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Morphometrische Protokoll für die objektive Beurteilung der Blastozyste Verhalten während der Ver...
Morphometrische Protokoll für die objektive Beurteilung der Blastozyste Verhalten während der Ver...
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JoVE Journal Bioengineering
Morphometric Protocol for the Objective Assessment of Blastocyst Behavior During Vitrification and Warming Steps

Morphometrische Protokoll für die objektive Beurteilung der Blastozyste Verhalten während der Verglasung und wärmenden Schritte

Full Text
9,336 Views
08:28 min
February 28, 2019

DOI: 10.3791/58540-v

Marjan Taborin1, Borut Kovačič1

1Department of Reproductive Medicine and Gynecological Endocrinology,University Medical Centre Maribor

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a morphometric protocol for monitoring blastocyst shrinkage and re-expansion during vitrification interventions and post-warming recovery. The protocol is designed for use in in vitro fertilization laboratories equipped with time-lapse microscopes.

Key Study Components

Area of Science

  • Reproductive Biology
  • Embryology
  • Vitrification Techniques

Background

  • Blastocyst development is critical in in vitro fertilization.
  • Monitoring blastocyst morphology can improve vitrification methods.
  • Time-lapse microscopy provides detailed insights into embryonic changes.
  • Effective vitrification is essential for successful embryo preservation.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for assessing blastocyst morphology during vitrification.
  • To enhance the understanding of blastocyst behavior during cryopreservation.
  • To provide a reliable method for evaluating vitrification techniques.

Methods Used

  • Application of a laser pulse to induce blastocyst shrinkage.
  • Use of time-lapse microscopy for real-time monitoring.
  • Assessment of blastocyst recovery post-warming.
  • Utilization of advanced image editing software for analysis.

Main Results

  • The protocol effectively monitors blastocyst shrinkage and re-expansion.
  • Insights into the effectiveness of vitrification methods were gained.
  • Time-lapse microscopy proved beneficial for detailed observation.
  • Results support the optimization of blastocyst vitrification techniques.

Conclusions

  • The morphometric protocol is a valuable tool for IVF laboratories.
  • It enhances the understanding of blastocyst dynamics during cryopreservation.
  • Future studies can build on this protocol to refine vitrification methods.

Frequently Asked Questions

What is the main focus of the study?
The study focuses on a morphometric protocol for monitoring blastocyst behavior during vitrification.
How can this protocol be applied?
It can be applied in IVF laboratories equipped with time-lapse microscopes.
What are the advantages of using time-lapse microscopy?
Time-lapse microscopy allows for real-time monitoring of embryonic changes.
What is the significance of blastocyst vitrification?
Vitrification is crucial for the preservation of embryos for future use.
What insights does the protocol provide?
It provides insights into the effectiveness of different vitrification methods.
What are the expected outcomes of using this protocol?
Expected outcomes include improved understanding and optimization of blastocyst vitrification techniques.

Hier präsentieren wir ein Time-Lapse morphometrische-Protokoll, um die Intensität der Blastozyste Schrumpfung und Re-Expansion während Previtrification Interventionen und Post-wärmende Erholung folgen. Die Anwendung des Protokolls ist möglich in in-vitro- Befruchtung Labors mit Zeitraffer Mikroskopen ausgestattet und wird bei der Entwicklung einer optimalen Blastozyste-Verglasung-Methode empfohlen.

Dieses morphometrische Protokoll ermöglicht die Überwachung der Intensität der Blastozystenschrumpfung und -wiederexpansion während früherer Verglasungsinterventionen und der Erholung nach der Erwärmung und gibt Einblicke in die Wirksamkeit von Virusverglasungsmethoden. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie auf In-vitro-Fertilisationslaboratorien mit Zeitraffermikroskopen und Computern mit fortschrittlicher Bildbearbeitungssoftware angewendet werden kann. Am fünften oder sechsten Tag der Expansion, unterziehen Sie eine Blastozyste mit mindestens ein paar inneren Zellmassenzellen und einem kohäsiven Trophektoderm einem 0,4 bis 0,7 Millisekunden Laserpuls mit einem Lochdurchmesser von 4,3 bis 9,4 Mikrometern tangential auf die Zona pellucida und die Kreuzung von zwei benachbarten trophectodermalen Zellen gerichtet.

Dann lassen Sie den Blastocoel für fünf Minuten ganz oder teilweise zusammenbrechen. Als nächstes verwenden Sie eine winzige Pipette, um aseptisch Gleichgewichtsmedium in die Löcher des Mikrotropfenbereichs einer neun-Well-Petrischale hinzuzufügen, die speziell für die Zeitraffermikroskopie und -aufzeichnung entwickelt wurde. Wenn das gesamte Medium hinzugefügt wurde, überlagern Sie den Mikrodropletbereich mit ca. 30 Mikrolitern Gleichgewichtsmedium.

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