Técnicas de transferencia (Blotting)

En este video, describimos el ensayo de dot blot para cuantificar un genoma viral. La intensidad de la señal está directamente relacionada con la cantidad de ADN viral en la muestra.

Este video describe la técnica de dot-blot para determinar el nivel de metilación del ADN en condrocitos humanos in vitro a través de la transferencia de muestras de ADN en una membrana de nylon y la posterior visualización utilizando anticuerpos monoclonales. Esto ayuda a determinar el fenotipo de los condrocitos en varias etapas del cultivo.

Este video muestra una técnica cuantitativa de dot blot, o QDB, para la cuantificación absoluta de proteínas de interés en una muestra de tejido. Las proteínas de la muestra se inmovilizan en la membrana de nitrocelulosa dentro de los pocillos de una placa QDB. Utilizando anticuerpos específicos de proteínas diana marcados con una enzima peroxidasa, un sustrato quimioluminiscente se oxida para producir luz, que se mide para determinar la concentración de proteínas de la muestra.

El video muestra una técnica de western blot basada en la normalización total de proteínas para cuantificar la expresión de la proteína objetivo en una muestra. Mediante la utilización de la tinción total de proteínas de la muestra, se realiza un análisis radiométrico para determinar el nivel de expresión relativa de la proteína objetivo.

El video describe una técnica de western blot de una sola célula que identifica la composición de las células individuales capturadas en un chip de western blot de una sola célula en una suspensión heterogénea. La técnica detecta la intensidad de fluorescencia del fluoróforo marcado a un marcador proteico específico de la célula diana.

Este video describe la transferencia occidental basada en quimioluminiscencia de lisados inmunoprecipitados. La técnica ayuda a determinar el procesamiento y la activación de proteínas. La señal quimioluminiscente detectada es proporcional al nivel de procesamiento de proteínas durante su activación.

En este video, describimos la técnica de Southern blot para identificar eventos de recombinación homólogos en el genoma de células madre embrionarias de ratón utilizando sondas radiomarcadas. Las regiones de ADN que contienen eventos de recombinación homólogos aparecen como bandas distintas cuando la membrana que contiene el ADN unido a la sonda se expone a los rayos X.

En este video, demostramos el northern blot, una técnica de hibridación para detectar y cuantificar microRNAs (miRNAs) a partir de ARN total extraído de tejido vegetal.