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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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배아 미세 주입

 
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배아 미세 주입 : 얼룩말 어동에 화합물을 전달하는 기술

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- 개의 암컷과 두 개의 수컷 생선을 주입 하기 1일 전에 나누어 사육 탱크에 넣습니다. 다음 날 아침, 분배기를 제거하고 탱크 의 바닥에서 계란을 관찰 때까지 물고기가 번식하게하십시오.

별도의 페트리 접시에 10개의 배아를 주입되지 않은 대조군으로 보관하십시오.

주사 후, 28섭씨에서 메틸렌 블루로 E3 배지에서 배아를 성장. 배아의 건강을 계속 점검하십시오.

- 먼저, 텍스트 프로토콜에 설명된 바와 같이 주사를 수행하기 전에 밤 사육을 위한 제브라피피 피험자를 준비합니다.

주사 바늘을 준비하려면 마이크로 파이펫 풀러를 사용하여 1mm 유리 모세관을 당긴 다음 면도날로 생성된 유리 바늘의 끝을 잘라 서 각진 개구부를 얻습니다.

- 배아 미세 주입을 수행하기 전에, 바늘을 준비하고 염료 전용 용액을 사용하여 제어 배아를 주입하고 개발 24 시간 후에 생존을 기록하십시오.

- 다음으로, 10-15개의 배아를 대조군 군수로 선택하고 별도의 표기된 페트리 접시에 넣습니다. 해부 현미경하에서, 배아의 노른자 낭에 용액의 나노리터 1개를 주입한 다음, 주입된 배아를 표기된 페트리 접시에 반품하고 메틸렌 블루로 1X E3 매체로 덮는다. 주입된 배아는 24시간 동안 인큐베이터에 주입된 배아를 24시간 동안 검사한다.

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