Verwendung von zwei dimensionale Semi-denaturierenden Waschmittel Agarose Gelelektrophorese Größe Heterogenität von Amyloid oder Amyloid-wie Fasern zu bestätigen

Das übergeordnete Ziel dieser zweidimensionalen, halbdenaturierenden Agarose-Gelelektrophorese ist es, die Größenheterogenität von Amyloid oder Amyloid-ähnlichen Fasern zu bestätigen, die während der traditionellen SDD-AGE beobachtet wurde. Diese Methode kann dazu beitragen, wichtige Fragen im Bereich der Amyloid- oder Proteinaggregation zu beantworten, z. B. ob die Größenheterogenität, die während der traditionellen SDD-AGE beobachtet wird, der native Zustand der Fasern in vivo oder das Ergebnis des Proteinabbaus oder der Dissoziation während der Gelelektrophorese ist. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie ohne spezielle Ausrüstung problemlos im Labor durchgeführt werden kann.

Es ist keine zusätzliche Ausrüstung erforderlich, die über die in herkömmlichem SDD-AGE verwendete Ausrüstung hinausgeht. Zuerst säen Sie die Amyloid-produzierenden HT-29-Darmkrebszellen in eine 10 Zentimeter große Gewebekulturschale. Inkubieren Sie die Zellen dann über Nacht bei 37 Grad Celsius mit 5 % Kohlendioxid.