwertbestimmung durch den R-Index zur Beurteilung der räumlichen lingualen taktilen Empfindlichkeit unter Verwendung eines Gitterorientierungstests.

Beurteilung der räumlichen lingualen taktilen Empfindlichkeit mit einem Gitterorientierungstest

Lernen Sie einen kurzen Geschmackstest für biomedizinische Forschung kennen, der menschliche Geschmacksantworten misst und durch Genotypanalyse validiert wird. Diese Methode liefert wertvolle Erkenntnisse zur sensorischen Verarbeitung und unterstützt die Diagnose geschmacksbezogener Erkrankungen.

Geschmack-Prüfung: Eine kurze und validierten Test

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