Klinische Mikrofluidik-Chip-Plattform zur Isolierung vielseitig zirkulierender Tumorzellen

Dieses Protokoll beschrieb eine Methode zur Zählung roter Tumorzellen und zur klinischen CTC-Isolierung. Zu Beginn werden die Tumorzellen MCF-7, MDA-MB-231 und HeLa in einem Zellkulturkolben einmal 10 bis 15 in einem Millimeter DMEM kultiviert, ergänzt mit 10 % fötalem Rinderserum und 1 % Penicillin-Streptomycin. Inkubieren Sie die Zellen bei 37 Grad Celsius mit 5% Kohlendioxid.

Wenn die Zelllinien als adhärente Monoschichten bis zu 95 % Konfluenz wachsen, lösen Sie sie zwei Minuten lang mit 0,25 %iger Trypsinlösung von der Kulturschale. Färben Sie die Tumorzellen durch Zugabe von drei Mikrolitern Calcein AM und stellen Sie die Schale für 30 Minuten in den Inkubator. Am Ende der Inkubation werden alle Zellen mit Trypsin verdaut.