Directed Differentiation of Hemogenic Endothelial Cells from Human Pluripotent Stem Cells

Elizabeth A. Nelson; Jingyao Qiu; Nicholas W. Chavkin; Karen K. Hirschi

doi:10.3791/62391

Gerichtete Differenzierung hämogener Endothelzellen aus humanen pluripotenten Stammzellen

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Developmental Biology

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Directed Differentiation of Hemogenic Endothelial Cells from Human Pluripotent Stem Cells

Gerichtete Differenzierung hämogener Endothelzellen aus humanen pluripotenten Stammzellen

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04:23 min

March 31, 2021

DOI: 10.3791/62391-v

Elizabeth A. Nelson^1,2, Jingyao Qiu^3,4, Nicholas W. Chavkin^1,2, Karen K. Hirschi^1,2,3,4,5

¹Department of Cell Biology,University of Virginia, ²Cardiovascular Research Center,University of Virginia, ³Department of Medicine,Yale University School of Medicine, ⁴Department of Genetics,Yale University School of Medicine, ⁵Yale Cardiovascular Research Center,Yale University School of Medicine

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Hier wird ein einfaches Protokoll für die gezielte Differenzierung von hämogenen Endothelzellen aus humanen pluripotenten Stammzellen in ca. 1 Woche vorgestellt.

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Erzeugung einer gut charakterisierten Population menschlicher hämogener Endothelzellen. Diese Zellen können verwendet werden, um die molekulare Regulation und den endothelialen zu hämatopoetischen Übergang zu untersuchen. Beginnen Sie mit der Kultivierung menschlicher embryonaler Stammzellen für vier Tage, um sie in primordiale Endothelzellen zu differenzieren.

Am fünften Tag saugen Sie das Medium über den Zellen ab. Anschließend waschen Sie die Zellen vorsichtig mit einem Milliliter DMEM/F-12 pro Vertiefung. Fügen Sie einen Milliliter frisch zubereitetes hämogenes Endothelzelldifferenzierungsmedium pro Vertiefung hinzu und inkubieren Sie die Zellen für 24 Stunden bei 37 Grad Celsius und 5% Kohlendioxid.

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